合格細胞選擇與大腸桿菌標記指南

我們提供一系列的 大腸桿菌 細菌細胞，透過針對每個菌株的最佳化程序製造出最高效率的合格細胞。從 24 種新的合格細胞中選擇適合各種應用的細胞，包括蛋白質表達、常規或難度較高的克隆以及文庫生成。提供多種試用尺寸。

表 1. 合格細胞

產品編號	CMC0001。	≥ 1 × 108	F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK rpsL nupG λ- tonA	Y
用於蛋白質表達和 DNA 質粒生產	CMC0002	SIG10 F' 化學強化細胞	[F´ pro A+B+ lacIqZΔM15：:Tn10 (TetR)] /mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK rpsL nupGλ tonA	Y
CMC0003	SIG10高電容細胞	≥ 5 × 109	F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ(ara,leu)7697galU galK rpsL nupG λ- tonA (StrR)<	Y
用於蛋白質的表達和DNA質粒的生產	CMC0004	≥ 2 × 1010	F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ(ara,leu)7697galU galK rpsL nupG λ- tonA (StrR)	Y
用於一般的克隆& 文庫生產	CMC0005	SIG10 F' MAX Electrocompetent Cells	≥ 2 × 1010	[F´ pro A+B+ lacIqZΔM15：:Tn10 (TetR)] /mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK rpsL nupG λ- tonA (StrR)	Y
CMC0006	SIG10 ULTRA Electrocompetent Cells<	≥ 4 × 1010	F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ(ara,leu)7697galU galK rpsL nupG λ- tonA (StrR)	Y
CMC0007	SIG10 5a 化學修復細胞	≥ 1 × 108	fhuA2Δ(argF-lacZ)U169 phoA glnV44 Φ80 Δ(lacZ)M15 gyrA96 recA1 relA1 endA1 thi-1 hsdR17	Y
for plasmid production using unstable DNA<	CMC0008	STEADY 化學適應性細胞	> 1 × 107	recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(StrR) xyl-5 λ- leu mtl-1 F-mcrB mrr hsdS20(rB-, mB-)	N
CMC0009	STEADY Electrocompetent Cells	> 1 × 107	recA13 supE44 ara-14 galK2 lacY1 proA2 rpsL20(StrR) xyl-5 λ- leu mtl-1 F- mcrB mrr hsdS20(rB-, mB-)	N
製造含尿嘧啶的 DNA 用於誘變	CMC0010	變異電泳細胞	[F'Tra+ Pil+ (CamR)] ung-1 relA1 dut-1 thi-1 spoT1 mcrA	N
CMC0011	XLDNA V2 Electrocompetent cells	≥ 1 × 1010	F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ(ara,leu)7697 galUgalK rpsL nupG (attL araC-PBAD-trfA250 bla attR) λ-	Y
for BAC & cosmid cloning	CMC0012<	≥ 1 × 1010	F - pro A+B+ lacIqZΔM15：:Tn10(TetR)]。/mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 Φ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ(ara, leu)7697 galU galK rpsL nupG λ- tonA (StrR)	N
用於生產生物素化蛋白質	CMC0013	BIOTINYLATER F' Electrocompetent Cells	>1 ×1010	MC1061 [F´ pro A+B+ lacIqZΔM15：:Tn10 (TetR)] araD139 ∆(ara-leu)7696 ∆(lac)l74 galU galK hsdR2(rΚ- mΚ+) mcrB1 rpsL (StrR) birA	N
CMC0014	≥ 1 × 107	F - ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)	N
用於蛋白質表達	CMC0015	BL21(DE3) pLysE Chemically Competent Cells	BL21(DE3) pLysE Chemically Competent Cells	≥ 1 × 107	F - ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)	N
CMC0016	BL21(DE3) Electrocompetent Cells	≥ 5 x 109	F - ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)	N
CMC0017	OverExpress C41(DE3) Chemically Competent Cells	≥ 1 × 106	F - ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)	N
以獲得最高的蛋白質表達量	CMC0018	OverExpress C41(DE3) pLysS 化學強化細胞	≥ 1 × 106	F -ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3) pLysS (CmR)	N
獲得最高蛋白質表達	CMC0019	OverExpress C43(DE3) Chemically Competent Cells	≥ 1 × 106	F - ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)	N
CMC0020	OverExpress C43(DE3) pLysS Chemically Competent Cells	≥ 1 × 106	F - ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3) pLysS (CmR)	N
CMC0021	OverExpress C41(DE3) Electrocompetent Cells	≥ 1 × 109	F - ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)	N
CMC0022	OverExpress C43(DE3) Electrocompetent Cells	≥ 1 × 109	F - ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3)	N
用於控制蛋白質的表達	CMC0023	CONTROLLER SIG10 化學強化細胞	> 1 × 109	mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) endA1 recA1 ɸ80dlacZΔM15 ΔlacX74 araD139 Δ (ara,leu)7697 galU galK rpsL (StrR) nupG λ- tonA Mini-F lacIq1 (GentR)	N
CMC0024	> 1 × 107	F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm (DE3) Mini-F lacIq1(GentR)	N

表 2. 大腸桿菌標記指南

E.大腸桿菌標記	描述
dam	甲基化 GATC 位點的 A。Dam 甲基化模式用來區分舊的（甲基化的）和新的（未甲基化的）鏈，以達到損害修復的目的（修復未甲基化的鏈）。水壩甲基化也用來計算複製時間（在兩條鏈都有水壩甲基化之前不要複製）。這種甲基化會干擾幾種限制性酵素，包括 BclI 和 ClaI。
dcm	甲基化 CCWGG。
dnaJ	合子蛋白。突變體可以穩定大腸桿菌中的某些蛋白質。
dut	dUTPase，一種透過破壞 dUTP 來防止尿嘧啶納入 DNA 的酵素。
e14	一種類似噬菌體的元件，存在於 K-12 中，但在許多衍生物中缺失。
e14	大腸桿菌中含有類phage元件，但許多衍生物中都沒有。e14帶有mcrA基因，所以e14-菌株是McrA-。
F	一個可自我傳播的質粒 (100 kb)，它賦予大腸桿菌製造絨毛膜的能力 (也就是說，大腸桿菌是雄性的"雌性的")。
F'	一個 F 質粒，它從大腸桿菌 (E. coli) 拾取一些染色體 DNA。F' 可以有自己的基因型。兩個流行的模型編碼為 lacβ peptide (ΔM15)，或 LacIQ.
hsdRSM	限制系統，在特定的序列中使宿主 DNA 甲基化，並劈開未被甲基化的 DNA。R 基因是內切酶，M 基因是甲基化酶，而 S 基因是每個基因發揮功能的必要條件。因此，hsdR突變體沒有內切酶功能，但仍會甲基化。HsdS 突变体没有内切酶或甲基化酶。兩個流行的模型是大腸桿菌 K系統和大腸桿菌 B系統。
lacIQ	過度產生 lacI 基因產品，是 lac 操作子的抑制因子。
lacY	乳糖滲透酶。LacY 突变体不能用于蓝/白筛选，但在 IPTG 诱导的基因表达中用于调节基因表达。
lacZ	β-半乳糖苷酶基因。Δ(lacZ)M15 突变表达 β 片段。這常見於 F'元件上或有缺陷的 80 φ 原體中。許多質粒會表達 α 片段。
Δlac	有三種常見的缺失，除了一些側翼 DNA 外，還涉及整個 lacZYA 操作子：ΔU169、ΔX111 和 ΔX74。
Ion	一種蛋白酶，負責降解異常蛋白質，並關閉 sulA 的功能。
mal B	malB區域包含基因malEFG和malK lamB malM，Δ（malB）會刪除這整個區域的大部分或全部。LamB是λ噬菌體的受體。
mcr A	在某些序列中限制含有甲基辛酸的DNA。
mcr BC	限制某些序列中含有甲基胞嘧啶的 DNA。 Δ(mcrC-mrr)  刪除六個基因： mcrC-mcrB-hsdS-hsdM-hsdR-mrr
mrr	甲基胞嘧啶和甲基腺嘌呤限制系統。
recA	大部分同源重組途徑所需。重組缺陷。
recC	為 ExoV 功能所必需。
recD	為 ExoV 功能所必需。
recF	質粒間同源重組所需的重組基因。
recJ	質粒間同源重組所需的重組基因。
rpoH	（或 htpR 熱震轉錄因子）表達某些熱震蛋白酶所需的基因。帶有 recB recC 和 sbcB 的品系通常也是 sbc。這些四重突變株具有重組能力，並在 λ 中繁殖倒置重複，但質粒複製有異常。sbcC突變體是Rec+，並在質粒中穩定地繁殖倒置重複。
supE	（或glnV）突變體tRNA在UAG編碼子插入谷氨酰胺，抑制閱讀框中的UAG突變。某些噬菌體突變體的溶菌生長需要 SupE。
supF	（或 tyrT）突變體 tRNA 在 UAG 編碼子上插入酪氨酸，因此抑制閱讀框中 UAG 突变的影響。某些 λ 噬菌體，例如 λgt11 的溶菌生長需要此突變。
traD	F 質粒的結合缺陷突變體。
ung	尿嘧啶 N-糖基化酶（uracil N-glycosylase）的突變體，這是一種從 DNA 中移除尿嘧啶的酵素。ung突變體允許尿嘧啶在DNA中持續存在。
φ80dlacΔM15	溶酶原為φ80的缺陷原體衍生物。lacZ ΔM15等位基因提供藍白篩選的β肽。