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04536282001
Roche
DNase I, rekombinant
grade I, from bovine pancreas, expressed in Pichia pastoris
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Empfohlene Produkte
Biologische Quelle
bovine pancreas
Qualitätsniveau
Rekombinant
expressed in Pichia pastoris
Form
lyophilized
Spezifische Aktivität
(>10,000 U/bottle according to Kunitz (+25°C; DNA as substrate).)
Mol-Gew.
39 kDa
Verpackung
pkg of 2 × 10,000 U
Hersteller/Markenname
Roche
Konzentration
≥70-90%
Methode(n)
protein extraction: suitable
Farbe
white to light yellow
Löslichkeit
water: soluble
Eignung
suitable for molecular biology
NCBI-Hinterlegungsnummer
UniProt-Hinterlegungsnummer
Anwendung(en)
sample preparation
Fremdaktivität
Proteases, none detected
RNase, none detected
Lagertemp.
2-8°C
Angaben zum Gen
bovine ... DNASE1(282217)
Allgemeine Beschreibung
Eigenschaften: Doppelstrangspezifische Endonuklease, die für maximale Aktivität bivalente Kationen erfordert.
Aktivität: 10.000 E/Flasche nach Kunitz (+25 °C; DNA als Substrat).
Definition der Einheit: Eine Einheit ist die Enzymaktivität, die unter Assaybedingungen einen Anstieg der Absorption von 0,001 je Minute bewirkt.
Aktivität: 10.000 E/Flasche nach Kunitz (+25 °C; DNA als Substrat).
Definition der Einheit: Eine Einheit ist die Enzymaktivität, die unter Assaybedingungen einen Anstieg der Absorption von 0,001 je Minute bewirkt.
Baut einzel- und doppelsträngige DNA ab; doppelsträngige Aktivität erfordert zweiwertige Kationen für maximale Aktivität.
Anwendung
Leistungsmerkmale und Vorteile
Inhalt
Lyophilisat
Lyophilisat
Einheitendefinition
Eine Einheit nach Kunitz ist die Enzymaktivität, die unter Assaybedingungen einen Anstieg der Absorption bei 260 nm von 0,001/Minute in 1 ml bewirkt. Die Volumenaktivität wird in 0,1 M Natriumacetat, 5 mM MgSO4, pH-Wert 5,0 bestimmt.
Assaymischung: Kälberthymus-DNA (100 μg) wird mit 20 bis 50 E DNase I bei +25 °C inkubiert.
Der Anstieg der Absorption wird bei 260 nm gemessen.
Informationshinweis: Diese Bedingungen werden für die Bestimmung der Aktivität nach Kunitz verwendet, da der Kunitz-Assay zu einer hohen Reproduzierbarkeit und Sensitivität führt. Wenn dieses Enzym für normale experimentelle Zwecke verwendet wird, empfiehlt Roche Inkubationspuffer, die sich für die jeweilige Anwendung eignen, z. B. wie in der Standardliteratur erwähnt (Sambrook et al., Curr. Prot. Mol. Biol., etc.).
Assaymischung: Kälberthymus-DNA (100 μg) wird mit 20 bis 50 E DNase I bei +25 °C inkubiert.
Der Anstieg der Absorption wird bei 260 nm gemessen.
Informationshinweis: Diese Bedingungen werden für die Bestimmung der Aktivität nach Kunitz verwendet, da der Kunitz-Assay zu einer hohen Reproduzierbarkeit und Sensitivität führt. Wenn dieses Enzym für normale experimentelle Zwecke verwendet wird, empfiehlt Roche Inkubationspuffer, die sich für die jeweilige Anwendung eignen, z. B. wie in der Standardliteratur erwähnt (Sambrook et al., Curr. Prot. Mol. Biol., etc.).
Angaben zur Herstellung
Aktivator: Dieses Enzym erfordert zweiwertige Kationen für eine maximale Aktivität. Die Spezifität der Reaktion ist von der Art des verwendeten Kations abhängig. In Gegenwart von Mg2+ verursacht DNase I Einzelstrang-Nicks in dsDNA, während das Enzym in Gegenwart von Mn2+ Doppelstrangbrüche erzeugt.
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): Langzeitlagerung des gelösten Enzyms
Das allgemein für DNase I empfohlene Lösungsmittel ist Wasser. Wenn DNase I in Wasser rekonstituiert wird, kann die Lösung bei 2 bis 8 °C 2 Tage und bei -15 bis -20 °C 1 Monat aufbewahrt werden. Beste Ergebnisse werden erzielt, wenn geeignete Aliquote vorbereitet werden, um wiederholtes Einfrieren und Auftauen zu vermeiden. Lösen Sie die DNase I für die Langzeitlagerung vorsichtig in einem der nachstehend gelisteten Puffer. In Puffer 1 ist das Enzym mehrere Wochen lang stabil. Wird es in Puffer 2, 3 oder 4 gelöst und bei den empfohlenen Temperaturen gelagert, ist das Enzym mindestens 18 Monate lang stabil.
Informationshinweis: Das Enzym während des Lösens nicht vortexen!
Puffer 1: 20 mM Tris-HCl, 20 mM MgCl2, 5 mM CaCl2, 0,1 mM Dithioerythritol, 0,1 mM EDTA, 50 % (v/v) Glycerin, pH-Wert 8. Bewahren Sie diese Lösung bei -15 bis -25 °C auf; sie friert bei dieser Temperatur nicht ein und ist mehrere Wochen lang stabil.
Puffer 2: 20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM Dithioerythritol, 100 μg/ml BSA, 50 % Glycerin (v/v), pH-Wert 7,6. Bewahren Sie diese Lösung bei -15 bis -25 °C auf; sie friert bei dieser Temperatur nicht ein und ist bis zu 18 Monate lang stabil.
Puffer 3: 20 mM Tris-HCl, 1 mM MgCl2, 50 % (w/v) Glycerin, pH-Wert 7,5. Bewahren Sie diese Lösung bei -15 bis -25 °C auf; sie friert bei dieser Temperatur nicht ein und ist bis zu 18 Monate lang stabil.
Puffer 4: 20 mM Tris-HCl, 1 mM MgCl2, pH-Wert 7,5. In geeignete Mengen aliquotieren (z. B. 10 μl), die Aliquote schnell auf Trockeneis einfrieren und bei -60 °C oder kälter bis zu 18 Monate aufbewahren. Tauen Sie nur die für jedes Experiment erforderliche Menge auf. Nicht wieder einfrieren. Entsorgen Sie übrige aufgetaute Lösung.
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): Langzeitlagerung des gelösten Enzyms
Das allgemein für DNase I empfohlene Lösungsmittel ist Wasser. Wenn DNase I in Wasser rekonstituiert wird, kann die Lösung bei 2 bis 8 °C 2 Tage und bei -15 bis -20 °C 1 Monat aufbewahrt werden. Beste Ergebnisse werden erzielt, wenn geeignete Aliquote vorbereitet werden, um wiederholtes Einfrieren und Auftauen zu vermeiden. Lösen Sie die DNase I für die Langzeitlagerung vorsichtig in einem der nachstehend gelisteten Puffer. In Puffer 1 ist das Enzym mehrere Wochen lang stabil. Wird es in Puffer 2, 3 oder 4 gelöst und bei den empfohlenen Temperaturen gelagert, ist das Enzym mindestens 18 Monate lang stabil.
Informationshinweis: Das Enzym während des Lösens nicht vortexen!
Puffer 1: 20 mM Tris-HCl, 20 mM MgCl2, 5 mM CaCl2, 0,1 mM Dithioerythritol, 0,1 mM EDTA, 50 % (v/v) Glycerin, pH-Wert 8. Bewahren Sie diese Lösung bei -15 bis -25 °C auf; sie friert bei dieser Temperatur nicht ein und ist mehrere Wochen lang stabil.
Puffer 2: 20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM Dithioerythritol, 100 μg/ml BSA, 50 % Glycerin (v/v), pH-Wert 7,6. Bewahren Sie diese Lösung bei -15 bis -25 °C auf; sie friert bei dieser Temperatur nicht ein und ist bis zu 18 Monate lang stabil.
Puffer 3: 20 mM Tris-HCl, 1 mM MgCl2, 50 % (w/v) Glycerin, pH-Wert 7,5. Bewahren Sie diese Lösung bei -15 bis -25 °C auf; sie friert bei dieser Temperatur nicht ein und ist bis zu 18 Monate lang stabil.
Puffer 4: 20 mM Tris-HCl, 1 mM MgCl2, pH-Wert 7,5. In geeignete Mengen aliquotieren (z. B. 10 μl), die Aliquote schnell auf Trockeneis einfrieren und bei -60 °C oder kälter bis zu 18 Monate aufbewahren. Tauen Sie nur die für jedes Experiment erforderliche Menge auf. Nicht wieder einfrieren. Entsorgen Sie übrige aufgetaute Lösung.
Lagerung und Haltbarkeit
Fest verschlossen. Trocken.
Sonstige Hinweise
Nur für die Life-Science-Forschung. Nicht für den Einsatz in diagnostischen Verfahren geeignet.
Signalwort
Danger
H-Sätze
Gefahreneinstufungen
Resp. Sens. 1 - Skin Sens. 1
Lagerklassenschlüssel
11 - Combustible Solids
WGK
WGK 1
Flammpunkt (°F)
does not flash
Flammpunkt (°C)
does not flash
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