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Merck

11796828001

Roche

High Pure PCR Template Preparation-Kit

pkg of 100 purifications, suitable for DNA extraction

Synonym(e):

DNA-Extraktion

Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise


About This Item

UNSPSC-Code:
41105500

Verwendung

sufficient for 100 purifications

Qualitätsniveau

Hersteller/Markenname

Roche

Verpackung

pkg of 100 purifications

Methode(n)

DNA extraction: suitable

Allgemeine Beschreibung

Isolierung von genomischer DNA bei geringem bis mittlerem Durchsatz.

High Pure PCR Template Preparation-Kit; Gebrauchsanweisung

Nukleinsäuren binden in Gegenwart von chaotropen Salzen (Guanidin-HCl) an Glasfaservlies. Das ermöglicht dem High Pure-Filterröhrchen eine spezifische Immobilisierung von Nukleinsäuren (sowohl DNA als auch RNA), während diese von Verunreinigungen befreit werden.

Hinweis: Im Lieferumfang ist ein spezieller Inhibitorentfernungspuffer enthalten, der die Verwendung von heparinisiertem Probenmaterial (100 U/ml Heparin) ermöglicht. Dieser Puffer sorgt für eine höhere Sensitivität und Reproduzierbarkeit von Assays, die mit der isolierten Nukleinsäure durchgeführt wurden, selbst wenn die Probe Heparin enthält.

Kapazität: Die High Pure Spin Filter-Röhrchen nehmen bis zu 700 μl Probenvolumen auf.

Anwendung

Das High Pure PCR Template Preparation-Kit reinigt Nukleinsäuren aus einer Vielzahl von Probenmaterialien, einschließlich Vollblut, kultivierten Zellen und Gewebe, auf. Die isolierten Nukleinsäuren können für folgende Anwendungen verwendet werden:
  • Long-Template PCR
  • Quantitative Echtzeit-PCR
  • SNP-Nachweis
  • Southern Blots
  • Klonierungen
Das High Pure PCR Template Preparation-Kit wurde für die Extraktion von genomischer DNA aus Vollblutproben, zervikalen Läsionsproben, Magenschleimhautgewebe und Zervixkarzinomzellen verwendet.

Leistungsmerkmale und Vorteile

Das High Pure PCR Template Preparation-Kit reinigt Nukleinsäuren aus einer Vielzahl von Probenmaterialien, einschließlich Vollblut, kultivierten Zellen und Gewebe, auf. Bakterien und Hefe müssen vor der Lyse mit Lysozym oder Lyticase speziell vorbehandelt werden.
  • Mit einem Kit, das ohne Ausfällung und ohne andere den DNA-Abbau fördernden Handhabungsschritten Verunreinigungen entfernt, kann DNA-Verlust minimiert werden.
  • Zur Rückgewinnung von DNA mit hohem Molekulargewicht (30 bis 50 kb), die für Long-Template PCR geeignet ist.
  • Erhöhte Zuverlässigkeit und Reproduzierbarkeit in nachgeschalteten Anwendungen (quantitative Echtzeit-PCR).
  • Zeitersparnis und maximale Flexibilität durch die gleichzeitige Vorbereitung mehrerer PCR-Templates.
  • Es werden auch keine schädlichen organischen Verbindungen wie Cesiumchlorid, Phenol, Chloroform und Ethidiumbromid benötigt.

Komponenten

  • Gewebelysepuffer
  • Bindungspuffer
  • Proteinase K, rekombinant, PCR-Qualität
  • Inhibitorentfernungspuffer
  • Waschpuffer
  • Elutionspuffer
  • High Pure-Filterröhrchen
  • Sammelröhrchen

Qualität

DNA wird aus 25 mg Kalbsthymus, 1 x 106 K562-Zellen und 200 μl EDTA-Vollblut isoliert. Die Ausbeute wird anhand des Außendurchmessers der Gewebe- und Zellproben ermittelt. Die Qualität der Nukleinsäuren wird mittels Expand Long Range PCR mit einem Amplifikationsprodukt von 9,3 kb für aus Zellen gewonnene DNA kontrolliert. Für menschliche Blutproben wird eine PCR mit einem LightCycler®-Instrument und Factor-V-Leiden- und CycA-Kits durchgeführt.

Prinzip

Blutzellen oder Gewebe werden durch eine kurze Inkubation mit einem speziellen Lysepuffer und Proteinase K in Gegenwart eines chaotropen Salzes wie Guanidin-HCl, das sofort alle Nukleasen inaktiviert, lysiert. Zelluläre Nukleinsäuren binden selektiv an spezielle im High Pure-Aufreinigungs-Filterröhrchen vorhandene Glasfasern. Die gebundene Nukleinsäure wird in einer Reihe von schnellen Wasch- und Schleuderschritten aufgereinigt, um kontaminierende Zellkomponenten zu entfernen. Mit einer Niedrigsalz-Elution wird die Nukleinsäure schließlich von den Glasfasern freigesetzt. Diese einfache Methode eliminiert den Bedarf an organischen Lösungsmittelextrakten und DNA-Ausfällung, wodurch viele Proben gleichzeitig schnell aufgereinigt werden können.

Rechtliche Hinweise

LightCycler is a registered trademark of Roche

Signalwort

Danger

Gefahreneinstufungen

Acute Tox. 4 - Acute Tox. 4 Oral - Eye Dam. 1 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 Inhalation - Skin Sens. 1 - STOT SE 3

Zielorgane

Respiratory system

Lagerklassenschlüssel

12 - Non Combustible Liquids

WGK

WGK 2

Flammpunkt (°F)

does not flash

Flammpunkt (°C)

does not flash


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