DNA / 蛋白質電泳和故障排除表

• 在聚丙烯酰胺凝膠中分離 DNA 的有效範圍
• 琼脂糖凝膠中 DNA 分離的有效範圍
  
• DNA Size Migration of Sample Loading Dyes
  
• 樣品載入染料的DNA尺寸遷移
  

在聚丙烯酰胺凝膠中分離 DNA 的有效範圍

。

% Acrylamide (w/v)1	有效分離範圍 (bp)
3.5	1000-2000
5.0	80-500
8.0	60-400
12.0	40-200
15.0	25-150
20.0	6-100
1 N,N'-亞甲基二丙烯酰胺以丙烯酰胺 1/30 的濃度加入。

Effective Range of Separation of DNA in Agarose Gels

琼脂糖凝膠中 DNA 的有效分離範圍

分離 線性 DNA 分子的有效範圍 (kb)
0.3	5-60
0.6	1-20
0.7	0.8-10
0.9	0.5-7
1.2	0.4-6
1.5	0.2-3
2.0	0.1-2

DNA Size Migration of Sample Loading Dyes

Xylene Cyanole	Bromophenol Blue
0.1-1.5	4-5 kb	400-500 bp
2.0-3.0（篩選瓊脂糖）	750 bp	100 bp
4.0-5.0（篩選瓊脂糖）	125 bp	25 bp

Troubleshooting Guide for SDS-PAGE Protein Electrophoresis

Faint or missing protein bands	加載量低於染色檢測水平	檢查A280並增加樣品濃度
		使用更敏感的染色劑 (e...g.
		蛋白未固定在凝膠中	Use a stain which also fixes the proteins
				用5%戊二醛固定凝胶。染色前用水充分沖洗凝膠
	檢查A280
	使用更高浓度的 PAGE 凝胶。請參閱預制凝膠的建議凝膠濃度，如果大小未知，請使用 4-20% 的凝膠
染色後凝膠上的薄膜	Precipitated Coomassie Blue R	在甲醇中沖洗凝膠15秒，並立即回到水中或去漬
Poor band resolution	每種蛋白負載10 μg或每種蛋白提取物負載100 μg<
	凝膠的老化，由於基地催化		適當的凝膠濃度	建議的凝膠濃度請參閱預先製備的凝膠，如果尺寸未知，請使用4-20%的凝膠
高鹽濃度		每種蛋白負載 10 μg 或每種蛋白提取物負載 100 μ
	蛋白質聚集	電壓偏高	孔中蛋白沉澱	加入 4-8 M 尿素
SDS 沉淀	可能是由於樣品中含有胍鹽或鉀鹽所致