Dulbeccos Modified Eagle Medium (DMEM)
Dulbeccos Modified Eagle Medium (DMEM) ist unter den definierten Medien für die Zell- und Gewebekultur das am besten geeignete Medium für viele adhärente Zellphänotypen. Dazu zählen Säugetierzellen, Insektenzellen und Pflanzenzellen. Das ursprüngliche Eagle Medium wurde in den 1950ern entwickelt und zum Kultivieren von Hühnerzellen formuliert. Die Dulbecco-Modifikation ist jedoch eine verbesserte Zusatzformulierung, die den Gehalt an ausgewählten Aminosäuren und Vitaminen verglichen mit dem ursprünglichen Eagle Medium um das bis zu Vierfache erhöht.
In Zellkulturen wird DMEM als Medium verwendet, um das Wachstum verschiedener Zelltypen zu fördern, einschließlich Primärzellen, Stammzellen und transformierte Zellen. Die modifizierte Version von DMEM kann auch für verschiedene Forschungsanwendungen wie Wirkstoffforschung, Gewebezüchtung und Studien von Zellsignalwegen eingesetzt werden.
DMEM ist selbst kein Komplettmedium, da ihm notwendige Nährstoffe wie Proteine, Lipide oder Wachstumsfaktoren fehlen. Daher muss es mit zusätzlichen Komponenten wie fetalem Kälberserum (FBS), Aminosäuren und anderen Nährstoffen ergänzt werden, um eine vollständige und ausgeglichene Wachstumsumgebung für Zellen in Kultur bereitzustellen.
Unser Angebot umfasst eine Reihe von Glukosekonzentrationen sowie Formulierungen mit und ohne L-Glutamin. Für östrogenempfindliche Anwendungen sind Produkte ohne den pH-Indikator Phenolrot erhältlich. Unser umfassendes Angebot umfasst praktische, gebrauchsfertige Flüssigformate sowie ökonomische Pulvermedien für eine einfachere Lagerung und längere Haltbarkeit.
DMEM – hoher Glucosegehalt vs. niedriger Glucosegehalt
DMEM ist abhängig von den speziellen Bedürfnissen der zu kultivierenden Zellen und Ziele der Experimente mit verschiedenen Formulierungen erhältlich. Das ursprüngliche Medium wurde mit einem niedrigen Glucosegehalt von 1 g/l formuliert und eignet sich für die Zucht von Zellen, die empfindlich gegenüber einem hohen Glucosegehalt sind und in Medien mit einem hohen Anteil dieses Zuckers nicht gedeihen. DMEM mit hohem Glucosegehalt enthält 4,5 g/l Glucose und wird in der Regel für die Zucht von Zellen, die für optimales Wachstum einen hohen Glucosegehalt benötigen, eingesetzt.
Serumfreie Medien (SFM)
Serum ist eine Komponente vieler Zellkulturmedien und wird oft verwendet, um die Medien mit Hormonen, Wachstumsfaktoren und anderen Nährstoffen, die für Zellwachstum und -proliferation erforderlich sind, zu ergänzen. Serum kann jedoch Verunreinigungen und Kontaminanten enthalten, die experimentelle Ergebnisse beeinträchtigen können, und seine Verwendung kann ethische Bedenken aufwerfen.
Serumfreie Medien sind ohne Tierserum oder andere Komponenten aus Tieren formuliert. Diese Medien bestehen aus geeigneten Nährstoff- und Hormonformulierungen, die Wachstum und Proliferation von Zellen in Kultur fördern.
Einige Vorteile der Nutzung von serumfreien Medien für Zellkulturen sind gesteigerte Produktivität, höhere Konsistenz und leichtere Aufreinigung sowie nachgelagerte Verarbeitung. Serumfreie Medien können auch mit spezifischen Kombinationen von Wachstumsfaktoren für bestimmte Zelltypen und Forschungsziele formuliert werden. Diese Medien eignen sich für ein breites Spektrum von Zellkulturanwendungen, einschließlich Produktion rekombinanter Proteine, Studien zu Zellwachstum und -differenzierung, Untersuchung von zellulären Signalwegen, Produktion von Virusvakzinen sowie Wirkstoffforschung und -entwicklung.
Ein solches serumfreies Medium ist DMEM mit Hams F12, das für das Züchten von Säugetierzellen, einschließlich MDCK, Gliazellen, Fibroblasten, humane Endothelzellen und Rattenfibroblasten, eingesetzt wird. Das DMEM enthält hohe Konzentrationen von Aminosäuren, Glucose und Vitaminen, und Hams F12 enthält Zink, Putrescin, Hypoxanthin und Thymidin. Puffer wie FBS und HEPES können integriert werden, um den Verlust der Pufferkapazität zu kompensieren.
DMEM mit und ohne Phenolrot
Phenolrot ist ein pH-Indikator, der bei verschiedenen pH-Werten die Farbe ändert, und wird verbreitet in einer Konzentration von 0,01–0,03 % zu DMEM zugegeben. Er ist nützlich für die Überwachung des pH-Werts der Medien und gewährleistet, dass er innerhalb des geeigneten Bereichs für Zellwachstum und Zellstoffwechsel bleibt.
Manche Zellen können empfindlich gegenüber Phenolrot sein oder durch seine Gegenwart in den Medien beeinflusst werden, weshalb auch DMEM ohne Phenolrot erhältlich ist. Einige Downstream-Anwendungen wie Proteinanalyse oder Genexpressionsanalyse können durch die Gegenwart von Phenol in den Medien beeinträchtigt werden. In einigen Bildgebungsverfahren wie Fluoreszenzmikroskopie, kann die Verwendung von DMEM ohne Phenolrot auch erforderlich sein, um genaue Ergebnisse zu erhalten. Phenolrot absorbiert Licht im sichtbaren Spektrum und kann daher die Genauigkeit dieser Techniken beeinträchtigen. Die Wahl zwischen DMEM mit und ohne Phenolrot hängt von den spezifischen Bedürfnissen und Anforderungen der kultivierten Zellen sowie den Zielen der Experimente ab.
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