ABS1655

Anticorpo antiPDI, arginilado (Nt-Asp18)

from rabbit, purified by affinity chromatography

• Sinônimo(s): Protein disulfide-isomerase, Nt-Asp18 arginylated, Cellular thyroid hormone-binding protein, Nt-Asp18 arginylated, p55, Nt-Asp18 arginylated, P4Hbeta, Nt-Asp18 arginylated, PDI, Nt-Asp18 arginylated, Prolyl 4-hydroxylase subunit beta, Nt-Asp18 arginylate
• Código UNSPSC: 12352203
• eCl@ss: 32160702

Propriedades

• fonte biológica: rabbit
• forma do anticorpo: affinity isolated antibody
• tipo de produto de anticorpo: primary antibodies
• clone: polyclonal
• purificado por: affinity chromatography
• reatividade de espécies: human
• reatividade da espécie (prevista por homologia): chimpanzee (based on 100% sequence homology)
• técnica(s): ELISA: suitable; immunocytochemistry: suitable; western blot: suitable
• nº de adesão NCBI: NP_000909
• nº de adesão UniProt: P07237
• Condições de expedição: ambient
• modificação pós-traducional do alvo: unmodified
• Informações sobre genes: human ... P4HB(5034)

Descrição

Descrição geral

A proteína dissulfeto isomerase (EC 5.3.4.1; UniProt P07237; também conhecida como proteína de ligação ao hormônio tireoidiano celular, p55, P4Hbeta, PDI, subunidade beta da prolil 4-hidroxilase) é codificada pelo gene P4HB (também conhecido como CLCRP1, ERBA2L, PDI, PDIA1, PO4DB) (ID do gene 5034) em humanos. A proteína dissulfeto isomerase (PDI), BiP (GRP78 ou proteína 5 de choque térmico de 70 kDa) e a calreticulina (CRT) são fatores de enovelamento no lúmen do RE que, em conjunto com outras enzimas do sítio de modificação pós-tradução (PTM), auxiliam o processo de proteínas recém-sintetizadas antes que sejam liberadas do RE. As próprias PDI, BiP e CRT estão sujeitas à remoção do peptídeo de sinalização pós-tradução após sua síntese, expondo D18, E19 e E18 na extremidade N recém-formada, respectivamente. Os resíduos D e E da extremidade N das proteínas maduras são passíveis de arginilação catalisada pela arginina-tRNA-proteína transferase 1/ATE1, formando proteínas maduras arginiladas (R-DPI, R-BiP e R-CRT) com localização celular alterada para permitir sua participação em funções fora do retículo endoplasmático. Embora os níveis basais apenas de R-PDI e R-CRT, mas não de R-BiP, sejam detectáveis de modo geral em células não estimuladas, o aumento da expressão da arginilação N-terminal de todas as três proteínas é observado após a exposição ao dsDNA citossólico e inibição de proteassomas, indicando um papel compartilhado nas respostas imunes inatas a micróbios invasores. Além disso, a indução do estresse do RE pelo tratamento com tapsigargina potencializa de maneira sinérgica o aumento da expressão dos níveis celulares de R-DPI, R-BiP e R-CRT induzido pela inibição dos proteassomas, o que indica que o estresse do RE acelera o fornecimento de DPI, BiP e CRT luminais do RE para arginilação da extremidade N.

Especificidade

Este anticorpo policlonal de coelho detectou especificamente o peptídeo imunogênico, mas não o peptídeo controle sem arginilação de Asp18 na extremidade N (Cha-Molstad, H., et al. (2015). Nat. Cell Biol. 17(7):917-929).

Imunogênio

Epítopo: extremidade N

Peptídeo linear correspondente à sequência N-terminal da PDI humana madura arginilada.

Aplicação

Análise imunocitoquímica: uma diluição de 1:100 de um lote representativo detectou indução da arginilação de Nt-Asp18 da PDI em células HeLa tratadas (por 18 h, MG132 3 µM e tapsigargina 200 nM) (Cortesia de Yong Tae Kwon, Ph.D., Universidade Nacional de Seul, Coreia).

Análise de western blot: 0,2 µg/ml de um lote representativo detectou indução da arginilação de Nt-Asp18 da PDI em células HeLa tratadas (por 18 h, MG132 3 µM e tapsigargina 200 nM) (Cortesia de Yong Tae Kwon, Ph.D., Universidade Nacional de Seul, Coreia).

Análise por ELISA: um lote representativo detectou o peptídeo imunogênico, mas não o peptídeo controle sem arginilação no Asp18 da extremidade N (Cha-Molstad, H., et al. (2015). Nat. Cell Biol. 17(7):917-929).

Análise de western blot: um lote representativo detectou indução da arginilação de Nt-Asp18 da PDI após transfecção poli(dA:dT) ou superexpressão da isoforma arginina-tRNA-proteína transferase 1 (ATE1) 1A7A em células HeLa. A combinação da inibição de proteassoma e indução do estresse do RE (retículo endoplasmático) por um tratamento de 18 h com MG132 10 µM e tapsigargina 100 nM integrou de forma sinérgica a eficácia dos dois medicamentos quanto à indução da arginilação de Nt-Asp18 da PDI (Cha-Molstad, H., et al. (2015). Nat. Cell Biol. 17(7):917-929).

Categoria de pesquisa
Sinalização

Detecte PDI madura arginilada usando este anticorpo policlonal de coelho antiPDI, arginilado (Nt-Asp18), N.° do cat. ABS1655, validado para uso em ELISA, imunocitoquímica e western blot.

Qualidade

Avaliado por western blot em células HEK293 tratadas.

Análise de western blot: 1 µg/ml deste anticorpo detectou a indução da arginilação de Nt-Asp18 da PDI em 7,5 µg de lisado de células HEK293 tratadas (por 17 h com MG132 3 µM e tapsigargina 200 nM).

Descrição-alvo

aproximadamente 57 kDa observado. 55,45 kDa calculado. Bandas não caracterizadas podem ser observadas em um ou mais lisados.

forma física

Anticorpo policlonal de coelho purificado em PBS com 0,05% de azida sódica.

Purificado por afinidade.

Armazenamento e estabilidade

Estável por 1 ano a 2-8 °C a partir da data de recebimento.

Outras notas

Concentração: consulte a ficha de informações específica do lote.

Exoneração de responsabilidade

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Informações de segurança

• Código de classe de armazenamento: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe de risco de água (WGK): WGK 2
• Ponto de fulgor (°F): Not applicable
• Ponto de fulgor (°C): Not applicable