P6887

Pepsin aus Schweinemagenschleimhaut

lyophilized powder, ≥3,200 units/mg protein

• Synonym(e): Pepsin A, Pepsin aus Schweinemagen
• CAS-Nummer: 9001-75-6
• EC-Nummer: 3.4.23.1 (BRENDA, IUBMB)
• EG-Nummer: 232-629-3
• MDL-Nummer: MFCD00081840
• UNSPSC-Code: 12352204
• eCl@ss: 42010127
• NACRES: NA.54

Eigenschaften

• Biologische Quelle: Porcine gastric mucosa
• Qualitätsniveau: 300
• Qualität: Proteomics Grade
• Form: lyophilized powder
• Spezifische Aktivität: ≥3,200 units/mg protein
• Mol-Gew.: 35 kDa
• Verunreinigungen: salt, essentially free
• Farbe: white to off-white
• Löslichkeit: deionized water: soluble 10 mg/mL; 10 mM HCl: soluble 4.0 mg/mL (Cold)
• UniProt-Hinterlegungsnummer: P00791
• Anwendung(en): diagnostic assay manufacturing
• Versandbedingung: wet ice
• Lagertemp.: −20°C
• Angaben zum Gen: pig ... LOC396892(396892)

Beschreibung

Anwendung

Pepsin ist eine Peptidase zum Verdau von Proteinen und kommt häufig bei der Herstellung von Fab-Fragmenten aus Antikörpern zum Einsatz. Pepsin aus der Magenschleimhaut des Schweins wurde zur Hydrolyse trockener zervikaler Proben bei Mäusen verwendet. Produkt P6887 wird als lyophilisiertes Pulver geliefert und für den Verdau von Proteinen bei der Analyse von Ballaststoffen verwendet.

Pepsin von Sigma wird zusammen mit anderen Enzymen verwendet, um enzymresistente Stärke (RS) in Brot nachzuweisen. Es wird außerdem zur In-vitro-Simulation des gastrointestinalen Verdaus von Isolaten aus Erbsen- oder Weizenprotein genutzt.

Pepsinspaltung kann zur Herstellung von F(ab′)₂-Antikörperfragmenten eingesetzt werden. Pepsin unter: www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer.

Biochem./physiol. Wirkung

Anders als viele andere Peptidasen hydrolysiert Pepsin nur Peptidbindungen, nicht aber Amid- oder Ester-Verbindungen. Die Spaltungsspezifität umfasst Peptide mit einer aromatischen Säure auf beiden Seiten der Peptidbindung, insbesondere wenn auch der andere Rest eine aromatische oder Dicarboxyl-Aminosäure ist. Eine erhöhte Empfindlichkeit gegenüber Hydrolyse tritt auf, wenn eine schwefelhaltige Aminosäure sich in der Nähe der Peptidbindung befindet, die eine aromatische Aminosäure umfasst. Pepsin spaltet außerdem bevorzugt an der Carboxylseite von Phenylalanin und Leucin sowie, in geringerem Ausmaß, an der Carboxylseite von Glutaminsäure-Resten. Es spaltet nicht an Valin-, Alanin oder Glycin-Verbindungen. Z-L-Tyrosyl-L-phenylalanin, Z-L-Glutamyl-L-tyrosin und Z-L-Methionyl-L-tyrosin können als Substrate für den Pepsinverdau eingesetzt werden. Pepsin wird durch mehrere phenylalaninhaltige Peptide gehemmt.

Bevorzugte Spaltung: hydrophobe und aromatische Reste in den Positionen P1 und P1′. Spaltet Phe-Val-, Gln-His-, Glu-Ala-, Ala-Leu-, Leu-Tyr-, Tyr-Leu-, Gly-Phe-, Phe-Phe- und Phe-Tyr-Bindungen in der β-Insulinkette auf.

Einheitendefinition

Eine Einheit erzeugt ein ΔA₂₈₀ von 0,001 pro min bei einem pH-Wert von 2,0 und einer Temperatur von 37 °C, gemessen als TCA-lösliche Produkte unter Verwendung von Hämoglobin als Substrat. (Endvolumen = 16 ml. Lichtweg = 1 cm.)

Hinweis zur Analyse

Der optimale pH-Wert beträgt 2–4. Aktiv in 4 M Harnstoff und 3 M Guanidin HCl. Stabil bei 60 °C. Pepsin wird bei pH-Werten zwischen 8,0 und 8,5 irreversibel inaktiviert.

Proteinbestimmung durch E1 %/280

Sonstige Hinweise

Weitere Informationen über Pepsin finden Sie unter www.sigma-aldrich.com/enzymeexplorer.

Sicherheitshinweise

• Piktogramme: GHS08,GHS07
• Signalwort: Danger
• H-Sätze: H315,H319,H334,H335
• P-Sätze: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Gefahreneinstufungen: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• Zielorgane: Respiratory system
• Lagerklassenschlüssel: 11 - Combustible Solids
• WGK: WGK 1
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
• Persönliche Schutzausrüstung: dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves