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Sigma-Aldrich

Mélange maître KOD HotStart

ready-to-use solution, Ready-to-use 2X mixture, containing KOD Hot Start DNA Polymerase, two monoclonal antibodies, ultrapure deoxynucleotides, and reaction buffer with MgSO4, optimized for convenient high fidelity PCR., suitable for PCR

Synonyme(s) :

High fidelity master mix, Hot start PCR, Hot start master mix

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About This Item

Code UNSPSC :
41105500
Nomenclature NACRES :
NA.55

Niveau de qualité

100

Forme

ready-to-use solution

Utilisation

sufficient for 100 reactions
 sufficient for 500 reactions

Caractéristiques

Difficult Templates/Specialty Enzymes PCR
High Fidelity PCR
dNTPs included
hotstart

Fabricant/nom de marque

Novagen®

Conditions de stockage

OK to freeze

Technique(s)

PCR: suitable (2X PCR Master Mix for high fidelity)
PCR: suitable

Entrée

purified DNA

Conditions d'expédition

dry ice

Température de stockage

−20°C

Description générale

Le mélange maître à démarrage à chaud KOD HotStart est un mélange prêt à l'emploi concentré 2 × optimisé pour simplifier la réalisation des PCR haute fidélité. Il utilise une ADN polymérase à faible taux d'erreurs et permet d'obtenir une très grande précision lors de la réplication de l'ADN d'intérêt. Il contient l'ADN polymérase à démarrage à chaud KOD HotStart, deux anticorps monoclonaux, des dNTP ultra purs et un tampon de réaction au MgSO4. Ce mélange convient parfaitement aux applications de PCR à haut débit.
Le mélange maître à démarrage à chaud KOD HotStart est un mélange prêt à l'emploi concentré 2 × optimisé pour simplifier la réalisation des PCR haute fidélité. Il utilise une ADN polymérase à faible taux d'erreurs et permet d'obtenir une très grande précision lors de la réplication de l'ADN d'intérêt. Le mélange contient l'ADN polymérase à démarrage à chaud KOD HotStart, deux anticorps monoclonaux, des désoxynucléotides ultrapurs et un tampon de réaction au MgSO4. Les anticorps monoclonaux inhibent les activités ADN polymérase et 3′→5′ exonucléase à température ambiante.

Application

Le mélange maître KOD HotStart a été utilisé dans les situations suivantes :
  • obtention d'un produit de PCR pour le dosage de la T7 endonucléase I (T7EI)
  • amplification de l'ADN isolé du champignon à activité antimicrobienne Chrysosporium multifidum
  • amplification par PCR d'ADNc
  • PCR en deux étapes pour l'amplification de la séquence cible suivie de son insertion dans un vecteur

Caractéristiques et avantages

  • Optimisation de la précision, du rendement et de la processivité des ADN polymérases à activité correctrice disponibles dans le commerce
  • Amplification de matrices d'ADN génomique mesurant jusqu'à 12 kpb
  • Amplification de plasmides et de matrices d'ADN lambda mesurant jusqu'à 21 kpb
  • Plus d'erreurs d'amorçage ni de formation de dimères d'amorces
  • Facilité de mise en place à température ambiante, compatible avec l'automatisation
  • Tampon KOD HotStart® garantissant des performances de PCR optimales sur diverses cibles
  • Spécificité, fidélité et rendement élevés lors des PCR
  • Facilité d'utilisation optimisée et reproductibilité des données
  • Mise en place simplifiée et gain de temps
  • Grande homogénéité et très faible risque contamination

* Produit fabriqué par Toyobo et distribué par Merck KGaA Darmstadt (Allemagne) et ses filiales (sauf au Japon).

Remarque : L'achat de ce produit inclut une immunité contre les poursuites dans le cadre des brevets mentionnés dans la notice du produit, pour l'utilisation de la seule quantité achetée pour les propres recherches de l'acheteur. Aucun autre droit de brevet (tel que les droits de brevet concernant la nucléase 5′) n'est transféré expressément, implicitement ou par préclusion. Pour de plus amples informations sur l'achat de licences, contacter le directeur des licences : Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, États-Unis.

Composants

  • 2 × 1,25 ml ou 10 × 1,25 ml de mélange maître KOD HotStart

Références :
Kitabayashi, M., et al. 2002. Biosci. Biotechnol. Biochem.66 (10), 2194. Fujii, S., et al. 1999. J. Mol.

Avertissement

Toxicité : manipulation standard (A)

Définition de l'unité

Une unité est définie comme la quantité d'enzyme qui catalyse l'incorporation de 10 nmol de dNTP sous une forme non soluble aux acides en 30 min à 75 °C, dans une réaction contenant du Tris-HCl 20 mM (pH 7,5 à 25 °C), du MgCl₂ 8 mM, du DTT 7,5 mM, 50 µg/ml de BSA, du dATP, du dCTP, du dGTP et du dTTP (mélange de dTTP non marqué et de [3H]dTTP), 150 µM chacun, et 150 µg/ml d'ADN de thymus de veau activé.

Autres remarques

Il vous suffit d'ajouter le mélange maître KOD HotStart® à un même volume de l'échantillon contenant la matrice d'ADN et les amorces. Le mélange réactionnel dilué final contient 1 U d'ADN polymérase KOD HotStart® par volume réactionnel de 50 μl. Le plus petit conditionnement disponible contient suffisamment de mélange maître pour réaliser 100 réactions de 50 µl ou 250 réactions de 20 µl, tandis que le plus grand conditionnement permet de réaliser 500 réactions de 50 µl ou 1 250 réactions de 20 µl.

Informations légales

* Produit fabriqué par Toyobo et distribué par Merck KGaA Darmstadt (Allemagne) et ses filiales (sauf au Japon). Remarque : L'achat de ce produit inclut une immunité contre les poursuites dans le cadre des brevets mentionnés dans la notice du produit, pour l'utilisation de la seule quantité achetée pour les propres recherches de l'acheteur. Aucun autre droit de brevet (tel que les droits de brevet concernant la nucléase 5′) n'est transféré expressément, implicitement ou par préclusion. Pour de plus amples informations sur l'achat de licences, contacter le directeur des licences : Director of Licensing, Applied Biosystems, 850 Lincoln Centre Drive, Foster City, California 94404, États-Unis.
HOTSTART is a registered trademark of Molecular BioProducts, Inc.
NOVAGEN is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 1

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable

Certificats d'analyse (COA)

Recherchez un Certificats d'analyse (COA) en saisissant le numéro de lot du produit. Les numéros de lot figurent sur l'étiquette du produit après les mots "Lot" ou "Batch".

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