Medium 199

Die Hand eines Wissenschaftlers in einem blauen Handschuh, der mit einer Pipette eine rote Flüssigkeit in einen von mehreren Wells einer Multiwell-Platte überträgt, was auf eine Laborumgebung mit Schwerpunkt auf biologischer oder chemischer Forschung hinweist.

Medium 199, oft auch als M199 bezeichnet, ist ein Zellkulturmedium, das von J.F. Morgan im Jahr 1950 entwickelt wurde. Es avancierte zu einem frühen synthetischen Medium für die Kultivierung von embryonalen Hühnerfibroblasten und anderen Säugerzellen in Laborumgebungen. Die Zusammensetzung von Medium 199 kann je nach den spezifischen Anforderungen der zu kultivierenden Zelllinie leicht variieren, die Grundformulierung enthält jedoch in der Regel Salze wie Kaliumchlorid, Natriumchlorid, Calciumchlorid und Magnesiumsulfat.

Medium 199 enthält außerdem verschiedene essenzielle und nicht-essenzielle Aminosäuren, Glukose, Cholesterin, Pyrimidine und Vitamine, darunter Thiamin, Riboflavin und Biotin. Es enthält keine Proteine, Lipide oder Wachstumsfaktoren; stattdessen verwendet M199 ein Natriumbicarbonat-Puffersystem (2,2 g/l) und benötigt eine 5–10%ige CO2-Umgebung, um einen physiologisch geeigneten pH-Wert aufrechtzuerhalten.

Medium 199 ist in verschiedenen Formulierungen erhältlich, die Earle- oder Hanks-Salze,
L-Glutamin, HEPES, stabiles Glutamin und Natriumbicarbonat enthalten können, und ist sowohl in flüssiger als auch in Pulverform erhältlich. Die flüssige Form ist bereits gebrauchsfertig vorbereitet, während die Pulverform aus dehydriertem Material besteht, das vor der Verwendung mit sterilem Wasser oder einer Pufferlösung rekonstituiert werden muss.

Anwendungen von Medium 199

Medium 199 wurde ursprünglich für chemisch definierte Kulturbedingungen frei von tierischen Bestandteilen entwickelt und eignet sich daher hervorragend für die Virologie und die Impfstoffproduktion, einschließlich der Herstellung von Impfstoffen im Großmaßstab. Außerdem spielte M199 eine wichtige Rolle bei der Polio-Impfkampagne von 1955. Sein breites Anwendungsspektrum erstreckt sich auch auf die Herstellung von Biologika, das Wirkstoffscreening und toxikologische Studien, wodurch Fortschritte in der Medizin und Biotechnologie ermöglicht werden.

Medium 199 vs. DMEM

Dulbecco Modified Eagle's Medium (DMEM) und Medium 199 sind zwei häufig verwendete Zellkulturmedien, weisen jedoch einige wesentliche Unterschiede auf. Im Vergleich zu Medium 199 enthält DMEM in der Regel höhere Konzentrationen an Aminosäuren, Vitaminen, Glukose und anorganischem Phosphat. Die höhere Nährstoffkonzentration von DMEM erlaubt das Wachstum eines breiten Spektrums von Zelllinien.

DMEM verwendet außerdem ein Phosphatpuffersystem, um den pH-Wert ohne zusätzliches CO₂ stabil zu halten. Medium 199 setzt stattdessen auf ein Natriumbicarbonat-Puffersystem (2,2 g/l) und benötigt eine 5 - 10%ige CO₂-Umgebung, um einen physiologisch geeigneten pH-Wert aufrechtzuerhalten.

Durch die Unterschiede bei der Zusammensetzung und Art der pH-Regulierung eignen sich DMEM und Medium 199 für unterschiedliche Zellkulturanforderungen. Für Forschungszwecke sollte das geeignete Medium in Abhängigkeit von den spezifischen Versuchsanforderungen gewählt werden.

Zugehörige Anwendungen

Herstellung von Zellkulturmedien

Herstellung von Kulturmedien für die In-vitro-Zellkultivierung einschließlich Herstellung verschiedener Medienformate, Sterilisationsmethoden, Supplemente für Zellwachstum und -regulierung, Medienaufbewahrung und -anwendung.

Säugerzellkultur

Anwendungen, Grundlagen und Methoden für die In-vitro-Kultivierung von Säugerzellen einschließlich Links zu Artikeln, Protokollen und Videos zur korrekten aseptischen Arbeitsweise, Passagierung und Subkultivierung sowie Erwägungen zu Kulturmedien.

Primärzellkultur

Primärzellen, die direkt aus menschlichen und tierischen Quellen isoliert werden, behalten die physiologische Relevanz der Gewebe, aus denen sie stammen, bei und werden für ADME/Tox-Screening verwendet. Anwendungen und Methoden für die In-vitro-Kultivierung primärer Säugerzellen finden.

Stammzellkultur

Ein Überblick über verschiedene Stammzelltypen, Grundlagen der Stammzellkultur und Anwendungen von Stammzellen in der Grundlagenforschung und der klinischen Forschung, wie z. B. in der Geweberegeneration, bei genetisch bedingten Erkrankungen und Krebs.

3D-Zellkultur

Anwendungen, Grundsätze und Verfahren für die dreidimensionale (3D) Zellkultur. Umfasst Verfahren und Beschreibungen von gerüstartigen und gerüstfreien Methoden, Matrizen für die Kultur komplexer In-vitro-Modelle einschließlich Organoiden und Sphäroiden.

Zellwachstum & -erhaltung

Eine Übersicht über die Bedingungen, Medien, Nährstoffe, Kulturgefäße und Umgebungen, die für eine erfolgreiche Vermehrung von Säugerzellen und Hefezellen erforderlich sind. Es werden Nährstoffreagenzien, Steriltechnik und Filtration sowie die Anforderungen an 2D-, 3D- und Suspensionskulturen beschrieben.

Fehlerbehebung in der Zellkultur

Expertentipps zur Behebung häufig auftretender Probleme in der Zellkultur. Hierzu gehören bakterielle und Schimmelpilzkontaminationen, Ablagerungen im Kulturmedium, Ablösung oder Verklumpung von Zellen, langsames Wachstum und geringe Viabilität.