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A2547

Anti-α-Smooth Muscle Actin (ACTA2) Antibody,

mouse monoclonal, 1A4

Synonym(e):

SMA

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Über diesen Artikel

UNSPSC Code:
12352203
NACRES:
NA.41
Conjugate:
unconjugated
Clone:
1A4, monoclonal
Application:
IF, IHC (f), IHC (p), WB
Citations:
2586

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Produktname

Monoklonaler Anti-Aktin-Antikörper , α-Glattmuskel, clone 1A4, ascites fluid

biological source

mouse

Quality Segment

conjugate

unconjugated

antibody form

ascites fluid

antibody product type

primary antibodies

clone

1A4, monoclonal

mol wt

antigen ~42 kDa

contains

15 mM sodium azide

species reactivity

human, mouse, rat, chicken, frog, canine, rabbit, guinea pig, goat, bovine, sheep, snake

technique(s)

immunohistochemistry (formalin-fixed, paraffin-embedded sections): suitable using smooth muscle cells, immunohistochemistry (frozen sections): suitable using smooth muscle cells, indirect immunofluorescence: 1:400 using blood vessels in sections of human appendix, western blot: suitable using smooth muscle cells

isotype

IgG2a

UniProt accession no.

application(s)

research pathology

shipped in

dry ice

storage temp.

−20°C

target post-translational modification

unmodified

Gene Information

human ... ACTA2(59)
mouse ... Acta2(11475)
rat ... Acta2(81633)

General description

Actine sind Proteine des Zytoskeletts, die die Zellmotilität regulieren. Mehrere Gerüst-, Signal- und actinbindende Proteine regulieren die gegenseitige Umwandlung von filamentösen F-Actinen und monomeren G-Actinen. Zelluläre Actine verschiedener Spezies weisen sehr ähnliche immunologische und physikalische Eigenschaften auf. Der Einsatz monoklonaler Antikörper stellt daher ein spezifisches und nützliches Hilfsmittel zur Untersuchung der Lokalisierung, Struktur und Funktion von Actin-Proteinen bereit. Actin 2 (ACTA2), das Glattmuskelactin, ist auf dem humanen Chromosom 10q23.31 codiert.
Der monoklonale Anti-α-Glattmuskelactin-Antikörper der Maus bindet an Actin der Spezies Mensch, Maus, Ratte, Rind, Huhn, Frosch, Ziege, Meerschweinchen, Kaninchen, Hund, Schaf und Schlange.
Der monoklonale Anti-α-Glattmuskelactin-Antikörper (Maus-IgG2a-Isotyp) stammt aus dem Hybridom, das durch die Fusion von Maus-Myelomzellen und Milzzellen einer immunisierten Maus hergestellt wurde. Das NH2-terminale synthetische Decapeptid α-Glattmuskelactin, gekoppelt an Schlitzschnecken-Hämocyanin (HLH), wurde als Immunogen verwendet. Der Isotyp wird mit dem Sigma ImmunotypeTM Kit (Sigma Warennr. ISO-1) und einem Doppeldiffusions-Immunoassay unter Anwendung von monoklonalen Mausantikörper-Isotypisierungsreagenzien (Sigma Warennr. ISO-2) bestimmt.
Der Antikörper (auch als Anti-α-Sm-1 bekannt) ist spezifisch für die α-Isoform des Glattmuskelaktins. Er reagiert spezifisch mit α-Glattmuskelaktin in Immunblotting-Assays und markiert glatte Muskelzellen in gefrorenen oder Formalin-fixierten Paraffin-eingebetteten Gewebeschnitten.

Immunogen

N-terminales synthetisches Decapeptid von α-Glattmuskelaktin.

Application

Der monoklonale Anti-α-Glattmuskelactin-Antikörper wird für Western-Blot-Assays unter Anwendung ganzer Nierenhomogenate in humanen anaplastischen Schilddrüsenkrebszellen eingesetzt. Das Produkt wird außerdem für immunhistochemische Assays unter Anwendung von Mausgewebeschnitten in Leberschnitten und Uterusschnitten eingesetzt.
Der monoklonale Anti-α-Glattmuskelactin-Antikörper wird zum Nachweis von Actin 2 in Brustfibroblasten mittels Immunfluoreszenzfärbung eingesetzt.
Glatte Muskelzellen boviner Aorten werden unter Verwendung des monoklonalen Anti-ACTA2-Antikörpers immunzytochemisch untersucht. Die Zellen werden zunächst auf Deckgläsern gezüchtet und 10 Minuten bei 4 Grad in 50 % Aceton/EtOH fixiert.
Paraffinschnitte von Rattenhoden-Gewebetransplantaten werden immunhistochemisch mit monoklonalen Maus-Antikörpern gegen Glattmuskelaktin gefärbt.
Zur Identifizierung von Myofibroblasten wird X-Gal-gefärbtes Maus-Herzgewebe unter Anwendung des monoklonalen Maus-Primärantikörpers gegen Glattmuskelaktin immunhistochemisch untersucht.

Biochem/physiol Actions

Actin ist eines der am stärksten konservierten eukaryotischen Proteine und wird in Säugetieren und Vögeln in sechs Isoformen exprimiert, die durch Elektrophorese und Aminosäuresequenzanalyse charakterisiert werden. Vier der sechs Isoformen sind die Differenzierungsmarker von Muskelgewebe. Die Actinisoformen weisen insgesamt >90 % Sequenzhomologie auf, zeigen aber nur 50–60 % Homologie in ihren NH2-terminalen Resten. Die NH2-terminale Actinregion scheint eine Haupt-Antigenregion zu sein und ist möglicherweise an der Interaktion von Actin mit anderen Proteinen wie Myosin beteiligt. Es wurde gezeigt, dass das relative Verhältnis von Actinisoformen in der Glattmuskulatur verschiedener Organe unterschiedlich ist und sich innerhalb der gleichen Population von Glattmuskelzellen während der Entwicklung, in pathologischen Situationen und unter unterschiedlichen Kulturbedingungen verändert.
Alpha-Actin-2-Mutationen werden mit Funktionsstörungen der glatten Muskeln in Arterien assoziiert und mit koronarer Herzkrankheit in Verbindung gebracht. Mutationen auf ACTA2 tragen zur Dissektion und Erweiterung der Aorta bei thorakalen Aortenaneurysmen (TAAD) bei.
Der monoklonale Anti-α-Glattmuskelactin-Antikörper ist spezifisch für die Isoform α-Actin. Er reagiert spezifisch mit α-Glattmuskelactin unter Anwendung von Immunblots und indirekter Immunfluoreszenzmarkierung von Formalin-fixierten Paraffinschnitten oder gefrorenen Gewebeschnitten. Der Antikörper kann zur immunzytochemischen Lokalisierung des α-Glattmuskelactins mittels Immunperoxidase-, Immunfluoreszenz-, ELISA- oder Immunblot-Methoden eingesetzt werden. Der Antikörper reagiert mit den Spezies Mensch, Maus, Ratte, Rind, Huhn, Frosch, Ziege, Meerschweinchen, Kaninchen, Hund, Schaf und Schlange.

Physical form

Der Antikörper wird als Aszitesflüssigkeit mit 15 mM Natriumazid als Konservierungsmittel geliefert.

Preparation Note

Für regelmäßige Verwendung bei 2-8 °C bis zu 1 Monat aufbewahren. Zur langfristigen Aufbewahrung kann die Lösung in Arbeitsaliquoten eingefroren werden. Wiederholtes Einfrieren und Auftauen wird nicht empfohlen. Falls nach längerer Lagerung eine leichte Trübung eingetreten ist, die Lösung vor Gebrauch durch Zentrifugieren klären.

Disclaimer

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

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Gene Information

human ... ACTA2(59)
mouse ... Acta2(11475)
rat ... Acta2(81633)

Gene Information

human ... ACTA2(59)
mouse ... Acta2(11475)
rat ... Acta2(81633)

Gene Information

human ... ACTN2(88)
mouse ... Actn2(11472)
rat ... Actn2(291245)

Gene Information

human ... ACTA2(59)
mouse ... Acta2(11475)
rat ... Acta2(81633)

biological source

mouse

biological source

mouse

biological source

mouse

biological source

mouse

species reactivity

human, mouse, rat, chicken, frog, canine, rabbit, guinea pig, goat, bovine, sheep, snake

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human, mouse, rat, chicken, frog, canine, rabbit, guinea pig, goat, bovine, sheep, snake

species reactivity

mouse, human, frog, pig, feline, chicken, hamster, canine, bovine, fish, snake, rabbit, sheep, goat, rat, lizard

species reactivity

human, mouse, rat, chicken, frog, canine, rabbit, guinea pig, goat, bovine, sheep, snake

antibody form

ascites fluid

antibody form

purified immunoglobulin

antibody form

ascites fluid

antibody form

purified immunoglobulin

conjugate

unconjugated

conjugate

unconjugated

conjugate

unconjugated

conjugate

CY3 conjugate


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Questions

1–9 of 9 Questions  
  1. What is the working concentration when using ab2547, Monoclonal Anti-Actin, α-Smooth Muscle antibody, as a primary antibody in Western blot?

    1 answer
    1. For the initial working concentration in a Western blot, a 1:400 dilution for this antibody is considered optimal.

      Helpful?

  2. Does this antibody work for IF staining of cultured cells on a cover slip? What secondary would you recommend?

    1 answer
    1. We do not test this product for IF on cells. However, it has been used in this application. You can use a secondary antibody like Product No. Anti-Mouse IgG (Fab specific)-FITC antibody produced in goat.

      Helpful?

  3. Which is the suggested concentration for IHC in FF tissue?

    1 answer
    1. The recommended concentration will be listed on the lot-specific Certificate of Analysis. For example, lot 0000221557 has an optimum concentration of 1:800.
      Please see the sample Certificate of Analysis for more information: https://www.sigmaaldrich.com/certificates/sapfs/PROD/sap/certificate_pdfs/COFA/Q14/A2547-.2ML0000246371.pdf

      Helpful?

  4. What is the molecular weight of actin, Products  A2066 and A2547?

    1 answer
    1. Actin has a molecular weight of 42 kDa.

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  5. Is there a protocol for using Product A2547, Monoclonal Anti-Actin, α-Smooth Muscle antibody produced in mouse, in immunohistochemistry?

    1 answer
    1. This antibody is used in our Immunohistochemistry Kit, Product No. IMMH2.

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  6. What is the antibody concentration of Product A2547, Monoclonal Anti-Actin, α-Smooth Muscle antibody produced in mouse?

    1 answer
    1. This antibody is ascities fluid.  The amount of protein present and the amount of IgG1 present is indicated on the Lot-specific Certificate of Analysis.

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  7. Why do I have 3 bands on my western blot when using Product A2547, Monoclonal Anti-Actin, α-Smooth Muscle antibody produced in mouse?

    1 answer
    1. While actin should run as a 42 kDa band when detected by Western blotting, there are recent observations that cleavage products can be seen in cells undergoing apoptosis. Initial cleavage gives a band at 41 kDa, which may appear as a doublet on the blot. In addition, further cleavage results in a major band at 30 kDa and a small band at 14 kDa which have been shown to be cleavage products due to the action of interleukin 1 -converting enzyme. This may explain the detection of smaller bands when blotting with this antibody. This banding pattern may be detected with other actin antibodies as well. Kayalar, C., et al., Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 93:2234-2238, (1996).

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  8. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    1 answer
    1. Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.

      Helpful?

  9. Can Product A2547,  Monoclonal Anti-Actin, α-Smooth Muscle antibody detect beta actin?

    1 answer
    1. No, Product A2547,  Monoclonal Anti-Actin, α-Smooth Muscle antibody will not cross react with beta actin.

      Helpful?

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