HTS103M
Preparado de membrana do receptor humano de dopamina D3 ChemiSCREEN
Human D3 GPCR membrane preparation for Radioligand binding Assays & GTPγS binding.
Faça loginpara ver os preços organizacionais e de contrato
About This Item
Código UNSPSC:
41106514
eCl@ss:
32161000
NACRES:
NA.84
Produtos recomendados
fonte biológica
human
Nível de qualidade
recombinante
expressed in Chem-1 cells
fabricante/nome comercial
ChemiScreen
Chemicon®
técnica(s)
ligand binding assay: suitable (GTPγS)
radioligand binding assay (RLBA): suitable
nº de adesão NCBI
nº de adesão UniProt
Condições de expedição
dry ice
Descrição geral
A dopamina é um neurotransmissor da família das catecolaminas que age no SNC para controlar processos locomotores, cognitivos, emocionais e neuroendócrinos, bem como no sistema periférico para modular processos cardiovasculares, renais e gastrointestinais. As atividades biológicas da dopamina são mediadas por uma família de cinco GPCRs (receptores acoplados a proteínas G). Os subtipos D1 e D5 se acoplam a Gs para aumentar o cAMP intracelular, enquanto os subtipos D2, D3 e D4 se acoplam a Gi para reduzir o cAMP (Missale et al., 1998). O receptor dopaminérgico D3 é expresso em regiões filogeneticamente mais antigas do cérebro, o que indica que ele desempenha um papel nas funções cognitivas e emocionais. Ela foi alvo de possíveis medicamentos para transtornos psicóticos e doença de Parkinson. Os preparados de membranas de D3 da Chemicon são preparados de membrana brutos, feitos com as nossas linhagens celulares recombinantes estáveis exclusivas para garantir um alto nível de expressão de GPCR na superfície; portanto, eles são ferramentas para HTS ideais para a triagem de antagonistas de interações entre D3 e seus ligantes. Os preparados de membrana exibem um Kd de 0,1 nM para [125I]-iodospiperona. Com 5,0 ug/poço de preparado de membrana de D3 e [125I]-iodospiperona 0,1 nM, foi obtida uma razão sinal-ruído superior a 4 vezes.
Receptor D3 humano
Aplicação
Preparo das membranas de GPCR (receptores acoplados a proteínas G) de D3 humano para ensaios de ligação de radioligantes e ligação de GTPγS.
Ações bioquímicas/fisiológicas
Alvo da proteína: D3
Qualidade
Tabela 1. Valores da razão sinal-ruído e de ligação específica obtidos em um ensaio de ligação por competição com quantidades variáveis de preparado de membrana de receptor D3.
ESPECIFICAÇÕES: 1 unidade = 5 µg de preparado de membrana
Bmáx: 0,32 pmol/mg
Kd: 0,1 nM
| 10 µg/poço | 5 µg/poço | |
|---|---|---|
| razão sinal-ruído | 4,88 | 5,93 |
| ligação específica (cpm) | 1853,7 | 1861,3 |
ESPECIFICAÇÕES: 1 unidade = 5 µg de preparado de membrana
Bmáx: 0,32 pmol/mg
Kd: 0,1 nM
Especificações
Condições de incubação
As membranas são misturadas com ligante radioativo e um competidor não marcado (vide as concentrações testadas nas Figuras 1 e 2) no tampão de ligação em uma placa de 96 poços não aderente e incubadas por 1-2 h. Antes da filtração, uma placa de filtro de GF/C com 96 poços é revestida com polietilenimina a 0,33% por 30 min e, em seguida, lavada com Tris 50 mM, pH 7,4. A reação de ligação é transferida para a placa de filtração e lavada 3 vezes (1 ml por poço, por lavagem) com tampão de lavagem. A placa é seca e contada.
Tampão de ligação: Tris 50 mM, pH 7,4, NaCl 120 mM, filtrado e armazenado a 4 °C
Radioligante: [125I]-Iodospiperona (Perkin Elmer N.º NEX284)
Tampão de lavagem: Tris 50 mM, pH 7,4, filtrado e armazenado a 4 °C.
As membranas são misturadas com ligante radioativo e um competidor não marcado (vide as concentrações testadas nas Figuras 1 e 2) no tampão de ligação em uma placa de 96 poços não aderente e incubadas por 1-2 h. Antes da filtração, uma placa de filtro de GF/C com 96 poços é revestida com polietilenimina a 0,33% por 30 min e, em seguida, lavada com Tris 50 mM, pH 7,4. A reação de ligação é transferida para a placa de filtração e lavada 3 vezes (1 ml por poço, por lavagem) com tampão de lavagem. A placa é seca e contada.
Tampão de ligação: Tris 50 mM, pH 7,4, NaCl 120 mM, filtrado e armazenado a 4 °C
Radioligante: [125I]-Iodospiperona (Perkin Elmer N.º NEX284)
Tampão de lavagem: Tris 50 mM, pH 7,4, filtrado e armazenado a 4 °C.
forma física
Um pacote contém membranas suficientes para pelo menos 200 ensaios (unidades), em que uma unidade é a quantidade de membrana que gera uma razão sinal-ruído superior a 4 vezes com iodospiperona marcada com 125I a 0,1 nM.
Líquido em tampão de embalo: Tris 50 mM, pH 7,4, glicerol a 10%, sem conservantes.
Método de embalo: A concentração de proteínas das membranas foi ajustada para a concentração indicada no tampão de embalo, congelada rapidamente e armazenada a –80 °C.
Líquido em tampão de embalo: Tris 50 mM, pH 7,4, glicerol a 10%, sem conservantes.
Método de embalo: A concentração de proteínas das membranas foi ajustada para a concentração indicada no tampão de embalo, congelada rapidamente e armazenada a –80 °C.
Informações legais
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Código de classe de armazenamento
12 - Non Combustible Liquids
Classe de risco de água (WGK)
WGK 2
Ponto de fulgor (°F)
Not applicable
Ponto de fulgor (°C)
Not applicable
Certificados de análise (COA)
Busque Certificados de análise (COA) digitando o Número do Lote do produto. Os números de lote e remessa podem ser encontrados no rótulo de um produto após a palavra “Lot” ou “Batch”.
Já possui este produto?
Encontre a documentação dos produtos que você adquiriu recentemente na biblioteca de documentos.
Nossa equipe de cientistas tem experiência em todas as áreas de pesquisa, incluindo Life Sciences, ciência de materiais, síntese química, cromatografia, química analítica e muitas outras.
Entre em contato com a assistência técnica