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MAK083

Kolorimetrisches Glucoseaufnahme-Assay-Kit

sufficient for 100 colorimetric tests

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Über diesen Artikel

NACRES:
NA.84
UNSPSC Code:
12161503

usage

sufficient for 100 colorimetric tests

detection method

colorimetric

relevant disease(s)

endocrinological disorders, diabetes; cancer

storage temp.

−20°C

General description

Für die meisten Zellen ist Glucose die Hauptenergiequelle. Die zelluläre Glucoseaufnahme ist umfassend geregelt und der erste limitierende Schritt im Glucosestoffwechsel. Die Glucoseaufnahme wird durch die GLUT-Familie der Transporterproteine unterstützt, deren Expression und Aktivität von unterschiedlichen Mechanismen reguliert wird. Die Glucoseaufnahme wird in vielen Krebszellen, die hohe Raten aerober Glycolysen aufweisen, hochreguliert. Insulinresistente Zellen weisen bei Insulinstimulation eine verminderte Glucoseaufnahme auf.

Der Einsatz einer rezyklierenden Amplifikationsreaktion im kolorimetrischen Assay führt zur einer Nachweisgrenze, die im Vergleich zum Fluoreszenzassay (200–1000 pmol, MAK084) um das 10-fache niedriger ist (20–100 pmol).

Application

Das kolorimetrische Glucoseaufnahme-Assay-Kit wird zur Messung der Glucoseaufnahme in verschiedensten Zellen verwendet.
Eignet sich zur Bestimmung der Glucoseaufnahme in adhärenten oder suspendierten Zellen, die in einer 96-Well-Mikrotiterplatte kultiviert wurden.

Biochem/physiol Actions

Das kolorimetrische Glucoseaufnahme-Assay-Kit ermöglicht ein einfaches und direktes Verfahren zur Messung der Glucoseaufnahme in verschiedensten Zellen. Die Glucoseaufnahme wird mithilfe des Glucose-Analogons 2-Desoxyglucose (2-DG) gemessen, das von Zellen aufgenommen und von Hexokinase zu 2-DG6P phosphoryliert wird. 2-DG6P kann nicht weiter metabolisiert werden und sammelt sich direkt proportional zur zellulären Glucoseaufnahme in Zellen an. In diesem Test wird die 2-DG-Aufnahme mithilfe eines gekoppelten Enzym-Assays bestimmt, bei dem 2-DG6P oxidiert und dadurch NADPH gebildet wird. Dieses wird dann durch eine rezyklierende Amplifikationsreaktion bestimmt, bei der NADPH in einer gekoppelten Enzymreaktion von Glutathionreduktase verwendet wird, um Glutathion zu bilden. Glutathion reagiert mit DTNB, um TNB zu erzeugen, welches bei 412 nm quantifiziert werden kann.

Lagerklasse

10 - Combustible liquids

signalword

Danger

wgk

WGK 3

Hazard Classifications

Aquatic Chronic 3 - ED ENV 1

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      For products without retest or expiration dates, our standard warranty of 1 year from the date of shipment is applicable.
      For more information, please refer to the Product Dating Information document: https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/marketing/global/documents/418/501/product-dating-information-06-25-mk.pdf

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  2. How is shipping temperature determined? And how is it related to the product storage temperature?

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    1. Products may be shipped at a different temperature than the recommended long-term storage temperature. If the product quality is sensitive to short-term exposure to conditions other than the recommended long-term storage, it will be shipped on wet or dry-ice. If the product quality is NOT affected by short-term exposure to conditions other than the recommended long-term storage, it will be shipped at ambient temperature. As shipping routes are configured for minimum transit times, shipping at ambient temperature helps control shipping costs for our customers. For more information, please refer to the Storage and Transport Conditions document: https://www.sigmaaldrich.com/deepweb/assets/sigmaaldrich/marketing/global/documents/316/622/storage-transport-conditions-mk.pdf

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  3. What color should be perceived when the reaction mix B is added to the samples/standards?

    1 answer

    1. The expected color is yellow to yellowish orange. The color of the standard may be easier to perceive as the standard is pure 2-DG6P, compared to a sample, where it is concentration dependent.

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