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  • Interleukin 17 regulates Mer tyrosine kinase-positive cells in Pseudomonas aeruginosa keratitis.

Interleukin 17 regulates Mer tyrosine kinase-positive cells in Pseudomonas aeruginosa keratitis.

Investigative ophthalmology & visual science (2014-10-10)
Cui Li, Sharon A McClellan, Ronald Barrett, Linda D Hazlett
ZUSAMMENFASSUNG

To determine if IL-17 regulates Mer tyrosine kinase-positive (MerTK+) cells in Pseudomonas aeruginosa keratitis. Interleukin 17 was tested in normal and infected cornea of susceptible C57BL/6 and resistant BALB/c mice. The latter were treated with recombinant mouse (rm) IL-17; both groups were treated with IL-17 neutralizing antibody. Mice were infected, and clinical score, PCR, ELISA, and myeloperoxidase (MPO) assays tested expression of proinflammatory and anti-inflammatory mediators and polymorphonuclear neutrophilic leukocyte (PMN) infiltrate. Fas and Fas ligand (FasL) protein levels were assessed in both mouse strains, while MerTK+ cells were examined by immunostaining and cell sorting before and after IL-17 neutralization. The IL-17 mRNA and protein were higher in C57BL/6 versus BALB/c cornea after infection. The rmIL-17 treatment of BALB/c mice modified proinflammatory and anti-inflammatory mediators, but clinical score and MPO assay revealed no differences. However, only BALB/c mice treated with IL-17 neutralizing antibody showed increased disease, macrophage inflammatory protein (MIP) 2, and MPO levels. Fas and FasL protein levels, elevated earlier in BALB/c versus C57BL/6 mice, correlated with significantly more MerTK+ cells in BALB/c cornea at 3 days after infection. Neutralization of IL-17 in C57BL/6 mice elevated MerTK+ cells, while similar treatment of BALB/c mice significantly decreased them. These data provide evidence that IL-17 expression is higher in C57BL/6 versus BALB/c cornea after infection and that the latter group has more MerTK+ cells. Exogenous rmIL-17 failed to shift the disease response in resistant mice, but its neutralization resulted in worsened disease and reduced MerTK+ cells. Neutralization of IL-17 in C57BL/6 mice increased MerTK+ cells but did not dramatically shift the disease response.

MATERIALIEN
Produktnummer
Marke
Produktbeschreibung

Sigma-Aldrich
Hexadecyltrimethylammoniumbromid, ≥98%
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Sigma-Aldrich
DL-Dithiothreitol -Lösung, BioUltra, for molecular biology, ~1 M in H2O
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Supelco
DL-Dithiothreitol -Lösung, 1 M in H2O
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Sigma-Aldrich
Hexadecyltrimethylammoniumbromid, for molecular biology, ≥99%
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Sigma-Aldrich
Hexadecyltrimethylammoniumbromid, BioXtra, ≥99%
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Sigma-Aldrich
Fluorescein, for fluorescence, free acid
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Sigma-Aldrich
Hexadecyltrimethylammoniumbromid, BioUltra, for molecular biology, ≥99.0% (AT)
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USP
Cetrimoniumbromid, United States Pharmacopeia (USP) Reference Standard
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Sigma-Aldrich
β-D-Allose, rare aldohexose sugar
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Sigma-Aldrich
Hexadecyltrimethylammoniumbromid, ≥96.0% (AT)
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Fluorescein, European Pharmacopoeia (EP) Reference Standard
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Supelco
Hexadecyltrimethylammoniumbromid, suitable for ion pair chromatography, LiChropur
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Supelco
Hexadecyltrimethylammoniumbromid, analytical standard
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SAFC
Hexadecyltrimethylammoniumbromid, USP/NF
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