Isocitratdehydrogenase (IDH) katalysiert die Umwandlung von Isocitrat in α-Ketoglutarat. In Eukaryoten sind drei IDH-Isoformen bekannt: die mitochondrialen Isozyme IDH2 und IDH3 und das zytoplasmische/perioxisomale Isozym IDH1. Alle drei Mitglieder der IDH-Familie benötigen für ihre enzymatische Aktivität die Gegenwart eines divalenten Kations (Mg2+ oder Mn2+) sowie des Elektronen akzeptierenden Cofaktors NADP+ (IDH1 und IDH2) bzw. NAD+ (IDH3). IDH1- und IDH2-Mutationen mit dem Ergebnis einer neomorphen Enzymaktivität werden bei bestimmten Krebsarten gefunden, etwa bei Glioblastomen, akuter myeloischer Leukämie und Dickdarmkrebs. Diese Neo-Aktivität zeigt eine Veränderung der Substratspezifität und hat die Umwandlung von α-Ketoglutarat in 2-Hydroxyglutarat zur Folge. Mutationen bei Mitgliedern der IDH-Familie stehen auch mit der Ollier-Krankheit und dem Maffucci-Syndrom in Verbindung.
Anwendung
Das IDH-Aktivitätsassay-Kit wird für die Bestimmung der Aktivität von Isocitratdehydrogenase in Proben verwendet.[1][2]
Leistungsmerkmale und Vorteile
Kompatibel mit Handhabungssystemen mit hohem Durchsatz.
Eignung
Geeignet für die Messung der Aktivität von Isocitratdehydrogenase (IDH) (NAD+ abhängig, NADP+ abhängig oder beides) in biologischen Proben wie Gewebe, Zellen und Serum.
Prinzip
Das Isocitratdehydrogenase-Aktivitätsassay-Kit bietet ein einfaches, direktes Verfahren für die Messung der NADP+-abhängigen, der NAD+-abhängigen oder der NADP+ und NAD+-abhängigen IDH-Aktivität in verschiedenen Proben. Die IDH-Aktivität wird durch eine Enzymreaktion mit dem Substrat Isocitrat bestimmt, die ein kolorimetrisches Produkt (450 nm) ergibt, das proportional zur vorhandenen enzymatischen Aktivität ist. Eine IDH-Einheit ist definiert als die Menge an Enzym, die bei pH 8,0 und 37 °C pro Minute 1,0 μmol NADH oder NADP generiert.
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Frontiers in Molecular Neuroscience, 11, 267-267 (2018)
Frontiers in molecular neuroscience, 11, 267-267 (2018-08-15)
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