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PKH67GL

PKH67 grün fluoreszierendes Zelllinker-Kit für die allgemeine Zellmembranmarkierung

Distributed for Phanos Technologies

Synonym(e):

Green PKH membrane labeling kit

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NACRES:
NA.32
UNSPSC Code:
12352207

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fluorescence

λex 490 nm; λem 502 nm (PKH67 dye)

detection method

fluorometric

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ambient

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Application

Dieses Kit ist zur allgemeinen Zellmembranmarkierung vorgesehen. PKH67 hat eine längere aliphatische Kohlenstoffkette als PKH1 und PKH2, zwei weitere grüne Farbstoffe, die zuvor für die In-vitro- und In-vivo-Zellverfolgung beschrieben wurden. Basierend auf der längeren Kette zeigten interne Untersuchungen konsistent einen verringerten Zell-Zell-Transfer für PKH67, verglichen mit PKH2.
Bei In-vivo-Studien mit PKH1 und PKH2 wurde ein langsamer Verlust der Fluoreszenz beobachtet. PKH67 kann ähnliche Eigenschaften aufweisen, da dieses Verhalten charakteristisch für grüne Zelllinker-Farbstoffe zu sein scheint, aber nicht für rote Zelllinker-Farbstoffe. Die Korrelation von der In-vitro-Zellmembranrückhaltung mit der In-vivo-Fluoreszenzhalbwertszeit in sich nicht teilenden Zellen berechnet eine In-vivo-Fluoreszenzhalbwertszeit von 10 bis 12 Tagen für PKH67. Andere grüne Zelllinker-Farbstoffe mit ähnlichen Halbwertszeiten werden verwendet, um den In-vivo-Lymphozyten- und -Makrophagentransport über Zeiträume von 1 bis 2 Monaten zu beobachten, was darauf hindeutet, dass PKH67 auch für In-vivo-Verfolgungsstudien von mittlerer Länge geegígnet sind.
Das grün fluoreszierende Zelllinker-Kit PKH67 für die allgemeine Zellmembranmarkierung wird verwendet:
  • Zur Markierung und weiteren Untersuchung von Exosomen, die von Zellen in dreifach negativem Brustkrebs ausgestoßen wurden.
  • Zur Markierung von apoptotischen Zellen, um die Rolle des ανβ5-Rezeptors sowohl bei der Bindung als auch der Internalisierung von apoptotischen Zellen zu untersuchen.
  • In der Fluoreszenzbildgebung.[1]

Other Notes

Zusätzliche technische Informationen zu PKH und CellVue® Zelllinker-Fluoreszenzfarbstoffen einschließlich einer umfassenden Bibliografie finden Sie hier

Legal Information

CellVue is a registered trademark of Phanos Technologies

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Nur Kit-Komponenten

Produkt-Nr.
Beschreibung

  • Diluent C 6 x 10

  • PKH67 Cell Linker in ethanol .5 mL

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Eye Irrit. 2 - Flam. Liq. 2

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Questions

1–10 of 12 Questions  
  1. I mark mitochondria for injection with PKH26 Red Fluorescent Cell Linker Kit for General Cell Membrane Labeling. I want to use another dye to mark another type of mitochondria and inject them together in the same fish egg. Is PKH67 ok for this like PKH26?

    1 answer
    1. Yes, Product PKH67 would be suitable for this application. In this paper, both Products PKH26 and PKH67 are used in a similar application:
      https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5679712/

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  2. What can be the alternative for removing excess dye after labeling of exosomes using PKH67 dye apart from ultracentrifugation?

    1 answer
    1. Excess dye is bound to serum or albumin which is added to the cell/dye mixture as a stop reaction. The recommended clean up or dye removal is by standard centrifugation (400 x g for 10 minutes, wash, and repeat). See the Product Information Sheet, page 3, bullet point 8 for more information:
      https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/product/documents/984/984/pkh67glbul.pdf

      Alternate methods for excess dye removal have not been investigated.

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  3. Can we remove the excess PKH67 DYE used for the labeling of exosomes using exosome spin column rather than ultracentrifugation.

    1 answer
    1. The recommended exosome labeling protocol has been optimized to assure the best possible results. The use of exosome spin columns with the PKH and CellVue products has not been validated. See below for a link to our exosome labeling protocol. A spin column method may not offer the best results.

      https://www.sigmaaldrich.com/technical-documents/protocol/cell-culture-and-cell-culture-analysis/imaging-analysis-and-live-cell-imaging/exosome-labeling-pkh

      Helpful?

  4. What method of fixation can be used for tissue/cells with the PKH Fluorescent Cell Linker Kit for General Cell Membrane Labeling dyes?

    1 answer
    1. A protocol for visualization of tissue sections can be found in the technical bulletin.  For visualization of stained cells by immunofluorescence or flow cytometry, the cells can be fixed in 2% paraformaldehyde for 15 minutes. The use of other organic solvents will extract the dye from the cells.  If internal labeling is desired, the cells can be permeabilized with saponin (50-75 μg/mL). Here is the link to the Troubleshooting Guide.

      Helpful?

  5. Are cells lost during the PKH67 Green Fluorescent Cell Linker Kit for General Cell Membrane Labeling staining process?

    1 answer
    1. Over-labeling of the cells will result in loss of membrane integrity and reduced cell recovery.  Methods for improving cell viability can be found on the troubleshooting guide.

      Helpful?

  6. Does the dye leak from the cells after labeling when using Product PKH67GL, PKH67 Green Fluorescent Cell Linker Kit for General Cell Membrane Labeling?

    1 answer
    1. In general, slow loss of fluorescence has been observed with PKH1 and PKH2 in in vivo studies and it is likely that PKH67 may also slowly lose fluorescence. Leakage (or loss of staining intensity) may also occur due to cell-to-cell transfer of the dye. The most common cause of cell-to-cell dye transfer is inadequate washing of the cells. Wash cells 3-5 times after labeling and transfer samples to new tubes between washes.

      Helpful?

  7. What is the excitation and emission spectra for Product PKH67GL, Green Fluorescent Cell Linker Kit?

    1 answer
    1. The spectra can be found on the product insert.The product has a maximum excitation at 490 nm and maximum emission at 502 nm.

      Helpful?

  8. How many cells can be stained with Product PKH67GL, Green Fluorescent Cell Linker Kit?

    1 answer
    1. This kit can stain 50 × 107 cells if used as directed (1 × 107 cells stained with 2 × 10-6 M PKH67).

      Helpful?

  9. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    1 answer
    1. Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.

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  10. When using Product PKH67GL, PKH67 Green Fluorescent Cell Linker Kit for General Cell Membrane Labeling, how long will the cells remain stained after treatment?

    1 answer
    1. Labeled cells that have been washed can be visualized in culture up to 100 days after staining (for non-dividing cells). The dye itself is stable and will divide equally when the cells divide. After staining with PKH dyes, you can observe as many as 8 divisions depending on how brightly the cells were stained initially and the amount of surface area on the cells. Most commonly, 4-6 divisions can be visualized.

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