SCT152

Glühwürmchen-/Renilla-Dual-Luciferase-Assay

Flash-type dual luciferase assay that allows measurement of both Firefly and Renilla luciferase activity in the same sample with high sensitivity and linearity.

• Synonym(e): Firefly Luciferase Assay, Dual Luciferase Assay, Bioluminescent Assay
• NACRES: NA.54
• UNSPSC Code: 12352207

Eigenschaften

• technique(s): cell based assay: suitable
• detection method: chemiluminescent
• shipped in: ambient
• storage temp.: -65 to -96°C

Beschreibung

General description

Glühwürmchen-Luciferase wird häufig als Reporter zum Untersuchen der Genregulierung und -funktion sowie für Arzneimittelscreenings eingesetzt. Es handelt sich hierbei aufgrund der fehlenden endogenen Luciferase-Aktivität in Säugetierzellen und -gewebe um einen Genreporter mit hoher Sensitivität. Renilla-Luciferase wird in-vitro und in-vivo als Reportergen zum Untersuchen der Genregulierung und -funktion verwendet. Sie wird häufig in transkriptionalen Multiplex-Reporterassays oder als normalisierende Transfektionskontrolle für Glühwürmchen-Luciferase-Assays verwendet.

Der Glühwürmchen-/Renilla-Dual-Luciferase-Assay ermöglicht die Messung der Glühwürmchen- und Renilla-Luciferase-Aktivität in der gleichen Probe mit hoher Sensitivität und Linearität. Zunächst wird die Glühwürmchen-Luciferase-Aktivität gemessen, dann wird Renilla-Luciferase-Assaypuffer 2.0 zugegeben, um die Aktivität der Glühwürmchen-Luciferase zu dämpfen und gleichzeitig die Renilla-Luciferase-Aktivität zu messen. Renilla-Luciferase-Assaypuffer 2.0 dämpft die Glühwürmchen-Luciferase-Aktivität auf das Niveau von untransfizierten Zellen, wodurch die sequenzielle Messung der Glühwürmchen- und Renilla-Luciferase-Aktivität in der gleichen Probe ermöglicht wird. Bei diesem Flash-Type-Assay muss die Lumineszenz umgehend nach Zugabe der Detektionsreagenzien zur Luciferase-Probe gemessen werden. Das Glühwürmchen-Signal zerfällt innerhalb von ca. 12 Minuten, und das Renilla-Signal innerhalb von ca. 2 Minuten, was jedoch je nach Enzymgehalt variieren kann.

Application

Der Flash-Type Dual-Luciferase-Assay ermöglicht die Messung der Glühwürmchen- und Renilla-Luciferase-Aktivität in der gleichen Probe mit hoher Sensitivität und Linearität.

Forschungskategorie
Zellsignalwege

Forschungsunterkategorie
Farbstoff für lebende Zellen

Glühwürmchen-Luciferase-Assay

Physical form

Flüssig

Preparation Note

Den Glühwürmchen-/Renilla-Dual-Luciferase-Assay bei -80 °C aufbewahren. Glühwürmchen- und Renilla-Assaypuffer sind bei -80 °C ab Empfangsdatum mindestens sechs Monate haltbar. Die anderen Komponenten sind bei maximal -20 °C ab Empfangsdatum mindestens sechs Monate haltbar. Die Kitkomponenten und Stammlösungen von D-Luciferin und Aquaphile Coelenterazin in Wasser sind mindestens 5 Einfrier-/Auftauzyklen lang haltbar.

Other Notes

1) 1X Passiver Luciferase-Lysepuffer 2.0 (CS224514): 15 ml

2) Glühwürmchen-Luciferase-Assaypuffer 2.0 (CS224591): 15 ml

3) D-Luciferin (CS224551): 3 x 1 mg

4) Renilla-Luciferase-Assaypuffer 2.0 (CS224580): 15 ml

5) Aquaphile Coelenterazin (CS224581): 3 x 200 µg

Disclaimer

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 10 - Combustible liquids