Yes, a suitable chromogenic substrate for the enzyme associated with product number P6556 is the S7388, N-Succinyl-Ala-Ala-Pro-Phe p-nitroanilide.
P6556
Protéinase K from Tritirachium album
lyophilized powder, ≥30 units/mg protein
Synonyme(s) :
Endopeptidase K
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About This Item
Numéro CAS:
Numéro CE :
Numéro MDL:
Code UNSPSC :
12352204
eCl@ss :
32160410
Nomenclature NACRES :
NA.54
Le tarif et la disponibilité ne sont pas disponibles actuellement.
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Forme
lyophilized powder
Niveau de qualité
Activité spécifique
≥30 units/mg protein
Poids mol.
28.93 kDa
Technique(s)
DNA extraction: suitable
Solubilité
H2O: soluble 1 mg/mL, clear, colorless
Activité étrangère
Dnase ≤30 Kunitz units/mg solid
RNase ≤0.003 Kunitz units/mg solid
Conditions d'expédition
wet ice
Température de stockage
−20°C
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Application
La protéinase K est utile pour l′inactivation protéolytique des nucléases lors de l′isolement de l′ADN et de l′ARN.
Elle est utilisée pour l′élimination des endotoxines liées aux protéines cationiques telles que le lysozyme et la ribonucléase A.
Elle est utile pour l′isolement des mitochondries hépatiques, de levure et de haricot mungo
et elle est utilisée pour la détermination de la localisation des enzymes sur les membranes.
On l′utilise pour le traitement des coupes de tissus incluses en paraffine pour exposer les sites de liaison à l′antigène pour le marquage par anticorps et
pour la digestion des protéines des échantillons de tissu cérébral pour la recherche sur les prions responsables des encéphalopathies spongiformes transmissibles (EST). Le produit P6556 est fourni sous forme de poudre lyophilisée. Le produit P6556 a été utilisé pour dégrader la protéine de cristallin humain[1]
Elle est utilisée pour l′élimination des endotoxines liées aux protéines cationiques telles que le lysozyme et la ribonucléase A.
Elle est utile pour l′isolement des mitochondries hépatiques, de levure et de haricot mungo
et elle est utilisée pour la détermination de la localisation des enzymes sur les membranes.
On l′utilise pour le traitement des coupes de tissus incluses en paraffine pour exposer les sites de liaison à l′antigène pour le marquage par anticorps et
pour la digestion des protéines des échantillons de tissu cérébral pour la recherche sur les prions responsables des encéphalopathies spongiformes transmissibles (EST). Le produit P6556 est fourni sous forme de poudre lyophilisée. Le produit P6556 a été utilisé pour dégrader la protéine de cristallin humain[1]
Le produit P6556 est fourni sous forme de poudre lyophilisée. Le produit P6556 a été utilisé pour dégrader la protéine de cristallin humain[1] Les essais de « footprinting » à la protéase au moyen de la digestion par la protéinase K peuvent révéler des interactions de surface entre protéines.[2] L′enzyme proposée par Sigma a été utilisée dans l′étape de pré-hybridation des embryons de poule.[3] Elle a également été employée pour l′enrichissement en PrPSc, une protéine de prion présente dans les échantillons de tremblante du mouton, du hamster et de la souris.[4]
Utile pour l′inactivation protéolytique des nucléases lors de l′isolement de l′ADN et de l′ARN.
Utile pour l′inactivation protéolytique des nucléases lors de l′isolement de l′ADN et de l′ARN.
Élimine les endotoxines qui se lient aux protéines cationiques telles que le lysozyme et la ribonucléase A.
S′est avéré utile pour l′isolement des mitochondries hépatiques, de levure et de haricot mungo.
Détermination de la localisation des enzymes sur les membranes.
Traitement des coupes de tissus incluses en paraffine pour exposer les sites de liaison à l′antigène pour le marquage par anticorps.
Digestion des protéines des échantillons de tissu cérébral pour la recherche sur les prions responsables des encéphalopathies spongiformes transmissibles (EST).
Élimine les endotoxines qui se lient aux protéines cationiques telles que le lysozyme et la ribonucléase A.
S′est avéré utile pour l′isolement des mitochondries hépatiques, de levure et de haricot mungo.
Détermination de la localisation des enzymes sur les membranes.
Traitement des coupes de tissus incluses en paraffine pour exposer les sites de liaison à l′antigène pour le marquage par anticorps.
Digestion des protéines des échantillons de tissu cérébral pour la recherche sur les prions responsables des encéphalopathies spongiformes transmissibles (EST).
Actions biochimiques/physiologiques
La protéinase K est une sérine protéase très stable et hautement réactive. Des études de cristallographie et de structure moléculaires ont indiqué que cette enzyme appartient à la famille des subtilisines, présentant une triade catalytique au site actif (Asp39-His69-Ser224). Elle est stable dans un vaste éventail d′environnements : pH, sels de tampon, détergents (SDS) et température. En présence de 0,1 à 0,5 % de SDS, la protéinase K reste active et peut digérer diverses protéines et nucléases dans les préparations d′ADN, sans compromettre l′intégrité de l′ADN isolé.
La protéinase K présente une large gamme de spécificité et dégrade de nombreuses protéines, même dans leur forme native. Elle coupe principalement les liaisons peptidiques au niveau du groupe carboxyle des acides aminés aliphatiques et aromatiques comportant des groupes α-aminés bloqués.[4][5][6] Le pH optimal se situe entre 7,5 et 9,0 et le point isoélectrique est 8,9[4] Ca2+ (1-5 mM)est requis pour l′activation. La protéinase K est inhibée par le diisopropyl fluorophosphate (DIFP) et le fluorure de phényl méthyl sulfonyle (PMSF).[5]
Définition de l'unité
Une unité hydrolyse l′hémoglobine dénaturée par l′urée et produit une couleur équivalente à 1,0 μmole de tyrosine par min à pH 7,5 et à 37 °C (couleur obtenue avec le réactif de Folin-Ciocalteu).
Souvent commandé avec ce produit
Réf. du produit
Description
Tarif
Mention d'avertissement
Danger
Mentions de danger
Conseils de prudence
Classification des risques
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
Organes cibles
Respiratory system
Code de la classe de stockage
11 - Combustible Solids
Classe de danger pour l'eau (WGK)
WGK 1
Point d'éclair (°F)
Not applicable
Point d'éclair (°C)
Not applicable
Équipement de protection individuelle
dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves
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M.M. Burrell
Methods in Molecular Biology, 16, 307-307 (1993)
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Is there a chromogenic substrate available for product number P6556?
1 answer-
Helpful?
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How can I activate the proteinase K? I need it for a protease assay
1 answer-
Product P6556, Proteinase K, is activated by 0.5 % SDS or 6 M urea.
Helpful?
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Is your "Proteinase K from Tritirachium album" actually isolated from Tritirachium album cultures, or the gene cloned, over-expressed in some bacterium and the Proteinase K isolated from the bacterial cell lysate?
1 answer-
This product is isolated from Tritirachium album culture.
Please see the sample Certificate of Origin below:
https://www.sigmaaldrich.com/certificates/sapfs/PROD/sap/certificate_pdfs/COO/Q12/P6556-1G0000137404.pdfHelpful?
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