07-354
Anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys18)
serum, Upstate®
Sinonimo/i:
H3K18Ac, Histone H3 (acetyl K18)
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About This Item
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Origine biologica
rabbit
Livello qualitativo
Forma dell’anticorpo
serum
Tipo di anticorpo
primary antibodies
Clone
polyclonal
Reattività contro le specie
yeast, Saccharomyces cerevisiae, human
Reattività contro le specie (prevista in base all’omologia)
vertebrates (most common)
Produttore/marchio commerciale
Upstate®
tecniche
ChIP: suitable (ChIP-seq)
dot blot: suitable
western blot: suitable
N° accesso NCBI
N° accesso UniProt
Condizioni di spedizione
dry ice
modifica post-traduzionali bersaglio
acetylation (Lys18)
Informazioni sul gene
human ... H3C1(8350)
Descrizione generale
L′acetilazione dell′istone H3 ha luogo a livello di numerose lisine situate in varie posizioni della coda istonica ed è effettuata da una famiglia di enzimi noti come istone-acetiltransferasi (HAT).
Specificità
Immunogeno
Applicazioni
dati ottenuti con un lotto rappresentativo.
La cromatina sonicata preparata da cellule HeLa (equivalenti a 1 X 10E6 cellule/IP) è stata immunoprecipitata usando 2 µL di siero di coniglio normale o 2 µL di anti-acetil-istone H3 (Lys18) e il kit Magna ChIP A (N° Cat. 17-610). La riuscita dell′immunoprecipitazione dell'acetil-istone H3 (Lys18)è stata confermata mediante qPCR utilizzando primer di controllo specifici per la regione del promotore del gene GADPH umano come locus positivo e i primer della β-globina come locus negativo. I dati sono presentati come input percentuale di ciascun campione IP rispetto all′input di cromatina per ciascun amplicone e campione CHIP come indicato.
Per la descrizione dell'esperimento, consultare il protocollo del kit EZ-Magna ChIP A (N° Cat. 17-408) o EZ-ChIP (N° Cat. 17-371).
ChIP-sequenziamento:
Dati ottenuti da un lotto rappresentativo. L′immunoprecipitazione della cromatina è stata ottenuta con il kit Magna ChIP HiSens (N° Cat. 17-10460), 2 μg di anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys18) (N° Cat. 07-354), 20 µL di sferette con Proteina A/G e cromatina trattata con formaldeide (crosslinked) ottenuta da 1e6 cellule HeLa, seguita da purificazione del DNA su sferette magnetiche. Le librerie sono state preparate da campioni di DNA input e ChIP usando protocolli standard con adattatori Illumina contrassegnati da codici a barre e analizzati nello strumento Illumina HiSeq. Gli oltre 10 milioni di letture contenute nei file FastQ del sequenziatore sono stati mappati usando il sistema di allineamento Bowtie (http://bowtie-bio.sourceforge.net/manual.shtml) dopo rimozione dei tag con TagDust (http://genome.gsc.riken.jp/osc/english/dataresource/). I picchi sono stati identificati usando MACS (http://luelab.dfci.harvard.edu/MACS/) e i picchi e i reads sono stati visualizzati sotto forma di track personalizzata sul Genome Browser dell′UCSC (http://genome.ucsc.edu) da file nei formati BigWig e BED.
Analisi di Western blotting:
Dati ottenuti con un lotto rappresentativo.
L'istone H3 ricombinante (corsia 1, N° Cat. 14-494) e proteine estratte con acido di cellule HeLa (N° Cat. 17-305) trattate (corsia 2) e non trattate (corsia 3) con butirrato di sodio sono stati esposti all'anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys18) (diluizione 1:10.000).
La freccia indica l'acetil-istone H3 (Lys18) (17 kDa).
Dot blot:
Dati ottenuti con un lotto rappresentativo.
Quantità pari a 40 ng e 4 ng di peptidi istonici con varie modificazioni (vedere tabella 1) sono state trasferite su una membrana di PVDF ed esposte all'anticorpo anti-acetil-istone H3 (Lys18) (diluizione 1:5.000). Le proteine sono state visualizzate mediante un anticorpo di capra anti-IgG di coniglio coniugato con HRP e un sistema di rivelazione per chemiluminescenza. L'immagine è stata ottenuta con 60 secondi di esposizione.
Qualità
Descrizione del bersaglio
Linkage
Stato fisico
Altre note
Note legali
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Codice della classe di stoccaggio
12 - Non Combustible Liquids
Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)
WGK 1
Punto d’infiammabilità (°F)
Not applicable
Punto d’infiammabilità (°C)
Not applicable
Certificati d'analisi (COA)
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