Poly-L-Lysin-Zellanhaftungsprotokoll
Zellanhaftung an einer Oberfläche durch den Einsatz von Polylysin
Poly-L-Lysin ist ein unspezifischer Bindungsfaktor für Zellen und erhöht die Zelladhäsion an festen Substraten, indem es die elektrostatische Interaktion zwischen negativ geladenen Ionen der Zellmembran und der Kulturoberfläche verstärkt. Nach der Absorption an der Kulturoberfläche erhöht Polylysin die Anzahl der positiv geladenen Zellbindungsstellen. Das folgende Protokoll gilt für die Produktnummern P4707*, P4832*, P7280, P6407, P7405, P9155, P6282 und P5899.
Die optimalen Bedingungen müssen für jede Zelllinie und jede Anwendung bestimmt werden.
- 5 mg Polylysin werden mit 50 ml sterilem Wasser in Zellkulturqualität versetzt.
- Die Kulturoberfläche wird aseptisch mit (nur) 1,0 ml/ 25 cm2 beschichtet. Es wird leicht gerüttelt, um eine gleichmäßige Beschichtung der Kulturoberfläche sicherzustellen.
- Nach 5 Minuten wird die Lösung durch Absaugen entfernt und die Oberfläche gründlich mit sterilem Wasser für Gewebekulturen abgespült.
- Vor dem Einbringen von Zellen und Medium mindestens 2 Stunden trocknen lassen.
*Hinweis: Schritt 1 ist bei Polylysinlösungen (P4707 und P4832) nicht erforderlich.
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