N8630

Nuclease P₁ aus Penicillium citrinum

lyophilized powder, ≥200 units/mg protein (E1%/280, 3′-5′-Phosphodiesterase)

• Synonym(e): 3′-Phosphohydrolase, Nuclease 5′-Nucleotidehydrolase, Endonuclease P₁
• CAS-Nummer: 54576-84-0
• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.54
• EG-Nummer: 3.1.30.1 (BRENDA, IUBMB)
• MDL number: MFCD00131010
• Specific activity: ≥200 units/mg protein (E1%/280, 3′-5′-Phosphodiesterase)
• Biological source: Penicillium citrinum

Eigenschaften

• biological source: Penicillium citrinum
• Quality Segment: 200
• form: lyophilized powder
• specific activity: ≥200 units/mg protein (E1%/280, 3′-5′-Phosphodiesterase)
• secondary activity: ≥1,000 units/mg protein 3′-nucleotidase
• mol wt: 42-50 kDa
• packaging: vial of ≥250 units (using RNA substrate)
• technique(s): DNA extraction: suitable, DNA purification: suitable
• suitability: suitable for molecular biology
• application(s): cell analysis
• storage temp.: 2-8°C

Beschreibung

General description

Nuklease P1 ist eine der bekanntesten einzelstrangspezifischen Nukleasen in der Molekularbiologie; Nuklease P1 ist eine einzelstrangspezifische Endonuklease (von ssDNA oder ssRNA). Nuklease P1 kann zudem einzelsträngige Bereiche in doppelsträngigen Nukleinsäuren spalten.
Nuklease P1 aus Penicillium citrinum ist eine zinkabhängige Endonuklease, die in Gegenwart von Harnstoff in niedrigen Konzentrationen erhöhte Aktivität aufweist. Die selektive Aktivität von Nuklease P1 hat sich in Studien zur Struktur von Nukleinsäuren als nützlich erwiesen.

Ein zinkabhängiges Glycoprotein, das aus 270 Aminosäureresten besteht. Molekulare Masse: 42 – 50 kDa

Application

• Nuklease P1 spaltet einsträngige DNA oder RNA in 5′-Mononukleotide auf
• Nuklease P1 unterstützt die Erforschung von DNA-Beschädigung und -Modifikation
• Nukleinsäuren-Basenzusammensetzung und strukturelle Analyse können mithilfe von Nuklease P1 durchgeführt werden.
• Nuklease P1 wird seit jeher für die industrielle Produktion von 5′-Mononukleotiden aus Hefe-RNA verwendet.
• Die Entfernung von Nukleinsäuren via Proteinaufreinigung kann mithilfe von Nuklease P1 durchgeführt werden.
• Nuklease P1 ist ein wesentliches Reagens für die Entwicklung von Verfahren für Studien mit t-RNA-abhängigen Aminosäuren-Biosynthesen und t-RNA-abhängiger Transamidierung.
• Nuklease P1 aus Penicillium citrinum wird in einer Studie zur Untersuchung von Kristallstrukturen mithilfe von Ammoniumsulfat oder Polyethylenglykol 4000 als Fällungsmittel eingesetzt.
• Nuklease P1 wird in einer Studie zur Prüfung eines Verfahrens für die direkte Sequenzanalyse von 20 – 25 Nukleotiden der Endpunkte von mit 5′- oder 3′-Endgruppen markierten RNA verwendet.
• Nuklease P1 wird verwendet, um die Empfindlichkeit eines 32P-Markierungsverfahrens für die Detektion von DNA-Addukten zu verbessern.

Die optimale Temperatur für das Enzym beträgt ca. 70 °C, bei langer Inkubaktionsdauer ist jedoch eine Temperatur von unter 60 °C besser geeignet. Es ist bei pH-Werten zwischen 5 und 8 stabil.

Die optimale Temperatur für das Enzym beträgt ca. 70 °C, bei langer Inkubaktionsdauer ist jedoch eine Temperatur von unter 60 °C besser geeignet. Es ist bei pH-Werten zwischen 5 und 8 stabil.

Biochem/physiol Actions

Katalysiert die unspezifische endonukleolytische Spaltung von einzelsträngiger DNA und RNA unter Bildung von Nukleosid-5′-Phosphaten und 5′-Phosphooligonukleotiden. Es baut doppelsträngige Nukleinsäuren nicht nennenswert ab, insbesondere nicht in Gegenwart von mehr als 400 mM Natriumchlorid bei einem pH-Wert von 6,0.

Features and Benefits

Unsere sehr aktive Nuklease P1 wurde auf ihre 3′- 5′- Phosphodiesterase-Aktivität und 3′-Nukleotidase-Aktivität geprüft und ist die aktivste auf dem Markt erhältliche Nuklease P1.

Other Notes

3′-5′-Phosphodiesterase: Eine Einheit setzt 1,0 μmol säurelösliche Nukleotide aus RNA pro min bei pH-Wert 5,3 und 37 °C frei.
3′-Nukleotidase: Eine Einheit hydrolisiert 1,0 μmol Orthophosphate aus 3′-AMP pro min bei pH-Wert 7,2 und 37 °C.

Sicherheitshinweise

• pictograms: GHS08
• signalword: Danger
• hcodes: H334
• pcodes: P261 - P284 - P501
• Hazard Classifications: Resp. Sens. 1
• Lagerklasse: 11 - Combustible Solids
• wgk: WGK 3
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable
• ppe: Eyeshields, Gloves, type N95 (US)