最近在組織病理學中最有影響力的趨勢之一,就是新的組織清除方法在顯微鏡和高含量應用中的普及。這些技術藉由調和細胞成分不匹配的折射率,使組織變得透明,進而能對完整的生物結構進行真正的 3D 顯微分析,而非現行需要費力製備和分析個別影像切片的方法。頂尖的研究人員已利用組織清除的力量來解決神經科學、癌症生物學及發育生物學等前沿領域的關鍵問題。目前有多種組織清除方法可供使用,了解水性和溶劑型方法如何影響資料輸出、檢測工作流程和組織標本本身非常重要。我們與 Visikol® 合作提供 HISTO™ 和 HISTO-M™ 試劑,可用來輕鬆且可逆地清除組織或 3D 細胞培養物,同時保留樣本完整性以利下游分析。
圖 1.Visikol® Histo™ 試劑組織清除
圖 2.A、B。使用 Visikol 方法進行組織清除前(左)和後(右)的精密切割肺切片 用 Calcein AM、DAPI 和 PI 染色的 HepG2 球形體。
HISTO™ 組織清除法的可逆性
左側面板:清除後的大鼠大腦
右側面板:逆轉後恢復的組織不透明度。
以 SYTOX 綠染色的細胞核;A) 未清除的球體;B) 清除的球體;Z 投影以白色勾勒。Z 投影掩蓋了非清除微組織成像的難度,因為 Z 投影掩蓋了成像中發生的黯影。已清除的微組織不會出現黯淡現象,而內部細胞則清晰可見。CellProfiler 在 InSphero NCI-H2170 肺癌微組織中以 100 nM cisplatin 處理後偵測到的細胞輪廓。20 µm 光學切片(20-120 um)從左至右顯示 A) 未清潔的微組織和 B) 使用 Visikol® HISTO-M™ 清潔的微組織;C) A) 和 B) 清潔和未清潔的微組織中每個 Z 平面的細胞數量。在已清除的微組織中,每個 Z 平面可檢測到的細胞數量要多得多。
Visikol® HISTO™ 用於藥物發現
順铂處理的NCI-H2170微組織的抗增殖劑量反應曲線A)相對於載體對照的細胞增殖分數;B)顯示絕對的Ki67%增殖分數。
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