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MABS1254

Sigma-Aldrich

Anticorpo anti-O-GlcNAc, clone CTD110.6

clone CTD110.6, from mouse

Sinônimo(s):

O-GlcNAc, beta-O-GlcNAc, O-Linked N-Acetylglucosamine, beta-O-linked N-acetylglucosamine

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About This Item

Código UNSPSC:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

fonte biológica

mouse

Nível de qualidade

forma do anticorpo

purified immunoglobulin

tipo de produto de anticorpo

primary antibodies

clone

CTD110.6, monoclonal

reatividade da espécie (prevista por homologia)

all

técnica(s)

ELISA: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable

Isotipo

IgMκ

modificação pós-traducional do alvo

glycosylation

Informações sobre genes

human ... OGT(8473)

Descrição geral

A modificação pós-tradução de proteínas por N-acetilglicosamina ligada a β (β-GlcNAc) através das porções hidroxila nos resíduos de serina ou treonina é denominada β-GlcNAc ligada ao O, ou simplesmente O-GlcNAc. A O-GlcNAc é uma das modificações pós-tradução mais abundantes dentro dos compartimentos nucleocitoplasmáticos de todos os animais e plantas. Ao contrário de outros tipos de glicosilações proteicas, a O-GlcNAc ocorre exclusivamente dentro dos compartimentos nuclear e citoplasmático e geralmente não sofre outras modificações para formar estruturas mais alongadas. Além disso, a O-GlcNAcilação é um processo altamente dinâmico e reversível. A O-GlcNAc transferase (OGT) liga a O-GlcNAc a proteínas em resíduos específicos de serina ou treonina, enquanto a O-GlcNAcase catalisa a remoção/hidrólise de O-GlcNAc das proteínas. De fato, uma interação dinâmica entre a O-GlcNAcilação e a fosforilação de serina/treonina desempenha um papel importante na regulação da sinalização celular. A Tau e RNA polimerase II (Pol II) são duas proteínas bem conhecidas que sofrem modificação por O-GlcNAcilação. Nos cérebros humanos de pessoas com Alzheimer, a tau torna-se abundantemente fosforilada e menos O-GlcNAcilada. Da mesma forma, a O-GlcNAc é removida e substituída por O-fosfato no domínio CTD Poli II quando a fase de alongamento da transcrição é iniciada.

Especificidade

A modificação do alvo não é específica para uma determinada espécie.
O clone CTD110.6 detectou especificamente resíduos de serina e treonina com GlcNAc ligado a beta-O, mas não GlcNAc ligado a alfa-O. A presença de GlcNAc, mas não de GalNAc, aboliu a detecção da modificação do alvo. O clone CTD110.6 não reconheceu peptídeos com resíduos de serina e treonina não modificados (Comer, FI, et al. (2001). Anal. Biochem. 293(2):169-177).

Imunogênio

Epítopo: GlcNAc ligado a beta-O.
Peptídeo conjugado com KLH com um resíduo de serina modificado por O-GlcNAc.

Aplicação

Anticorpo Anti-O-GlcNAc, clone CTD110.6 é um anticorpo contra O-GlcNAc para uso em Western Blotting, ELISA, Imunoprecipitação.
Análise de Western blot: 1,0 µg/ml de um lote representativo detectou proteínas O-GlcNAciladas em 7,5-15 µg de lisado de fibroblastos embrionários de camundongos (mouse embryonic fibroblast, MEF) do tipo selvagem, mas não lisado de MEF deficiente em O-GlcNAc transferase/OGT (cortesia do Dr. Natasha Zachara e Gokben Yildirir, M.S.).
Análise ELISA: Um lote representativo detectou o peptídeo de domínio C-terminal (CTD) da RNA polimerase II (YSPTSPS) com uma única serina ou treonina O-GlcNAcilada, mas não o peptídeo não modificado correspondente (Comer, FI, et al. (2001). Anal. Biochem. 293(2):169-177).
Análise por imunoprecipitação: Um lote representativo de proteínas O-GlcNAciladas imunoprecipitadas de células-tronco pluripotentes humanas (hPSCs) (Maury, JJ, et al. (2013). Stem Cell Res. 11(2):926-937).
Análise por imunoprecipitação: Um lote representativo de proteínas O-GlcNAciladas imunoprecipitadas de extratos de células HeLa (Comer, FI, et al. (2001). Anal. Biochem. 293(2):169-177).
Análise de Western blot: Um lote representativo detectou um nível semelhante de O-GlcNAcilação celular em células-tronco pluripotentes humanas indiferenciadas, diferenciadas e terminalmente diferenciadas (hPSCs) (Maury, JJ, et al. (2013). Stem Cell Res. 11(2):926-937).
Análise de Western blot: Um lote representativo detectou peptídeo de domínio C-terminal (CTD) de RNA polimerase II conjugado com BSA (YSPTSPS) com GlcNAc ligado a beta-O, mas não GlcNAc ligado a alfa-O, nem o peptídeo não modificado correspondente. A presença de GlcNAc, mas não de GalNAc, aboliu a detecção das bandas alvo (Comer, F.I., et al. (2001). Anal. Biochem. 293(2):169-177).
Análise de Western blot: Um lote representativo detectou proteínas O-GlcNAciladas no extrato nuclear HeLa, bem como proteínas O-GlcNAciladas purificadas do extrato nuclear HeLa & extrato citosólico por coluna de aglutinina de gérmen de trigo (WGA). O bloqueio de anticorpos pelo peptídeo de imunogênio antes do imunotransferência aboliu a detecção de bandas alvo (Comer, FI, et al. (2001). Anal. Biochem. 293(2):169-177).
Análise de Western blot: Um lote representativo detectou uma regulação positiva de proteínas O-GlcNAciladas em células Jurkat tratadas com o inibidor da glucosaminidase PUGNAc e o intermediário da via da hexosamina, glucosamina (Comer, FI, et al. (2001). Anal. Biochem. 293(2):169-177).
Categoria de pesquisa
Sinalização
Subcategoria de pesquisa
Modificação pós-tradução geral

Qualidade

Avaliado por western blot em lisado de células HeLa.

Análise de western blot: 4,0 µg/ml deste anticorpo detectou O-GlcNAciladas em 10 µg de lisado de células HeLa.

Descrição-alvo

Variável dependendo do(s) tamanho(s) da(s) proteína(s) O-GlcNAciladas.

forma física

Anticorpo IgMκ monoclonal de camundongo purificado em PBS com 0,05% de azida sódica.
Formato: Purificado

Armazenamento e estabilidade

Estável por 1 ano a 2-8 °C a partir da data de recebimento.

Outras notas

Concentração: consulte a ficha de informações específica do lote.

Exoneração de responsabilidade

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Código de classe de armazenamento

10 - Combustible liquids

Classe de risco de água (WGK)

WGK 2

Ponto de fulgor (°F)

Not applicable

Ponto de fulgor (°C)

Not applicable


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