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T4174

Trypsin-EDTA-Lösung

10 ×, sterile-filtered, BioReagent, suitable for cell culture, 5.0 g porcine trypsin and 2 g EDTA, 4Na per liter of 0.9% sodium chloride

Trypsin-EDTA solution

Synonym(e):

Cocoonase, Tryptar, Tryptase

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Über diesen Artikel

EG-Nummer:
UNSPSC Code:
12352204
NACRES:
NA.75
MDL number:
Biological source:
Porcine
Concentration:
10 ×
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biological source

Porcine

Quality Segment

sterility

sterile-filtered

product line

BioReagent

form

solution

mol wt

23.4 kDa

concentration

10 ×

technique(s)

cell culture | mammalian: suitable

impurities

Porcine parvovirus, none detected (9 CFR)

pH

7.0-7.6

shipped in

dry ice

storage temp.

−20°C

Application

Dieses Produkt wird typischerweise zum Ablösen adhärenter Zellen von einer Kulturoberfläche eingesetzt. Die zum Ablösen von Zellen von ihrem Substrat erforderliche Trypsinkonzentration hängt in erster Linie vom Zelltyp und dem Alter der Kultur ab.
Trypsin-EDTA-Lösung wird für folgende Anwendungen eingesetzt:
  • als Zusatz in Zellkulturmedien zur Gewährleistung deren Erhalts[1]
  • bei der Ernte von Zellen, die bis zur Konfluenz kultiviert wurden[2]
  • zum Ablösen von lentiviral transduzierten Makrophagen[3]

Biochem/physiol Actions

Trypsin spaltet Peptide auf der C-terminalen Seite von Lysin- und Argininresten. Die Hydrolyse dieser Reaktion wird verlangsamt, wenn sich auf einer der Seiten der Spaltstelle ein Säurerest befindet, und die Hydrolyse wird beendet, wenn sich auf der Carboxylseite der Spaltstelle ein Prolinrest befindet. Der optimale pH-Wert für die Trypsinaktivität liegt zwischen 7 und 9. Trypsin kann auch zur Spaltung von Ester- und Amidbindungen synthetischer Aminosäurederivate eingesetzt werden. EDTA wird Trypsinlösungen als Chelatbildner zugegeben, um Calcium- und Magnesiumionen zu neutralisieren, da diese die Peptidbindungen verdecken, auf die Trypsin wirkt. Durch Entfernung dieser Ionen wird die enzymatische Aktivität verstärkt.

Serinprotease-Inhibitoren wie DFP, TLCK, APMSF, AEBSEF und Aprotinin hemmen Trypsin.

Preparation Note

Wenn Zellen über einen langen Zeitraum bei zu hohen Trypsinkonzentrationen inkubiert werden, können Schäden an den Zellmembranen auftreten und die Zellen absterben. Zum Auflösen bzw. zum Verdünnen von Trypsin aus einer konzentrierten Lösung sollte eine gepufferte Salzlösung ohne Ca2+ oder Mg2+ verwendet werden.

Other Notes

Trypsin besteht aus einem einsträngigen Polypeptid aus 223 Aminosäureresten und wird durch Entfernung des N-terminalen Hexapeptids von Trypsinogen produziert, das an der Lys-Ile-Peptidbindung abgespalten wird. Die Aminosäuresequenz ist durch 6 Disulfidbrücken quervernetzt. Dies ist die native Form von Trypsin, Beta-Trypsin. Beta-Trypsin kann durch Autolyse am Lys-Ser-Rest aufgespalten und so in Alpha-Trypsin umgewandelt werden. Trypsin gehört zur Familie der Serinproteasen.

Disclaimer

Dieses Produkt wird tiefgefroren bei einer Temperatur von -10 bis -40 °C gelagert. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen ist zu vermeiden.

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T4299T4049T3924
description

10 ×, sterile-filtered, BioReagent, suitable for cell culture, 5.0 g porcine trypsin and 2 g EDTA, 4Na per liter of 0.9% sodium chloride

description

1 ×, sterile-filtered, BioReagent, suitable for cell culture, 500 BAEE units porcine trypsin and 180 μg EDTA, 4Na per ml in Dulbecco′s PBS without calcium and magnesium

description

0.25%, sterile-filtered, BioReagent, suitable for cell culture, 2.5 g porcine trypsin and 0.2 g EDTA, 4Na per liter of Hanks′ Balanced Salt Solution with phenol red

description

1 ×, sterile; sterile-filtered, BioReagent, suitable for cell culture, 0.5 g porcine trypsin and 0.2 g EDTA, 4Na per liter of Hanks′ Balanced Salt Solution with phenol red

biological source

Porcine

biological source

Porcine pancreas

biological source

Porcine

biological source

Porcine

technique(s)

cell culture | mammalian: suitable

technique(s)

cell culture | mammalian: suitable

technique(s)

cell culture | mammalian: suitable, single cell analysis: suitable

technique(s)

cell culture | mammalian: suitable, single cell analysis: suitable

form

solution

form

solution

form

solution

form

solution

concentration

10 ×

concentration

1 ×

concentration

0.25%

concentration

1 ×

mol wt

23.4 kDa

mol wt

-

mol wt

23.4 kDa

mol wt

23.4 kDa

storage temp.

−20°C

storage temp.

−20°C

storage temp.

−20°C

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Lagerklasse

12 - Non Combustible Liquids

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