Meio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM)
O Meio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) é um dos meios mais amplamente adequados para muitos fenótipos de células aderentes entre os meios definidos para cultura de tecidos e células. Isso inclui células de mamíferos, células de insetos e células vegetais. O Meio de Eagle original foi desenvolvido na década de 1950 e foi formulado para o cultivo de células de galinha. No entanto, a modificação por Dulbecco é uma formulação suplementar aprimorada que aumenta o conteúdo de aminoácidos e vitaminas selecionados em até quatro vezes quando comparado ao meio Eagle original.
Na cultura de células, o DMEM é utilizado como um meio para suportar o crescimento de diferentes tipos de células, incluindo células primárias, células-tronco e células transformadas. A versão modificada do DMEM também pode ser usada para várias aplicações de pesquisa, como descoberta de medicamentos, engenharia de tecidos e estudo de vias de sinalização celular.
O DMEM não é um meio completo por si só, pois carece de nutrientes necessários, como proteínas, lipídios ou fatores de crescimento. Portanto, deve ser complementado com outros componentes, como soro fetal bovino (FBS), aminoácidos e outros nutrientes para fornecer um ambiente de crescimento completo e equilibrado para as células em cultura.
Nossa seleção inclui uma gama de concentrações de glicose, assim como de formulações com ou sem L-glutamina. Os produtos sem o indicador de pH vermelho de fenol estão disponíveis para aplicações sensíveis a estrogênio, e nossa oferta abrangente inclui formatos líquidos convenientes e prontos para uso, bem como meios em pó econômicos para um armazenamento mais fácil e vida útil mais longa.
DMEM – Glicose alta vs. Glicose baixa
O DMEM está disponível em várias formulações, dependendo das necessidades específicas das células que estão sendo cultivadas e dos objetivos do trabalho experimental. O meio inicial foi formulado com um baixo nível de glicose de 1 g/l, adequado para o cultivo de células que são sensíveis à alta glicose e podem não prosperar em meios com altos níveis desse açúcar. No entanto, o DMEM com alto teor de glicose contém 4,5 g/l de glicose e é normalmente utilizado para o cultivo de células que requerem altos níveis de glicose para crescimento ideal.
Meio sem soro (SFM)
O soro é um componente de muitos meios de cultura celular e é frequentemente utilizado para suplementar o meio com hormônios, fatores de crescimento e outros nutrientes necessários para o crescimento e proliferação celular. No entanto, o soro pode conter impurezas e contaminantes que podem interferir nos resultados experimentais e seu uso pode levantar questões éticas.
Os meios isentos de soro são formulados sem soro animal ou outros componentes derivados de animais. Esses meios consistem em formulações nutricionais e hormonais adequadas que suportam o crescimento e a proliferação de células em cultura.
Alguns benefícios do uso de meios sem soro para cultura celular são a maior produtividade, maior consistência e purificação mais fácil e processamento a jusante (downstream). Meios livres de soro também podem ser formulados com combinações específicas de fatores de crescimento para certos tipos de células e objetivos de pesquisa. Esses meios são adequados para uma ampla gama de aplicações de cultura celular, incluindo produção de proteína recombinante, estudo de crescimento e diferenciação celular, investigação de vias de sinalização celular, produção de vacinas virais, bem como descoberta e desenvolvimento de medicamentos.
Um desses meios isentos de soro é o DMEM com F-12 de Ham, que é utilizado no crescimento de células de mamíferos, incluindo MDCK, células gliais, fibroblastos, células endoteliais humanas e fibroblastos de rato. O DMEM contém altas concentrações de aminoácidos, glicose e vitaminas e o F12 de Ham fornece zinco, putrescina, hipoxantina e timidina. Tampões como FBS e HEPES podem ser incluídos para compensar a perda de capacidade de tamponamento.
DMEM com e sem vermelho de fenol
O vermelho de fenol é um indicador de pH que muda de cor em diferentes valores de pH e é comumente adicionado ao DMEM em uma concentração de 0,01-0,03%. É útil para monitorar o pH do meio e garantir que permaneça dentro da faixa apropriada para o crescimento e metabolismo celular.
Algumas células podem ser sensíveis ao vermelho de fenol ou podem ser afetadas por sua presença no meio, então DMEM sem vermelho de fenol também está disponível. Para algumas aplicações posteriores, como análise de proteínas ou análise de expressão gênica, a presença de vermelho de fenol no meio pode interferir. Para algumas técnicas de imagem, como microscopia de fluorescência, o uso de DMEM sem vermelho de fenol também pode ser necessário para obter resultados precisos. O vermelho de fenol absorve a luz no espectro visível e pode, portanto, interferir na precisão dessas técnicas. A escolha entre DMEM com e sem vermelho de fenol depende das necessidades e exigências específicas das células que estão sendo cultivadas e dos objetivos do trabalho experimental.
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