Production de vaccins à ADN plasmidique
Procédé de production de vaccins à ADN plasmidique
L'ADN plasmidique (ADNp) est un composant important des thérapies à vecteur viral. Ces molécules d'ADN circulaires peuvent également servir de transgène thérapeutique, en codant pour la capside virale, ou directement de vaccin. Des vaccins à ADN ont été approuvés pour un usage animal, d'autres ont été développés contre le virus SARS-CoV-2. L'ADNp est aussi employé comme produit de départ dans les vaccins à ARNm.
La fabrication d'ADNp présente plusieurs difficultés. La production se fait via une fermentation bactérienne qui souffre d'une faible productivité. De plus, le procédé de purification est compliqué par la forte viscosité du lysat bactérien et par le fait que ce lysat contient des contaminants aux propriétés similaires à l'ADNp, entraînant une séparation de faible résolution. Ces problèmes peuvent être résolus par l'utilisation d'une plateforme complète intégrant des technologies de pointe à usage unique.
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Accélérer le passage à la phase clinique tout en augmentant la productivité upstream
L'ADNp présente plusieurs difficultés qui peuvent être surmontées grâce à des technologies de pointe à usage unique pour la récolte des cellules et la clarification. La centrifugation ou la microfiltration tangentielle (MF-TFF) permet de retirer le bouillon de fermentation épuisé, tandis que des filtres en profondeur ont montré d'excellentes performances dans un large éventail de conditions pour la clarification.
Atteindre les objectifs de rendement et d'efficacité avec une élimination robuste des impuretés
L'échange d'anions (AEX) a fait ses preuves en tant que méthode de clairance robuste des protéines, de l'ARN, de l'ADNg et des endotoxines. Les isoformes des plasmides sont toutefois très difficiles à séparer par échange d'ions. Dans ce cas, il est possible d'opter pour la chromatographie hydrophobe (HIC) qui est bien placée après l'AEX en raison du pool d'éluat à forte teneur en sels.
Maximiser la quantité de produit récupéré en aval
Purifier de l'ADNp est complexe et nécessite d'associer la filtration tangentielle (TFF) à la chromatographie. La TFF peut être positionnée entre l'étape de clarification et l'étape de chromatographie, où les impuretés résiduelles peuvent être retirées par diafiltration et où l'ADNp peut être concentré par chromatographie. La purification chromatographique peut se fait aussi bien sur des résines que des membranes. Les résines permettent d'avoir des installations flexibles et une bonne sélectivité, tandis que les membranes procurent une grande capacité d'adsorption et de hauts débits.
Garantir la sécurité des patients
Une fois purifié et formulé, l'ADNp doit être stérilisé par filtration pour garantir la sécurité des patients. Même si cette étape peut sembler relativement simple, filtrer l'ADNp peut s'avérer difficile en raison de la grande taille des plasmides, de la viscosité importante de la solution et de la rétention bactérienne pour les formulations contenant des adjuvants. Un grand nombre de paramètres opérationnels doivent être pris en compte pour optimiser la filtration de qualité "stérilisation", notamment la concentration en sels, la taille du plasmide, sa pureté et sa concentration.
Clarification
Réalisez une clarification efficace et robuste pour maximiser le succès de vos opérations de purification downstream en réduisant les niveaux d'impuretés et de contaminants.
- Clarification primaire/secondaire avec les filtres en profondeur Millistak+® HC POD
- Clarification primaire avec les filtres en profondeur Clarisolve®
- Clarification secondaire avec les filtres en profondeur Milligard®
- Clarification secondaire avec les cartouches Polysep™ II
- Solution Mobius® FlexReady pour la clarification à grande échelle
Filtration à flux tangentiel downstream
Atteignez vos objectifs de rendement, d'efficacité et de quantité d'ADNp récupéré tout en garantissant une élimination robuste des impuretés.
Milieux et tampons de culture cellulaire liquides pour le bioprocessing
Nous proposons la meilleure qualité de liquides stérilisés par filtration du marché : nos produits de NEP et de SEP, nos tampons et nos milieux de culture cellulaire prêts à l'emploi proviennent de sites conformes aux BPF répartis dans le monde entier et vous permettent d'optimiser votre production biopharmaceutique.
Chromatographie downstream
Relevez et surmontez n'importe quel défi de purification d'ADNp par chromatographie dans votre procédé downstream pour augmenter votre productivité, votre efficacité et votre rapidité.
- Tampons et ajusteurs de pH
- Chromatographie sur membrane avec les membranes de chromatographie Natrix® Q Pilot
- Chromatographie sur membrane avec Natrix®Q Recon Mini
- Chromatographie de capture et/ou de polissage avec les résines de chromatographie Fractogel® EMD DEAE
- Chromatographie de capture et/ou de polissage avec les résines de chromatographie Fractogel® EMD DMAE
Formulation, filtration stérilisante et remplissage-finition
Garantissez la sécurité des patients avec un procédé de filtration stérilisante, fiable et robuste.
Logiciel d'analyse et technologies PAT
Il est possible d'utiliser des technologies d'analyse des procédés (PAT) et un logiciel d'analyse pour intégrer la qualité aux procédés de fabrication de vaccins à sous-unités protéiques en surveillant et en contrôlant les procédés en ligne et en temps réel.
Services liés aux produits
Nous proposons tout un éventail de services liés aux produits pour répondre aux exigences de votre travail, de l'installation de systèmes et d'équipements, en passant par la qualification de systèmes, les services de validation et les contrats de maintenance et de service, jusqu'à la formation et aux services spécialisés.
Ressources apparentées
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- Note d'application : Chromatographic Purification of Plasmid DNA
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- Note d'application : Scalable Purification of Plasmid DNA – Strategies & Considerations for Vaccine and Gene Therapy Manufacturing
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