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Merck

17-10254

Sigma-Aldrich

ChIPAb+ Histon H3 (CT) - durch ChIP validiertes Antikörper- und Primer-Set

serum, from rabbit

Synonym(e):

Histone H3.1t, H3t, histone 3, H3/g

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise


About This Item

UNSPSC-Code:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.32

Biologische Quelle

rabbit

Qualitätsniveau

Antikörperform

serum

Klon

polyclonal

Speziesreaktivität

rat, chicken, mouse, human, Saccharomyces cerevisiae, yeast

Hersteller/Markenname

ChIPAb+
Upstate®

Methode(n)

ChIP: suitable
dot blot: suitable
immunocytochemistry: suitable
inhibition assay: suitable (peptide)
western blot: suitable

NCBI-Hinterlegungsnummer

UniProt-Hinterlegungsnummer

Versandbedingung

dry ice

Allgemeine Beschreibung

Alle ChIPAb+-Antikörper werden einzeln (jede Charge, jedes Mal) für die Chromatin-Immunpräzipitation validiert. Jedes ChIPAb+-Antikörper-Set enthält Kontrollprimer (jede Charge wurde durch qPCR geprüft), um Ihre IP-Ergebnisse im stellenspezifischen Kontext biologisch zu validieren. Das qPCR-Protokoll und die Primer-Sequenzen werden bereitgestellt, was es Forschenden ermöglicht, ChIP-Protokolle zu validieren, wenn sie unseren Antikörper in Ihrem Chromatin-Kontext nutzen. Jedes Set enthält außerdem einen Negativkontrolle-Antikörper, um die Spezifizität der ChIP-Reaktion zu gewährleisten.
Das ChIPAb+-Histon H3 (C-Terminus)-Set enthält den Histon-H3(C-Terminus)-Antikörper, ein normales Kaninchenserum und Kontrollprimer, die eine 110-bp-Region des ChIP-Primers, humanes β-Globin amplifizieren. Histon H3 (C-Terminus) und die Negativkontrollen werden in skalierbarer „je ChIP“-Reaktionsgröße geliefert und können verwendet werden, um die Ausfällung von Histon-H3(C-Terminus)-assoziiertem Chromatin funktionell zu validieren.

Spezifität

Aufgrund der Sequenzhomologie ist eine weitreichende artenübergreifende Kreuzreaktivität zu erwarten.
Erkennt die C-terminale Region von Histon H3, Molekülmasse 17 kDa

Immunogen

KLH-konjugiertes synthetisches Peptid, das dem C-Terminus von humanem Histon H3 entspricht.

Anwendung

Chromatin-Immunpräzipitation:
Daten einer repräsentativen Charge.
Beschalltes Chromatin aus HeLa-Zellen (1 x 10E6 Zelläquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 1 µl normalem Kaninchenserum oder 1 µl Anti-Histon H3 (C-Terminus) und dem Magna ChIP A Kit (Katalognr. 17-610) unterzogen. Die erfolgreiche Immunpräzipitation von mit Histon H3 assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Primern, humanem β-Globin als positive Stelle und GAPDH-Promotor-Primern (22-004) als negative Stelle verifiziert. (Abbildung 2) Die Daten werden als prozentuale Eingabe jeder IP-Probe relativ zur Chromatin-Eingabe für jedes Amplikon und jede ChIP-Probe wie angegeben dargestellt.
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna ChIP A (Katalognr. 17-408) oder EZ-ChIP (Katalognr. 17-371).
Western-Blot-Analyse:
Daten einer repräsentativen Charge.
Säureextrahierte Proteine aus unbehandelten (Bahn 1) oder mit Natriumbutyrat (Bahn 2) oder Colcemid (Bahn 3) behandelten HeLa-Zellen und rekombinantes Histon H3 (Bahn 4) wurden durch Elektrophorese getrennt, auf Nitrocellulose übertragen und mit Anti-Histon H3, CT, pan (1:50.000-Verdünnung) untersucht. Die Proteine wurden mit an HRP konjugiertem Anti-Kaninchen-Sekundärantikörper der Ziege und einem Chemilumineszenz-Nachweissystem veranschaulicht.
Der Pfeil zeigt Histon H3 (~17 kDa). (Abbildung 3)
Dieses Set aus ChIP-validiertem ChIPAb+-Histon-H3(C-Terminus)-Antikörper und Primer enthält praktischerweise den Antikörper und die spezifischen Kontroll-PCR-Primer.

Verpackung

25 Assays je Set. Empfohlene Verwendung: 1 μl Antikörper je Chromatin-Immunpräzipitation (abhängig vom biologischen Kontext).

Qualität

Chromatin-Immunpräzipitation:
Daten einer repräsentativen Charge.
Beschalltes Chromatin aus HeLa-Zellen (1 x 10E6 Zelläquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 1 µl normalem Kaninchenserum oder 1 µl Anti-Histon H3 und dem Magna ChIP® A Kit (Katalognr. 17-610) unterzogen. Die erfolgreiche Immunpräzipitation von Histon H3-assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Primern, humanes β-Globin verifiziert (Abbildung 1).
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna ChIP A (Katalognr. 17-408) oder EZ ChIP (Katalognr. 17-371).

Zielbeschreibung

Etwa 17 kDa

Physikalische Form

Anti-Histon H3 (C-Terminus) (Kaninchen, polyklonal). Ein Fläschchen mit 25 µl Kaninchen-Antiserum, 1:2-Verdünnung in Lagerpuffer (0,02 mol/l Phosphat, 0,25 mol/l NaCl, 0,1 % Natriumazid) vor der Zugabe von Glycerin zu 30 %. Bei -20 °C aufbewahren.
Normales Kaninchenserum. Ein Fläschchen mit 25 μl Antiserum mit 0,05 % Natriumazid. Bei -20 °C aufbewahren.
ChIP-Primer, humanes β-Globin. Ein Fläschchen mit 75 μl von 5 μmol/l jedes Primers, spezifisch für den humanen β-Globin-Promotor. Bei -20 °C aufbewahren.
FÜR: AGG ACA GGT ACG GCT GTC ATC
REV: TTT ATG CCC AGC CCT GGC TC

Hinweis zur Analyse

Kontrolle
Einschließlich normales Kaninchenserum und für humanes β-Globin spezifische Primer.

Rechtliche Hinweise

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Lagerklassenschlüssel

10 - Combustible liquids


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