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05-806

Sigma-Aldrich

Anticorpo anti-fosfo-istone H3 (Ser10), clone 3H10

clone 3H10, Upstate®, from mouse

Sinonimo/i:

H3 histone, family 3A, H3S10P, Histone H3 (phospho S10), H3 histone, family 3A, H3 histone, family 3B, H3 histone, family 3B (H3.3B)

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About This Item

Codice UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

Origine biologica

mouse

Livello qualitativo

Forma dell’anticorpo

purified immunoglobulin

Tipo di anticorpo

primary antibodies

Clone

3H10, monoclonal

Reattività contro le specie

human

Produttore/marchio commerciale

Upstate®

tecniche

flow cytometry: suitable
immunocytochemistry: suitable
immunofluorescence: suitable
inhibition assay: suitable (peptide)
multiplexing: suitable
western blot: suitable

Isotipo

IgG1κ

N° accesso NCBI

N° accesso UniProt

Condizioni di spedizione

wet ice

modifica post-traduzionali bersaglio

phosphorylation (pSer10)

Informazioni sul gene

human ... HIST1H3F(8968)

Categorie correlate

Descrizione generale

L′istone H3 è una delle cinque principali proteine istoniche coinvolte nella struttura della cromatina nelle cellule eucariotiche. Caratterizzato da un dominio globulare principale e da una lunga coda N-terminale, l′H3 è implicato nella costituzione dei nucleosomi, le perle della cosiddetta struttura a ′collana di perle′. La coda N-terminale dell′istone H3 fuoriesce dal centro globulare del nucleosoma e può subire diversi tipi di modifiche epigenetiche che influenzano i processi cellulari. Tali modifiche comprendono il legame covalente di gruppi metile o acetile agli amminoacidi lisina e arginina e la fosforilazione della serina o della treonina.

Specificità

Istone H3 fosforilato alla Ser10.
Prevista reattività crociata con molte specie.

Applicazioni

Citometria a flusso
Un laboratorio indipendente ha riferito che questo anticorpo rivela l'istone H3 fosforilato mediante citometria a flusso.

Saggio di specificità istone-peptide Beadlyte
Diluizioni da 1:1.000 a 1:81.000 di un lotto rappresentativo sono state incubate con peptidi di istone H3 contenenti varie modifiche coniugati a microsfere Luminex. (Figura B). Solo il peptide contenente fosfo-serina 10 è stato rilevato.


Immunocitochimica
un precedente lotto di questo anticorpo alla concentrazione di 0,2 μg/mL ha permesso di rivelare la positività per i cromosomi all'immunocolorazione in cellule mitotiche A431 e cellule HeLa fissate con etanolo al 95% e acido acetico al 5% e permeabilizzate con Triton X-100 allo 0,1%.

Saggio di inibizione con peptide
La rivelazione dell'istone H3 in immunoblot di estratti acidi di cellule di HeLa, trattate con Colcemid, con l'anti-fosfo-istone H3 (Ser10) è stata ridotta da una concentrazione 10 μM di peptide di istone H3 contenente fosfo-serina 10, ma non da peptidi contenenti fosfo-serina 28 o da una sequenza dellistone H3 non modificata (Figura C).

Immunofluorescenza
L'anticorpo anti-fosfo-istone H3 (Ser10), clone 3H10, è un anticorpo monoclonale di topo per la rivelazione dell'istone H3 fosforilato alla serina 10. Questo mAb purificato, noto anche come H3S10p, è oggetto di pubblicazioni su riviste soggette a "peer review" ed è stato convalidato in FC, ICC, IF, PIA, WB, Mplex.

Qualità

Valutata abitualmente mediante Western blotting su proteine estratte in acido da cellule HeLa mitotiche trattate con Colcemid (N° Catalogo 17-306).

Saggio di Western blotting:
Questo lotto a una concentrazione tra 0,05 e 0,5 μg/mL ha rivelato l'istone H3 fosforilato in proteine estratte in acido da cellule mitotiche HeLa trattate con Colcemid (N° Catalogo 17-306), ma non l'istone H3 ricombinante non modificato (n. catalogo 14-494) (Figura A).

Descrizione del bersaglio

17 kDa

Stato fisico

Formato: purificato
IgG1k purificate di topo in tampone contenente Tris-glicina 0,1 M, pH 7,4, NaCl 0,15 M con lo 0,05% di azoturo di sodio.

Stoccaggio e stabilità

Stabile per 1 anno dalla data di ricezione a 2-8 °C.

Raccomandazioni per la manipolazione
una volta ricevuto il prodotto, prima di rimuovere il tappo, centrifugare il flaconcino e mescolare delicatamente la soluzione. suddividere in aliquote in provette da microcentrifuga e conservare a -20 °C. evitare ripetuti cicli di congelamento e scongelamento che potrebbero danneggiare le IgG e compromettere le prestazioni del prodotto. N.B.: La variabilità di temperatura del congelatore può portare la temperatura al di sotto dei -20°C, con conseguente congelamento delle soluzioni contenenti glicerolo conservate.

Risultati analitici

Controllo
Estratti di cellule 293 trattate con raggi UV, estratti di cellule HeLa trattate con raggi UV, tessuto di tumore mammario, estratti di cellule HEPG2.

Altre note

Concentrazione: per la concentrazione specifica del lotto, fare riferimento al Certificato di Analisi.

Note legali

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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Raccomandato

Codice della classe di stoccaggio

12 - Non Combustible Liquids

Classe di pericolosità dell'acqua (WGK)

WGK 1

Punto d’infiammabilità (°F)

Not applicable

Punto d’infiammabilità (°C)

Not applicable


Certificati d'analisi (COA)

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Dynamic changes in the genomic localization of DNA replication-related element binding factor during the cell cycle.
Gurudatta, BV; Yang, J; Van Bortle, K; Donlin-Asp, PG; Corces, VG
Cell Cycle null
Maomao Zhang et al.
PloS one, 10(3), e0119285-e0119285 (2015-03-06)
The spindle assembly checkpoint (SAC) maintains the fidelity of chromosome segregation during mitosis. Nonpathogenic cells lacking the SAC are typically only found in cleavage stage metazoan embryos, which do not acquire functional checkpoints until the mid-blastula transition (MBT). It is
Phosphoinositide 3-kinase alpha-dependent regulation of branching morphogenesis in murine embryonic lung: evidence for a role in determining morphogenic properties of FGF7.
Carter, E; Miron-Buchacra, G; Goldoni, S; Danahay, H; Westwick, J; Watson, ML; Tosh, D; Ward, SG
Testing null
Christopher Runyan et al.
Development (Cambridge, England), 133(24), 4861-4869 (2006-11-17)
During germ-cell migration in the mouse, the dynamics of embryo growth cause many germ cells to be left outside the range of chemoattractive signals from the gonad. At E10.5, movie analysis has shown that germ cells remaining in the midline
Rac1-dependent recruitment of PAK2 to G2 phase centrosomes and their roles in the regulation of mitotic entry.
May, M; Schelle, I; Brakebusch, C; Rottner, K; Genth, H
Cell Cycle null

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