Description générale
L'agrine (UniProt : O00468) est codée par le gène AGRN (aussi dénommé AGRIN) (identifiant du gène : 375790) chez l'homme. Sept isoformes différentes, produites par épissage alternatif, ont été décrites pour l'agrine. Cet anticorps (clone 1H10.1) est dirigé contre l'isoforme 1, une agrine sécrétée. Cette isoforme est une glycoprotéine de la lamina basalis à base de sulfate d'héparane. Elle joue un rôle central dans la formation et le maintien de la jonction neuromusculaire (JNM), et dirige les principaux événements de la différenciation post-synaptique. Elle entre dans la composition du complexe AGRN-récepteur LRP4, qui induit la phosphorylation et l'activation de MUSK. L'activation de MUSK dans les myotubes entraîne la formation de JNM via la régulation de différents processus, notamment la transcription de gènes particuliers et l'agrégation des récepteurs de l'acétylcholine (AChR) dans la membrane post-synaptique. Il a été montré que les ions calcium sont essentiels pour une agrégation maximale des AChR. Dans le système nerveux central, elle inhibe le sous-type alpha(3) de la pompe Na+/K+-ATPase et entraîne la dépolarisation des synapses du SNC. Cette isoforme de l'agrine produit un pont, après libération par les motoneurones, avec la lamina basalis en se liant à la laminine via le domaine N-terminal (NtA). Dans les jonctions synaptiques, l'agrine est clivée au niveau de deux sites conservés, alpha et bêta, par la neurotrypsine. Un clivage au niveau du site alpha produit la sous-unité N-terminale de 110 kDa de l'agrine et la sous-unité C-terminale de 110 kDa de l'agrine. Un autre clivage de la sous-unité C-terminale de 110 kDa de l'agrine au niveau du site bêta produit les fragments C-terminaux : le fragment C-terminal de 90 kDa de l'agrine et le fragment C-terminal de 22 kDa de l'agrine. La sous-unité N-terminale (de 110 kDa) est impliquée dans la régulation de la croissance des neurites, probablement en raison de la présence des chaînes latérales de GAG (glycosaminoglycane) du sulfate de chondroïtine et d'héparane, fixées aux régions riches en Ser/Thr et en Gly/Ser. Le fragment C-terminal (de 22 kDa) est important pour la signalisation de l'agrine et pour assurer un effet inducteur de filopodes dendritiques maximal. Un clivage excessif au niveau du site bêta libère de grandes quantités du fragment de 22 kDa, menant à la déstabilisation de la jonction neuromusculaire.
Spécificité
Le clone 1H10.1 permet de détecter l'agrine dans les cellules humaines, de souris et de rat. Il cible un épitope de 99 acides aminés de l'extrémité C-terminale.
Immunogène
Fragment recombinant avec étiquette GST/His correspondant à 99 acides aminés de la région C-terminale de l'isoforme 1 de l'agrine humaine.
Application
Analyse par western blotting : Une concentration de 1 µg/ml d'un lot représentatif a permis de détecter l'agrine dans 10 µg de lysat de tissu cérébral de souris.
Domaine de recherche
Neurosciences
L'anticorps anti-agrine, clone 1H10.1 (référence MABN1205), est un anticorps monoclonal de souris hautement spécifique qui cible l'agrine, et dont l'utilisation a été testée en western blotting.
Qualité
Produit évalué par western blotting sur du lysat de tissu cérébral de rat.
Analyse par western blotting : Une concentration de 1 µg/ml de cet anticorps a permis de détecter l'agrine dans 10 µg de lysat de tissu cérébral de rat.
Description de la cible
~220 kDa (poids observé) ; 217,23 kDa (poids déterminé par calcul). Des bandes non caractérisées peuvent apparaître avec certains lysats.
Forme physique
Anticorps IgG2b monoclonal de souris purifié dans un tampon contenant de la Tris-glycine 0,1 M (à pH 7,4), du NaCl 150 mM et 0,05 % d'azoture de sodium.
Format : Produit purifié
Purification sur protéine G.
Stockage et stabilité
Stable pendant 1 an entre 2 et 8 °C à partir de la date de réception.
Autres remarques
Concentration : Voir la fiche technique correspondant spécifiquement au lot utilisé.
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