The Endoplasmic Reticulum Isolation Kit does not contain membrane proteins and peripheral membrane proteins. The kit includes the following components:
• Isotonic Extraction Buffer 5× (100 mL): Contains 50 mM HEPES (pH 7.8), 1.25 M sucrose, 5 mM EGTA, and 125 mM KCl.
• Hypotonic Extraction Buffer 10× (10 mL): Contains 100 mM HEPES (pH 7.8), 10 mM EGTA, and 250 mM KCl.
• Calcium Chloride Solution (5 mL): A 2.5 M CaCl2 solution.
• OptiPrep™ Density Gradient Medium (100 mL): A 60% (w/v) solution of iodixanol in water.
• Needle (4 inch, 20 gauge): One each.
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ER0100
Isolierungskit für das endoplasmatische Retikulum
isolation of intact ER from mammalian soft tissues and cultured cells
Synonym(e):
ER isolation kit
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1 kit | Warenkorb auf Verfügbarkeit prüfen | € 576,00 |
Über diesen Artikel
NACRES:
NA.32
UNSPSC Code:
12352200
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Das endoplasmatische Retikulum (ER) ist ein Netzwerk von vernetzten Tubuli, Vesikeln und Beuteln. Es spielt eine Rolle bei spezialisierten Zellfunktionen, einschließlich Proteinsynthese, Binden von Calcium, Produktion von Steroiden, Speicherung und Produktion von Glykogen und Einbringen von Membranproteinen.
Application
Das Isolierungskit für das endoplasmatische Retikulum enthält alle Reagenzien, die für ER-Aufbereitungen mit verschiedenen Reinheitsgraden erforderlich sind: rohe ER (Mikrosome), Ca2+, das durch mit rauen ER (RER) angereicherte Mikrosome ausgefällt wurde, und dichtegradientenaufgereinigte raue ER (RER) sowie glatte ER (SER). Das ER-Isolationsverfahren kann durch das Messen der Aktivität von NADPH-Cytochrom-c-Reduktase mit dem Cytochrom-c-Reduktase-Assaykit (Kat.-Nr. CY0100) überwacht werden. Das Enzym ist ein ER-Membranprotein, das häufig als ER-Marker verwendet wird. Das isolierte ER kann zur Untersuchung des Cytochrom-P450-Systems und xenobiotischen Metabolismus, zur Untersuchung des Lipidmetabolismus und zur Rückgewinnung von ER-Membran und -Lumenproteinen verwendet werden. Das Kit wurde mit Rattenleber, -niere und -hirn, Mäuseleber, Kaninchenleber, -niere, -milz, -herz und -hirn sowie Jurkat- und HeLa-Zelllinien geprüft.
Das Isolierungskit für das endoplasmatische Retikulum wird für die wirksame Anreicherung von funktionsfähigem endoplasmatischem Retikulum (ER) aus Säugetiergewebe oder Zellkultur eingesetzt. Das isolierte ER ist nützlich für die Proteinsynthese und den Proteinabbau sowie die Analyse von Stoffwechselwegen. Metabolische Anomalien von ER sind unter anderem ein Carnitinacetyltransferase-Mangel bei Kindern, Mukoviszidose und viele weitere ER-Proteinretentionsstörungen. Geeignet für bis zu 50 g Gewebe oder ~20 mL gepacktes Gewebe.
Features and Benefits
- Speziell formulierte Extraktionsreagenzien für Anwendungen im Forschungsmaßstab – spart Zeit und minimiert Abfälle
- Enthält eine Calciumchloridlösung – für eine schnelle und einfache Ausfällung von rauen ER ohne Erfordernis einer Ultrazentrifugierung
- Erzeugt funktionsfähige, intakte Organellen – führt zu ER, die sich für Funktionsstudien, Lipidmetabolismus und Proteinprofilerstellung eignen
- Kompatibel mit Produkten zur Strukturbestätigung – einfache Bestätigung der Unversehrtheit mit einem Begleitkit-Test auf Cytochrom-C-Reduktase (CY0100).
- Kann zur Isolation von ER aus tierischem Weichgewebe und kultivierten Zellen eingesetzt werden.
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| technique(s) fractionation: suitable | technique(s) - | technique(s) DNA purification: suitable | technique(s) DNA purification: suitable |
| Quality Level 200 | Quality Level 200 | Quality Level 200 | Quality Level 200 |
| storage temp. 2-8°C | storage temp. 2-8°C | storage temp. 15-25°C | storage temp. 15-25°C |
Lagerklasse
10 - Combustible liquids
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Does the Endoplasmic Reticulum (ER) obtained with the Endoplasmic Reticulum Isolation kit contain membrane proteins and peripheral membrane proteins?
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What level of purity of endoplasmic reticulum (ER) can be anticipated when utilizing the Endoplasmic Reticulum Isolation kit with low, medium, or ultra centrifugation?
1 answer-
When using low and medium-speed centrifugation steps, the resulting preparations are generally expected to be crude. To achieve an expectation of purity, it is advisable to follow the ultracentrifugal procedure. Notably, during quality control, no specific purity specifications were found. The Specification Sheet merely indicates that the kit must be suitable. Purity levels may fluctuate based on factors such as tissue type, specimen age, and other variables. If there are concerns about mitochondrial or other impurities, it would be prudent to test for mitochondrial markers in the collected ER fraction. Additionally, the level of purity is likely to vary depending on the carefulness with which the different fractions are collected.
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