The immunizing peptide is Product No. I2149. It is useful for displacement of HA-tagged fusion proteins from HA antibody in immunoassays. The successful inhibition of antibody binding by HA peptide demonstrates the binding of the antibody is specific.
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Über diesen Artikel
biological source
rabbit
Quality Segment
conjugate
unconjugated
antibody form
affinity isolated antibody
antibody product type
primary antibodies
clone
polyclonal
form
buffered aqueous solution
technique(s)
immunoprecipitation (IP): 2.5-4 μg/test using HA-tagged fusion protein from cell lysates, indirect immunofluorescence: 10-20 μg/mL using HA-tagged fusion protein transfected cells, western blot: 0.5-0.8 μg/mL using HA-tagged fusion protein transfected cell extracts
application(s)
research pathology
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target post-translational modification
unmodified
General description
Influenza-Hämagglutininprotein ist ein Nonapeptid, das sich aus der Hauptspikemembran des Glycoproteins des Humaninfluenzavirus ableitet. Dieses stammspezifische Glycoprotein ist ein Homotrimer des 84-kDa-Monomers. Jedes Monomer enthält zwei disulfidverknüpfte Untereinheiten: HA1 und HA2.
Anti-HA wird unter Anwendung eines an KLH konjugierten synthetischen Peptids entsprechend den Aminosäureresten des Humaninfluenzavirus Hämagglutinin (HA) in Kaninchen erzeugt. Der Antikörper ist auf dem immobilisierten immunisierenden Peptid affinitätsbereinigt.
Anti-HA-Antikörper ist spezifisch für N- oder C-terminale HA-markierte Fusionsproteine. Das Produkt kann kreuzreagierende Banden in bestimmten Säugerzellen entdecken. Das immunisierende HA-Peptid (Produktnr. I2149) hemmt spezifisch die Färbung des HA-markierten Proteinbands.
Immunogen
Application
Er ist auch für indirekte Immunfluoreszenz (10-20μg/ml unter Verwendung HA-markierter fusionsproteintransfizierter Zellen), Immunpräzipitation (2,5-4μg/Test unter Verwendung eines HA-markierten Fusionsproteins von Zelllysaten) und Western Blot (0,5-0,8μg/ml unter Verwendung HA-markierter fusionsproteintransfizierter Zellextrakte).
Biochem/physiol Actions
Das HA-Gen wird oft als eine Affinitätsmarkierung für Zielproteine in rekombinanten Expressionsvektorsystemen verwendet. Die von solchen Systemen produzierten HA-markierten Proteine liefern stabile Fusionsprodukte, die die Funktion und Verteilung der Zielproteine nicht beeinträchtigen. Anti-HA-Antikörper können kreuzreagierende Banden in bestimmten Säugerzellen entdecken. Das immunisierende HA-Peptid (Produktnr. I2149) hemmt spezifisch die Färbung des HA-markierten Proteinbands. Die das HA-Peptid codierende Nukleinsäuresequenz wird in verschiedene Expressionsplasmide eingebaut, die sich nahe an der Klonierungsstelle befinden, wodurch die Klonierung und Expression des HA-markierten Fusionsproteins ermöglicht wird. Solche Fusionsproteine können in Zellen verschiedener Organismen exprimiert werden: Bakterien, Hefen, Insekten und Säugetieren. Im Fusionsprotein kann die HA-Sequenz als Erkennungsziel für bestimmte Antikörper dienen, wodurch die Entdeckung, subzelluläre Lokalisation, Charakterisierung, Quantifizierung, Funktionsanalyse und Affinitätsaufreinigung vom HA-markierten Protein und zugehörigen gebundenen Proteinen ermöglicht wird. Die Einfügung des HA-Epitops in verschiedene Regionen des zellulären Proteins mit nachfolgender Untersuchung der Immunreaktivität des Epitops in intakten und in permeabilisierten Zellen ist bei der Untersuchung der zellulären Expressionswerte, Topologie und funktionellen Aktivität des markierten Protein von Nutzen. Durch eine antikörpervermittelte Entdeckung der HA-Markierung entfällt die Notwendigkeit einer zeitaufwendigen Erstellung von Antikörpern, die spezifisch auf neu identifizierte, selten auftretende, instabile, schwer aufzureinigende, kreuzreagierende oder schwach immunogene Proteine reagieren.
Physical form
Preparation Note
Zur Langzeitlagerung in Arbeitsaliquoten einfrieren. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen wird nicht empfohlen. Falls nach längerer Lagerung eine leichte Trübung eingetreten ist, die Lösung vor dem Gebrauch durch Zentrifugieren klären. Arbeitsverdünnungen sollten nach 12 Stunden entsorgt werden.
Disclaimer
1 of 1
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|---|---|---|---|
| Quality Level 200 | Quality Level 200 | Quality Level 200 | Quality Level 200 |
| biological source rabbit | biological source mouse | biological source mouse | biological source mouse |
| antibody form affinity isolated antibody | antibody form ascites fluid | antibody form purified from hybridoma cell culture | antibody form purified from hybridoma cell culture |
| conjugate unconjugated | conjugate unconjugated | conjugate TRITC conjugate | conjugate biotin conjugate |
| technique(s) immunoprecipitation (IP): 2.5-4 μg/test using HA-tagged fusion protein from cell lysates, western blot: 0.5-0.8 μg/mL using HA-tagged fusion protein transfected cell extracts, indirect immunofluorescence: 10-20 μg/mL using HA-tagged fusion protein transfected cells | technique(s) immunocytochemistry: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, indirect ELISA: suitable, western blot: 1:20,000 using extracts from 293T (human embryonic kidney) cells expressing a recombinant HA-fusion protein | technique(s) direct immunofluorescence: 10-15 mg/mL using mammalian cells expressing HA-tagged fusion proteins | technique(s) western blot (chemiluminescent): 0.25-0.50 μg/mL using HA tagged fusion proteins in transiently transfected mammalian cell extracts. |
| clone polyclonal | clone HA-7, monoclonal | clone HA-7, monoclonal | clone HA-7, monoclonal |
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Lagerklasse
12 - Non Combustible Liquids
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Is the immunizing peptide for Product H6908, Anti-HA antibody, available?
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What is the concentration of Product No. H6908, anti HA?
1 answer-
The antibody concentration for Product No. H6908 is reported as a lot-specific value on the certificates of analysis. Please refer to the Certificate of Analysis for the lot received for the specific antibody concentration. Values for recent lots have ranged from 0.5 - 0.7 mg/mL.
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What is the Department of Transportation shipping information for this product?
1 answer-
Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.
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What strain of influenza hemagglutinin does Product H6908, Anti-HA antibody, recognize?
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The sequence of the immunizing peptide is YPYDVPDYA. This sequence corresponds to amino acids 99-107 of human influenza virus X47 (classified as an H3N2 strain) referred to in Niman, H.L., et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 80, 4949-4953, 1983. However, according to the NCBI databases, the same epitope (YPYDVPDYA) corresponds to amino acids 98-106 in the vast majority of prevalent influenza viruses hence our claim in the data sheet of the antibodies. NCBI is National Center for Biotechnology Information.
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