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Unterstützung erhaltenbiological source
bovine pancreas
recombinant
expressed in Pichia pastoris
form
lyophilized
specific activity
(>10,000 U/bottle according to Kunitz (+25°C; DNA as substrate).)
mol wt
39 kDa
packaging
pkg of 2 × 10,000 U
manufacturer/tradename
Roche
concentration
≥70-90%
technique(s)
protein extraction: suitable
color
white to light yellow
solubility
water: soluble
suitability
suitable for molecular biology
NCBI accession no.
UniProt accession no.
application(s)
sample preparation
foreign activity
Proteases, none detected, RNase, none detected
storage temp.
2-8°C
Gene Information
bovine ... DNASE1(282217)
General description
Eigenschaften: Doppelstrangspezifische Endonuklease, die für maximale Aktivität bivalente Kationen erfordert.
Aktivität: 10.000 E/Flasche nach Kunitz (+25 °C; DNA als Substrat).
Definition der Einheit: Eine Einheit ist die Enzymaktivität, die unter Assaybedingungen einen Anstieg der Absorption von 0,001 je Minute bewirkt.
Aktivität: 10.000 E/Flasche nach Kunitz (+25 °C; DNA als Substrat).
Definition der Einheit: Eine Einheit ist die Enzymaktivität, die unter Assaybedingungen einen Anstieg der Absorption von 0,001 je Minute bewirkt.
Baut einzel- und doppelsträngige DNA ab; doppelsträngige Aktivität erfordert zweiwertige Kationen für maximale Aktivität.
Application
Features and Benefits
Inhalt
Lyophilisat
Lyophilisat
Preparation Note
Aktivator: Dieses Enzym erfordert zweiwertige Kationen für eine maximale Aktivität. Die Spezifität der Reaktion ist von der Art des verwendeten Kations abhängig. In Gegenwart von Mg2+ verursacht DNase I Einzelstrang-Nicks in dsDNA, während das Enzym in Gegenwart von Mn2+ Doppelstrangbrüche erzeugt.
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): Langzeitlagerung des gelösten Enzyms
Das allgemein für DNase I empfohlene Lösungsmittel ist Wasser. Wenn DNase I in Wasser rekonstituiert wird, kann die Lösung bei 2 bis 8 °C 2 Tage und bei -15 bis -20 °C 1 Monat aufbewahrt werden. Beste Ergebnisse werden erzielt, wenn geeignete Aliquote vorbereitet werden, um wiederholtes Einfrieren und Auftauen zu vermeiden. Lösen Sie die DNase I für die Langzeitlagerung vorsichtig in einem der nachstehend gelisteten Puffer. In Puffer 1 ist das Enzym mehrere Wochen lang stabil. Wird es in Puffer 2, 3 oder 4 gelöst und bei den empfohlenen Temperaturen gelagert, ist das Enzym mindestens 18 Monate lang stabil.
Informationshinweis: Das Enzym während des Lösens nicht vortexen!
Puffer 1: 20 mM Tris-HCl, 20 mM MgCl2, 5 mM CaCl2, 0,1 mM Dithioerythritol, 0,1 mM EDTA, 50 % (v/v) Glycerin, pH-Wert 8. Bewahren Sie diese Lösung bei -15 bis -25 °C auf; sie friert bei dieser Temperatur nicht ein und ist mehrere Wochen lang stabil.
Puffer 2: 20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM Dithioerythritol, 100 μg/ml BSA, 50 % Glycerin (v/v), pH-Wert 7,6. Bewahren Sie diese Lösung bei -15 bis -25 °C auf; sie friert bei dieser Temperatur nicht ein und ist bis zu 18 Monate lang stabil.
Puffer 3: 20 mM Tris-HCl, 1 mM MgCl2, 50 % (w/v) Glycerin, pH-Wert 7,5. Bewahren Sie diese Lösung bei -15 bis -25 °C auf; sie friert bei dieser Temperatur nicht ein und ist bis zu 18 Monate lang stabil.
Puffer 4: 20 mM Tris-HCl, 1 mM MgCl2, pH-Wert 7,5. In geeignete Mengen aliquotieren (z. B. 10 μl), die Aliquote schnell auf Trockeneis einfrieren und bei -60 °C oder kälter bis zu 18 Monate aufbewahren. Tauen Sie nur die für jedes Experiment erforderliche Menge auf. Nicht wieder einfrieren. Entsorgen Sie übrige aufgetaute Lösung.
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): Langzeitlagerung des gelösten Enzyms
Das allgemein für DNase I empfohlene Lösungsmittel ist Wasser. Wenn DNase I in Wasser rekonstituiert wird, kann die Lösung bei 2 bis 8 °C 2 Tage und bei -15 bis -20 °C 1 Monat aufbewahrt werden. Beste Ergebnisse werden erzielt, wenn geeignete Aliquote vorbereitet werden, um wiederholtes Einfrieren und Auftauen zu vermeiden. Lösen Sie die DNase I für die Langzeitlagerung vorsichtig in einem der nachstehend gelisteten Puffer. In Puffer 1 ist das Enzym mehrere Wochen lang stabil. Wird es in Puffer 2, 3 oder 4 gelöst und bei den empfohlenen Temperaturen gelagert, ist das Enzym mindestens 18 Monate lang stabil.
Informationshinweis: Das Enzym während des Lösens nicht vortexen!
Puffer 1: 20 mM Tris-HCl, 20 mM MgCl2, 5 mM CaCl2, 0,1 mM Dithioerythritol, 0,1 mM EDTA, 50 % (v/v) Glycerin, pH-Wert 8. Bewahren Sie diese Lösung bei -15 bis -25 °C auf; sie friert bei dieser Temperatur nicht ein und ist mehrere Wochen lang stabil.
Puffer 2: 20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM Dithioerythritol, 100 μg/ml BSA, 50 % Glycerin (v/v), pH-Wert 7,6. Bewahren Sie diese Lösung bei -15 bis -25 °C auf; sie friert bei dieser Temperatur nicht ein und ist bis zu 18 Monate lang stabil.
Puffer 3: 20 mM Tris-HCl, 1 mM MgCl2, 50 % (w/v) Glycerin, pH-Wert 7,5. Bewahren Sie diese Lösung bei -15 bis -25 °C auf; sie friert bei dieser Temperatur nicht ein und ist bis zu 18 Monate lang stabil.
Puffer 4: 20 mM Tris-HCl, 1 mM MgCl2, pH-Wert 7,5. In geeignete Mengen aliquotieren (z. B. 10 μl), die Aliquote schnell auf Trockeneis einfrieren und bei -60 °C oder kälter bis zu 18 Monate aufbewahren. Tauen Sie nur die für jedes Experiment erforderliche Menge auf. Nicht wieder einfrieren. Entsorgen Sie übrige aufgetaute Lösung.
Fest verschlossen. Trocken.
Other Notes
Eine Einheit nach Kunitz ist die Enzymaktivität, die unter Assaybedingungen einen Anstieg der Absorption bei 260 nm von 0,001/Minute in 1 ml bewirkt. Die Volumenaktivität wird in 0,1 M Natriumacetat, 5 mM MgSO4, pH-Wert 5,0 bestimmt.
Assaymischung: Kälberthymus-DNA (100 μg) wird mit 20 bis 50 E DNase I bei +25 °C inkubiert.
Der Anstieg der Absorption wird bei 260 nm gemessen.
Informationshinweis: Diese Bedingungen werden für die Bestimmung der Aktivität nach Kunitz verwendet, da der Kunitz-Assay zu einer hohen Reproduzierbarkeit und Sensitivität führt. Wenn dieses Enzym für normale experimentelle Zwecke verwendet wird, empfiehlt Roche Inkubationspuffer, die sich für die jeweilige Anwendung eignen, z. B. wie in der Standardliteratur erwähnt (Sambrook et al., Curr. Prot. Mol. Biol., etc.).
Assaymischung: Kälberthymus-DNA (100 μg) wird mit 20 bis 50 E DNase I bei +25 °C inkubiert.
Der Anstieg der Absorption wird bei 260 nm gemessen.
Informationshinweis: Diese Bedingungen werden für die Bestimmung der Aktivität nach Kunitz verwendet, da der Kunitz-Assay zu einer hohen Reproduzierbarkeit und Sensitivität führt. Wenn dieses Enzym für normale experimentelle Zwecke verwendet wird, empfiehlt Roche Inkubationspuffer, die sich für die jeweilige Anwendung eignen, z. B. wie in der Standardliteratur erwähnt (Sambrook et al., Curr. Prot. Mol. Biol., etc.).
Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht für den Einsatz in diagnostischen Verfahren geeignet.
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|---|---|---|---|
| form lyophilized | form lyophilized | form lyophilized | form liquid |
| biological source bovine pancreas | biological source bovine pancreas | biological source bovine pancreas | biological source - |
| manufacturer/tradename Roche | manufacturer/tradename Roche | manufacturer/tradename Calbiochem® | manufacturer/tradename - |
| solubility water: soluble | solubility - | solubility sodium acetate buffer: soluble, water: soluble | solubility - |
| storage temp. 2-8°C | storage temp. 2-8°C | storage temp. −20°C | storage temp. −20°C |
| packaging pkg of 2 × 10,000 U | packaging pkg of 100 mg | packaging - | packaging - |
signalword
Danger
Hazard Classifications
Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1
Lagerklasse
11 - Combustible Solids
wgk
WGK 1
flash_point_f
does not flash
flash_point_c
does not flash
hcodes
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