07-596

Anticorps anti-histone H4 (citrulline 3)

Upstate^®, from rabbit

• Synonyme(s) : Cit-H4R3, H4Cit3, Histone H4, Arg3 citrullinated
• Code UNSPSC : 12352203
• eCl@ss : 32160702
• Nomenclature NACRES : NA.41

Propriétés

• Source biologique: rabbit
• Niveau de qualité: 100
• Forme d'anticorps: affinity purified immunoglobulin
• Type de produit anticorps: primary antibodies
• Clone: polyclonal
• Produit purifié par: affinity chromatography
• Espèces réactives: mouse, human
• Fabricant/nom de marque: Upstate^®
• Technique(s): ChIP: suitable; immunocytochemistry: suitable; immunohistochemistry: suitable (paraffin); western blot: suitable
• Numéro d'accès NCBI: NP_003529
• Numéro d'accès UniProt: P62805
• Conditions d'expédition: wet ice
• Modification post-traductionnelle de la cible: citrullination (Arg 3)
• Informations sur le gène: human ... HIST2H4B(554313)

Description

Description générale

L'histone H4 (UniProt : P62805 ; également connue sous les noms de membre A de la famille des histones H4 et de histone 1 H4a) est codée par le gène HIST1H4A (également appelé H4/A ou H4FA ; ID du gène : 8359) chez l'homme. L'histone H4 est l'une des principales protéines de type histones impliquées dans la structure de la chromatine dans les cellules eucaryotes et procaryotes. L'histone H4 peut subir plusieurs types de modifications épigénétiques qui influencent les processus cellulaires, y compris la méthylation et l'acétylation sur les résidus de lysine et d'arginine, la phosphorylation sur les résidus de sérine et de thréonine, ainsi que la conversion du résidu Arg3 en un résidu citrulline par la réaction de désimination catalysée par la peptidylarginine désiminase PAD4, également connue sous le nom de citrullination. La citrullination du résidu Arg3 de l'histone H4 (H4Cit3) affaiblit l'interaction histone-ADN à la suite d'un changement conformationnel et d'une charge positive réduite à l'extrémité N-terminale de l'histone H4. L'infection bactérienne est connue pour stimuler H4Cit3 dans les neutrophiles, formant une structure de chromatine extracellulaire hautement décondensée appelée ''NET'' (piège extracellulaire neutrophile) qui pourrait capturer et tuer les micro-organismes. D'autre part, les protéines citrullinées sont reconnues comme des protéines du non-soi et activent par la suite le système immunitaire. Il a été montré qu'un haplotype fonctionnel du gène PADI4 est impliqué dans la pathogenèse de la polyarthrite rhumatoïde par le biais de l'induction de l'antigénicité des protéines. Le processus H4Cit3 est induit par la voie p53-PADI4 en réponse aux dommages à l'ADN, ce qui entraîne une immunoréactivité augmentée de H4Cit3 autour des noyaux fragmentés dans les cellules apoptotiques. De plus, le taux de H4Cit3 est négativement corrélé avec l'expression de la protéine p53 et la taille de la tumeur dans les tissus de cancer du poumon non à petites cellules (CPNPC), ce qui indique un rôle crucial de H4Cit3 dans la cancérogenèse.

Spécificité

Cet anticorps polyclonal de lapin a détecté la citrullination du résidu Arg3 catalysée par PAD4 sur les histones H4 et H2A recombinantes, ainsi que la citrullination d'H4 sur Arg3 induite par l'ionophore calcique (H4Cit3) dans les cellules HL-60. L'inactivation de la PAD4 (peptidyl arginine désiminase 4) cellulaire a considérablement diminué le processus H4Cit3 induit par ionophore, tandis que le blocage des anticorps avec le peptide immunogène a empêché la détection de la bande cible (Tanikawa, C., et al. (2012). Nat. Commun. 3:676 ; Wang, Y., et al. (2004). Science. 306(5694):279-283).

Il devrait réagir avec un large éventail d'espèces du fait de l'homologie de séquences à 100 %.

Immunogène

Peptide de synthèse conjugué à la KLH et correspondant aux acides aminés 1 à 10 (SG[cit]GKGGKGL-C) de l'histone H4 humaine exempte de Met1 et où [cit] indique le résidu Arg3 citrulliné. Une cystéine C-terminale a été ajoutée à des fins de conjugaison.

Épitope : extrémité N-terminale

Application

Domaine de recherche
Épigénétique et fonction nucléaire

L'anticorps anti-histone H4 (Citrulline 3), réf. 07-596, est un anticorps polyclonal de lapin hautement spécifique qui cible la citrullination de l'histone H4 (H4Cit3) et qui a été testé dans les techniques d'immunoprécipitation de la chromatine (ChIP), d'immunocytochimie, d'immunohistochimie et de western blotting.

Sous-domaine de recherche
Histones

Qualité

Produit évalué par western blotting sur un lysat de cellules HL-60

Analyse par western blotting : Une dilution au 1/1 000e de cet anticorps a permis de détecter la citrullination de l'Arg3 de l'histone H4 induite par différenciation (H4Cit3) dans 10 µg de lysat de cellules HL-60 traitées à l'ionophore calcique.

Description de la cible

Poids réel : ~12 kDa. Poids calculé : 11,37 kDa ou 11,24 kDa (H4 avec ou sans résidu Met1, respectivement) Des bandes non caractérisées peuvent être observées avec certains lysats.

Forme physique

Anticorps polyclonal de lapin purifié, dans un tampon contenant de la Tris-glycine 0,1 M (pH 7,4), du NaCl 150 mM et 0,05 % d'azoture de sodium.

Produit purifié par affinité.

Stockage et stabilité

Stable entre 2 et 8 °C pendant 1 an à compter de la date de réception.

Autres remarques

Concentration : voir la fiche technique du lot concerné.

Informations légales

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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Informations sur la sécurité

• Code de la classe de stockage: 10 - Combustible liquids
• Classe de danger pour l'eau (WGK): WGK 1