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DUO92005

Sigma-Aldrich

Sonde PLA® in situ DuolinkDuolink® anti-lapin MINUS

Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Rabbit MINUS

Synonyme(s) :

in situ Proximity Ligation Assay reagent, Protein Protein Interaction Assay reagent

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About This Item

Code UNSPSC :
12352203
Nomenclature NACRES :
NA.32

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Source biologique

donkey (polyclonal)

Niveau de qualité

Forme d'anticorps

affinity purified immunoglobulin (secondary antibody)

Type de produit anticorps

primary antibodies

Gamme de produits

Duolink®

Espèces réactives

rabbit

Technique(s)

immunofluorescence: suitable
proximity ligation assay: suitable

Adéquation

suitable for brightfield
suitable for fluorescence

Conditions d'expédition

wet ice

Température de stockage

2-8°C

Application

L'essai de ligature de proximité (Proximity Ligation Assay, PLA®) Duolink® permet la détection endogène des interactions entre protéines, des modifications post-traductionnelles et du niveau d'expression des protéines au niveau monomoléculaire, sur des cellules fixées et des échantillons de tissus.

Selon les réactifs de détection employés, ce produit peut être utilisé pour le protocole à fluorescence in situ Duolink® ou le protocole à fond clair in situ Duolink®.

Consultez notre portail d'information sur les essais PLA Duolink® pour en savoir plus sur la façon de réaliser une expérience Duolink®, les applications, la résolution des problèmes et bien plus encore.

Pour réaliser une expérience PLA in situ Duolink® complète, vous avez besoin de deux anticorps primaires (validés par PLA, IHC, ICC ou IF) reconnaissant deux épitopes cibles. Il vous faut également une paire de sondes PLA de deux espèces différentes (une sonde positive et une sonde négative), des réactifs de détection, des tampons de lavage et du milieu de montage. Notez que les anticorps primaires doivent provenir de la même espèce que les sondes PLA Duolink®. L'analyse s'effectue sur un équipement de test d'immunofluorescence standard. De la peroxydase de raifort (HRP) est également disponible pour la méthode de détection en fond clair.
Spécificité
La sonde PLA anti-lapin réagit avec l'ensemble de la molécule d'IgG de lapin ainsi qu'avec les chaînes légères d'autres immunoglobulines de lapin. Cette sonde présente une très faible réactivité croisée avec les protéines sériques humaines, de bovin, de poulet, de chèvre, de cobaye, de hamster doré, de cheval, de souris, de rat et de mouton. Ce produit doit être utilisé avec une sonde positive d'une espèce différente. Consultez notre guide de sélection de produits pour obtenir de plus amples informations.

Note d'application
Cette application nécessite deux anticorps primaires produits par des espèces différentes. Testez vos anticorps primaires (de type IgG, monoclonaux ou polyclonaux) avec un test standard d'immunofluorescence (IF), d'immunohistochimie (IHC) ou d'immunocytochimie (ICC) pour déterminer les conditions optimales de fixation, de blocage et de titrage. Les réactifs de PLA in situ Duolink® peuvent être utilisés sur des cellules fixées, des cellules centrifugées sur un appareil Cytospin, des cellules cultivées sur une lame, fixées au formol et incluses en paraffine (FFPE), ou du tissu (frais ou congelé). Aucun nombre minimal de cellules n'est requis.

Laissez-nous faire le travail pour vous et découvrez notre Programme de services sur mesure pour accélérer vos projets Duolink®.

Consulter la liste complète des produits Duolink®.

Caractéristiques et avantages

  • Aucune surexpression ou manipulation génétique
  • Grande spécificité (moins de faux positifs)
  • Sensibilité monomoléculaire grâce à l'amplification par cercle roulant
  • Possibilité de quantification relative
  • Aucun équipement spécifique requis
  • Plus rapide et plus simple que la technique FRET
  • Plus précis qu'une co-immunoprécipitation
  • Résultats prêts à être publiés

Composants

Ce produit comprend les composants suivants :
  • 5 sondes PLA anti-lapin négatives (anticorps secondaire d'âne anti-lapin conjugué à un oligonucléotide négatif)
  • 1 solution de blocage (réactif permettant de bloquer l'échantillon)
  • 1 diluant pour anticorps (pour la dilution des sondes PLA et des anticorps primaires)
Se reporter à la fiche technique pour de plus amples informations.

Informations légales

Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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Code de la classe de stockage

10 - Combustible liquids


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Hyun Jik Lee et al.
Cell death and differentiation, 26(9), 1716-1734 (2018-11-23)
Hypoxia inducible factor 1α (HIF1α) is a master regulator leading to metabolic adaptation, an essential physiological process to maintain the survival of stem cells under hypoxia. However, it is poorly understood how HIF1α translocates into the nucleus in stem cells
Roberto Di Maio et al.
Science translational medicine, 10(451) (2018-07-27)
Missense mutations in leucine-rich repeat kinase 2 (LRRK2) cause familial Parkinson's disease (PD). However, a potential role of wild-type LRRK2 in idiopathic PD (iPD) remains unclear. Here, we developed proximity ligation assays to assess Ser1292 phosphorylation of LRRK2 and, separately
Ivan Matic et al.
Molecular cell, 39(4), 641-652 (2010-08-28)
Reversible protein modification by small ubiquitin-like modifiers (SUMOs) is critical for eukaryotic life. Mass spectrometry-based proteomics has proven effective at identifying hundreds of potential SUMO target proteins. However, direct identification of SUMO acceptor lysines in complex samples by mass spectrometry
Pengcheng Zhu et al.
Cancer cell, 19(3), 401-415 (2011-03-15)
Cancer is a leading cause of death worldwide. Tumor cells exploit various signaling pathways to promote their growth and metastasis. To our knowledge, the role of angiopoietin-like 4 protein (ANGPTL4) in cancer remains undefined. Here, we found that elevated ANGPTL4
John J Peluso et al.
Endocrinology, 153(8), 3929-3939 (2012-06-22)
Progesterone (P4) receptor membrane component (PGRMC)1 is detected as a 22-kDa band as well as higher molecular mass bands (>50 kDa) in spontaneously immortalized granulosa cells. That these higher molecular mass bands represent PGRMC1 is supported by the findings that

Articles

Support information including tips and tricks, frequently asked questions, and basic troubleshooting.

Things to consider for preparation, setup and execution of the Duolink® assay protocol

Protocoles

Duolink® PLA reagents enable brightfield detection and quantification of proteins and interactions in tissue samples.

Contenu apparenté

Applications to detect, quantify and visualize protein-protein interactions, post-translational modifications and low expression protein detection using proximity ligation assay

Questions

1–4 of 4 Questions  
  1. Has Duolink been used for detection of changes in protein expression?

    1 answer
    1. The following reference cites the use of Duolink to detect changes in protein expression in Human. Raizer et al., Cancer 2010;116:5297-305

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  2. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    1 answer
    1. Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.

      Helpful?

  3. What epitope on the antibody is recognized by the Duolink PLA Probes?

    1 answer
    1. The Duolink PLA Probes offered are donkey polyclonal antibodies directed to the whole molecule (heavy and light chains).  They are affinity purified.  The same polyclonal antibody is conjugated to the Plus and Minus Oligos. The Plus and Minus probes can be used together (to detect a single antibody) since they can recognize multiple sites.  The anti-mouse IgG PLA labeled antibodies may cross-react with rat but this is not consistent. Do not use this product with rat antibodies.  It is best to label anti-rat secondary antibodies with the Duolink Probemaker kit.The anti-goat IgG PLA labeled antibodies have cross-reactivity with sheep IgG and can be recommended for this application.

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  4. How many reactions can be performed with the Duolink® In Situ Starter Kit?

    1 answer
    1. All of the starter kits for the Duolink product line will perform 30 reactions using 40 ul per reaction.    DUO92101 - Duolink® In Situ Red Starter Kit Mouse/Rabbit    DUO92102 - Duolink® In Situ Orange Starter Kit Mouse/Rabbit    DUO92103 - Duolink® In Situ Red Starter Kit Mouse/Goat    DUO92104 - Duolink® In Situ Orange Starter Kit Mouse/Goat    DUO92105 - Duolink® In Situ Red Starter Kit Goat/Rabbit    DUO92106 - Duolink® In Situ Orange Starter Kit Goat/Rabbit

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