The recommended solubility of this product is 1 mg/mL in 0.01N HCl. Optimum pH is 2-4. Active in 4 M urea and 3 M guanidine HCl. This is stable at 60 °C. Pepsin is irreversibly inactivated at pH 8.0 - 8.5. Enzyme solution (pepsin) – Prepare a 1 mg/mL stock solution in cold (2-8°C) 10 mM HCl. If insoluble material is present, place the stock solution on ice until dissolved. If the pepsin has dissolved, or if insoluble material is still present, after 1 hour, further dilute the 1 mg/mL stock solution to 0.01–0.05 mg/mL with cold 10 mM HCl solution.
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P7000
Pepsin aus Schweinemagenschleimhaut
powder, ≥250 units/mg solid
Synonym(e):
Pepsin A, Pepsin aus Schweinemagen
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Über diesen Artikel
CAS-Nummer:
UNSPSC Code:
12352204
eCl@ss:
42010127
EC Number:
232-629-3
NACRES:
NA.54
MDL number:
Specific activity:
≥250 units/mg solid
Biological source:
Porcine gastric mucosa
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Unterstützung erhaltenbiological source
Porcine gastric mucosa
Quality Segment
form
powder
specific activity
≥250 units/mg solid
mol wt
35 kDa
UniProt accession no.
application(s)
diagnostic assay manufacturing
shipped in
wet ice
storage temp.
2-8°C
Gene Information
pig ... LOC396892(396892)
Application
Pepsin ist eine Peptidase zum Verdau von Proteinen und kommt häufig bei der Herstellung von Fab-Fragmenten aus Antikörpern zum Einsatz. Pepsin aus der Magenschleimhaut des Schweins wurde zur Hydrolyse trockener zervikaler Proben bei Mäusen verwendet. Produkt P7000 wird als Pulver geliefert und wurde zur Behandlung von Epithelzellen aus einem einzelnen Mammakarzinom der Katze verwendet[1].
Pepsinspaltung kann zur Herstellung von F(ab′)2-Antikörperfragmenten eingesetzt werden. Pepsin unter: www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer.
Das Enzym von Sigma wurde zur In-vitro-Simulation der Magenverdauung von gekochtem Kabeljau verwendet. Es wurde zur In-vitro-Simulation der Magenverdauung von Kakaomasse und supplementierten Ballaststoffen eingesetzt.[2] Es wurde außerdem zur Erhöhung des Anteils an extrahierbarem löslichen Collagen sowie zur Senkung der Immunogenität des resultierenden Collagens aus bovinem Hautgewebe verwendet.[3]
Biochem/physiol Actions
Bevorzugte Spaltung: hydrophobe und aromatische Reste in den Positionen P1 und P1′. Spaltet Phe-Val-, Gln-His-, Glu-Ala-, Ala-Leu-, Leu-Tyr-, Tyr-Leu-, Gly-Phe-, Phe-Phe- und Phe-Tyr-Bindungen in der β-Insulinkette auf.
Das Enzym spaltet nicht an Valin-, Alanin oder Glycin-Verbindungen. Z-L-Tyrosyl-L-phenylalanin, Z-L-Glutamyl-L-tyrosin und Z-L-Methionyl-L-tyrosin können als Substrate für den Pepsinverdau eingesetzt werden. Pepsin wird durch mehrere phenylalaninhaltige Peptide gehemmt.[4]
Pepsin hydrolysiert Peptidbindungen, nicht aber Amid- oder Ester-Verbindungen. Pepsin spaltet Peptide mit einer aromatischen Säure auf beiden Seiten der Peptidbindung. Schwefelhaltige Aminosäuren erhöhen die Empfindlichkeit gegenüber Hydrolyse, wenn sie sich in der Nähe der Peptidbindung befinden. Pepsin spaltet bevorzugt an der Carboxylseite von Phenylalanin und Leucin sowie an der Carboxylseite von Glutaminsäure-Resten auf. Spaltet Phe-Val-, Gln-His-, Glu-Ala-, Ala-Leu-, Leu-Tyr-, Tyr-Leu-, Gly-Phe-, Phe-Phe- und Phe-Tyr-Bindungen in der β-Insulinkette auf.
Pepsin ist das wichtigste im Magen produzierte proteolytische Enzym. Es verdaut Proteine durch Aufspaltung der inneren Peptidbindungen..
Pepsin ist das wichtigste im Magen produzierte proteolytische Enzym. Es verdaut Proteine durch Aufspaltung der inneren Peptidbindungen..
Analysis Note
Der optimale pH-Wert beträgt 2–4. Aktiv in 4 M Harnstoff und 3 M Guanidin HCl. Stabil bei 60 °C. Pepsin wird bei pH-Werten zwischen 8,0 und 8,5 irreversibel inaktiviert.
Other Notes
Eine Einheit erzeugt ein ΔA253 von 0,001 pro min bei einem pH-Wert von 2,0 und einer Temperatur von 37° C, gemessen als TCA-lösliche Produkte unter Verwendung von Hämoglobin als Substrat. (Endvolumen = 16 ml. Lichtweg = 1 cm.)
Weitere Informationen über Pepsin finden Sie unter www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer.
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| biological source Porcine gastric mucosa | biological source Porcine gastric mucosa | biological source - | biological source - |
| Gene Information pig ... LOC396892(396892) | Gene Information pig ... LOC396892(396892) | Gene Information pig ... LOC396892(396892) | Gene Information - |
| specific activity ≥250 units/mg solid | specific activity ≥3,200 units/mg protein | specific activity 1200-2400 U/mg | specific activity ≥2000 units/mg protein |
| form powder | form lyophilized powder | form powder | form lyophilized |
| application(s) diagnostic assay manufacturing | application(s) diagnostic assay manufacturing | application(s) - | application(s) - |
| UniProt accession no. | UniProt accession no. | UniProt accession no. | UniProt accession no. - |
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signalword
Danger
hcodes
Hazard Classifications
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
target_organs
Respiratory system
Lagerklasse
11 - Combustible Solids
flash_point_f
Not applicable
flash_point_c
Not applicable
ppe
dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves
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Is there a favoured solvent to dissolve Pepsin from Porcine Gastric Mucosa (P7000).
1 answer-
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How long can the enzyme be stored and mantain its activity?
1 answer-
This product does not contain an expiration date. It contains a recommended retest date of roughly two years after the quality release date. A recommended retest date is the period of time during which the product is expected to remain within established stability specifications, provided that it has been stored under defined conditions. After the Retest Date, product samples should be examined to ensure that the product is still in compliance with the established specifications. For more information you may access the "Product Dating Information" document under "ADDITIONAL USEFUL DOCUMENTS ABOUT OUR PRODUCTS" at the bottom of the Quality Services page with this link: https://www.sigmaaldrich.com/US/en/life-science/quality-and-regulatory-management/quality-services.
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Can I freeze stock solutions of Product P7000, Pepsin from porcine gastric mucosa (Pepsin A)?
1 answer-
Solutions of the enzyme at pH 4.4 should be stable at -20 °C for 2-3 months.
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What is the Department of Transportation shipping information for this product?
1 answer-
Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.
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I've seen the term "1:10000" used to define Product P7000, Pepsin from porcine gastric mucosa (Pepsin A). What does that mean?
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A historical measurement of pepsin activity was the ratio of pepsin to coagulated egg white that the pepsin would digest. Thus 1:10,000 would refer to one part pepsin to 10,000 parts coagulated egg white. More recent analyses use hemoglobin as a substrate, in place of coagulated egg white.
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Product P7000, Pepsin from porcine gastric mucosa (Pepsin A), can be stored at room temperature, but other pepsins are stored in the cooler or freezer. Why is this?
1 answer-
This relates to autodigestion of pepsin. P7000 is a relatively "crude" pepsin, where other proteins that are present would be more likely digestion targets. With more purified pepsin, the risk of autodigestion increases, and storage at colder temperatures reduces that risk.
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