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R7757

Sigma-Aldrich

Tampon de lyse des érythrocytes Hybri-Max™

Liquid, sterile-filtered, suitable for hybridoma

Synonyme(s) :

Tampon de lyse des érythrocytes

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About This Item

Code UNSPSC :
12352207
Nomenclature NACRES :
NA.75

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Nom du produit

Tampon de lyse des érythrocytes Hybri-Max™, liquid, sterile-filtered, suitable for hybridoma

Stérilité

sterile-filtered

Forme

liquid

Technique(s)

cell culture | hybridoma: suitable

Impuretés

endotoxin, tested

Application

Protocole recommandé : Verser 1 ml de tampon dans un culot de cellules (culot de cellules = 1 rate ou 100 à 200 millions de cellules). Mélanger délicatement pendant 1 minute. Diluer le tampon dans 15 à 20 ml de milieu ou de solution saline. Centrifuger à 250 à 500 × g pendant 7 minutes, puis décanter le surnageant. Les cellules peuvent être préparées en vue d'un dénombrement ou d'une fusion. Si la lyse est incomplète, les étapes 1 à 4 peuvent être répétées.

Actions biochimiques/physiologiques

Ce tampon de lyse des érythrocytes est conçu pour les protocoles d'obtention d'hybridomes afin d'éliminer les érythrocytes présents dans les suspensions de splénocytes de souris avant la fusion. Il peut également être utilisé dans des systèmes pouvant nécessiter l'élimination des érythrocytes présents dans des suspensions de cellules (comme le sang total).

Composants

Contient 8,3 g/l de chlorure d'ammonium dans un tampon Tris-HCl 0,01 M.

Autres remarques

Remarque : Ce produit est conçu pour l'élimination d'érythrocytes de souris. Il peut ne pas convenir à la lyse d'érythrocytes d'autres animaux. Sa capacité à être utilisé dans des applications autres que les splénocytes de souris doit être déterminée par le chercheur.

Informations légales

Hybri-Max is a trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC

Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

nwg

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable

Listes réglementaires

Les listes réglementaires sont principalement fournies pour les produits chimiques. Seules des informations limitées peuvent être fournies ici pour les produits non chimiques. L'absence d'indication signifie qu'aucun des composants n'est répertorié. Il incombe à l'utilisateur de s'assurer de l'utilisation sûre et légale du produit.

EU REACH Annex XVII (Restriction List)

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Questions

1–6 of 6 Questions  

  1. I will be using your RBC cell lysing buffer cat# R7757. The protocol on your web site mentions to add 1mL of the lysis buffer to a cell pellet representing 1 spleen. Is this correct? That just seems low to me. Please let me know.

    1 answer

    1. The correct volume is 1mL per mouse spleen, or 100-200 million cells, for use in hybridoma protocols.

      Helpful?

  2. Is the BSA standard supplied with Product B6916, Bradford Reagent?

    1 answer

    1. No, we do not supply the BSA standard with this reagent. We recommend using one of the following products: Protein Standard (BSA) Solution, (2 mg/mL), Product No. P0834 or Protein Standard (BSA) Solution, (1 mg/mL), Product No. P0914, if lower concentrations of protein are to be measured.

      Helpful?

  3. In step 3 of your usage sheet for Product R7757, Red Blood Cell Lysing Buffer Hybri-Max™, you say to dilute this buffer with medium or "salt solution". What salt solution is appropriate?

    1 answer

    1. Any balanced salt solution such as DPBS (Dulbecco's phosphate buffered saline) or HBSS (Hank's Balanced Salt Solution) may be used to dilute the buffer when following this procedure.

      Helpful?

  4. Can Product R7757, Red Blood Cell Lysing Buffer Hybri-Max™, be used to lyse cells that are trapped in whole tissue preparations?

    1 answer

    1. Unfortunately, we have not verified the suitability of this lysis buffer for using with tissue samples and do not have a protocol.

      Helpful?

  5. Since you do not recommend Product R7757, Red Blood Cell Lysing Buffer Hybri-Max™, for treating whole blood, what protocol and products do you recommend for red cell lysis in a sample of whole blood?

    1 answer

    1. The following is a suggested protocol:1. Centrifuge to remove plasma. A volume of 0.2 mL of whole blood will yield approximately 0.1 mL of packed cells. Add 0.1ml of 1X buffer such as HBSS (Hanks' balanced salt solution, Product No. H1641) or DPBS (Dulbecco's phosphate buffered saline solution, Product No. D1283), to 0.1 mL of the pelleted cells and resuspend the pellet.2. Add 1-2 mls of 0.1X diluent (or water) and quickly mix cells using the same pipette.3. After 15 seconds, quickly add a volume of 2X diluent in the amount used in step 2 and mix thoroughly.  Dilute further with 1X diluent.  Wash cells once with buffer.

      Helpful?

  6. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    1 answer

    1. Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.

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