MABE343

Anticorps anti-puromycine, clone 12D10

clone 12D10, from mouse

• Synonyme(s) : Anti-Puromycin, Clone 12D10 Anti-Puromycin, Puromycin Detection Antibody
• Code UNSPSC : 12352203
• eCl@ss : 32160702
• Nomenclature NACRES : NA.41

Propriétés

• Source biologique: mouse
• Niveau de qualité: 100
• Forme d'anticorps: purified immunoglobulin
• Type de produit anticorps: primary antibodies
• Clone: 12D10, monoclonal
• Espèces réactives: human
• Réactivité de l'espèce (prédite par homologie): all
• Technique(s): flow cytometry: suitable; immunocytochemistry: suitable; immunofluorescence: suitable; immunohistochemistry: suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• Isotype: IgG2aκ
• Conditions d'expédition: wet ice
• Modification post-traductionnelle de la cible: unmodified
• Informations sur le gène: human ... NPEPPS(9520)

Description

Description générale

La puromycine est un antibiotique aminoglycoside dérivée de la bactérie Streptomyces alboniger. Il agit comme inhibiteur de la synthèse des protéines, en induisant la terminaison prématurée de la chaîne protéique dans le ribosome. Les anticorps monoclonaux anti-puromycine peuvent être utilisés avec des méthodes d′immunochimie standard pour examiner directement la traduction, à l′aide d′une méthode appelée « SUnSET » (surface sensing of translation). Son utilité dans les analyses de la traduction des protéines provient du fait qu′une partie de la molécule ressemble à l′extrémité 3′ de l′aminoacyl-ARNt. La puromycine induit la fragmentation de l′ADN dans les thymocytes et les cellules leucémiques humaines HL-60.

Spécificité

Anticorps anti-puromycine, clone 12D10 : réaction vérifiée avec un échantillon test humain préalablement incubé avec de la puromycine. Réaction anticipée avec toutes les espèces lorsque l'échantillon test est incubé avec de la puromycine.

Immunogène

Puromycine dérivée de Streptomyces alboniger

Application

Analyse par western blot (marquage des protéines totales) : Des lysats de cellules HEK293 traitées à la puromycine et au cycloheximide ou à la puromycine uniquement ont été résolus sur SDS-PAGE et transférés sur une membrane. Les protéines ont été visualisées par coloration au rouge Ponceau S.

Analyse par immunochimie : Une dilution au 1/10 000ème d′un lot représentatif a détecté les protéines nouvellement synthétisées qui ont incorporé la puromycine dans les lysats de cellules HeLa traitées à la puromycine.

Analyse par western blot : Un lot représentatif a détecté les protéines nouvellement synthétisées par western blot (Reineke, L. C., et al. (2012). Mol Biol Cell. 23(18):3499-3510.; Trinh, M. A. et al. (2012). Cell Rep. 1(6):678-688.; Fortin, D. A., et al. (2012). J Neurosci. 32(24):8127-8137.; Clavarino, G., et al. (2012). PLoS Pathog. 8(5):e1002708.; David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; White, L. K., et al. (2011). J Virol. 85(1):606-620.; Hoeffer, C. A., et al. (2011). Proc Natl Acad Sci USA. 108(8):3383-3388.; Goodman, C. A., et al. (2010). FASEB J. 25(3):1028-1039.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.; Santini, E., et al. (2013). Nature. 493(7432):411-415.; Quy. P. N., et al. (2013). J Biol Chem. 288(2):1125-1134.; Hulmi. J. J., et al. (2012). Am J Physiol Endocrinol Metab. 304(1):E41-50.; Bhattacharya, A., et al. (2012). Neuron. 76(2):325-337.; Hoeffer, C. A., et al. (2013). J Neurophysiol. 109(1):68-76.).

Analyse par immunofluorescence : Un lot représentatif a détecté les protéines nouvellement synthétisées qui ont incorporé la puromycine par western blot (Reineke, L. C., et al. (2012). Mol Biol Cell. 23(18):3499-3510.; Trinh, M. A. et al. (2012). Cell Rep. 1(6):678-688.; Fortin, D. A., et al. (2012). J Neurosci. 32(24):8127-8137.;David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; David, A., et al. (2011). J Biol Chem. 286(23):20688-20700.; White, L. K., et al. (2011). J Virol. 85(1):606-620.; Hoeffer, C. A., et al. (2011). Proc Natl Acad Sci USA. 108(8):3383-3388.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.; Goodman, C. A., et al. (2012). Proc Natl Acad Sci USA. 109(17):E989.; Santini, E., et al. (2013). Nature. 493(7432):411-415.; Quy. P. N., et al. (2013). J Biol Chem. 288(2):1125-1134.).

Analyse par immunohistochimie : Un lot représentatif a détecté les protéines nouvellement synthétisées qui ont incorporé la puromycine par IHC (Goodman, C. A., et al. (2010). FASEB J. 25(3):1028-1039.).

Analyse par triage de cellules marquées par fluorescence (FACS) : Un lot représentatif a détecté les protéines nouvellement synthétisées qui ont incorporé la puromycine par FACS (David, A., et al. (2012). J Cell Biol. 197(1):45-57.; Schmidt, E., K., et al. (2009). Nat Methods. 6(4):275-277.).

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Catégorie de recherche
Épigénétique et fonction nucléaire

L′anticorps anti-puromycine, clone 12D10, détecte la puromycine incorporée dans les protéines. Les anticorps monoclonaux anti-puromycine peuvent être utilisés avec des méthodes d′immunochimie standard.

Sous-catégorie de recherche
Métabolisme de l′ARN et protéines de liaison

Qualité

Évalué par western blot dans des lysats de cellules HEK293 traitées à la puromycine et au cycloheximide ou à la puromycine uniquement.

Analyse par western blot  À une dilution au 1/25 000ème, cet anticorps détecte les protéines nouvellement synthétisées qui ont incorporé la puromycine dans les lysats de cellules HEK293 traitées à la puromycine uniquement. Cet anticorps détecte également une plus faible quantité de protéines nouvellement synthétisées qui ont incorporé la puromycine dans les lysats de cellules HEK293 traitées à la puromycine et au cycloheximide.

Description de la cible

La puromycine est incorporée dans les protéines nouvellement synthétisées. En présence de puromycine uniquement, cet anticorps détecte les protéines nouvellement synthétisées de multiples poids moléculaires qui ont incorporé la puromycine. Cependant, un signal plus faible est obtenu lorsque le cycloheximide est également présent, car il inhibe la biosynthèse des protéines dans les organismes eucaryote.

Forme physique

Anticorps monoclonal IgG2aκ purifié dans un tampon contenant 0,1 M de Tris-glycine, pH 7,4, 150 mM de NaCl et 0,05 % d′azoture de sodium.

Format : purifié

Protéine G purifiée

Stockage et stabilité

Stable pendant 1 an entre 2 et 8 °C à partir de la date de réception.

Remarque sur l'analyse

Contrôle
Lysats de cellules HEK293 traitées à la puromycine et au cycloheximide ou à la puromycine uniquement.

Autres remarques

Concentration : Pour connaître la concentration spécifique du lot, veuillez vous référer au certificat d′analyse.

Informations légales

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