原代人骨骼肌細胞和生長培養基

這些產品在美國、加拿大和部分歐洲國家有售。

• 骨骼肌細胞培養系統
• 原代骨骼肌細胞培養材料

骨骼肌細胞培養系統

新的骨骼肌細胞起源於靜止衛星細胞，衛星細胞存在於肌纖維的基底層和肌壁之間。靜止的衛星細胞受到肌肉損傷等刺激而活化。活化後的細胞（現在稱為肌母細胞）開始增殖，並與受損的肌肉纖維融合或彼此融合，形成新的肌管。在研究肌肉損傷時，原代人類骨骼肌細胞 (SkMC) 已被證實有助於闡明肌肉再生和分化的機制，以及神經肌肉失調和疾病的建模。

PromoCell^® 原代人骨骼肌細胞是由來自不同部位的正常人骨骼肌組織製成，包括胸大肌或臀大肌（可索取批次的具體來源資訊）。這些細胞可使用 PromoCell^® Skeletal Muscle Cell Differentiation Medium 誘導分化成多核合胞。在分離後不久，所有的人體骨骼肌細胞都會使用專利的無血清冷凍培養基 Cryo-SFM (C-29910)，在第 2 階段 (P2) 進行冷凍保存。解凍後每個冷凍瓶至少含有 500,000 個存活細胞。人骨骼肌細胞也可以由冷凍保存的細胞經解凍和培養三天後所產生的增殖細胞培養物形式提供。

• Cultivation Protocol for Human Skeletal Muscle Cells

Differentiation Protocol for Human Skeletal Muscle Cells (see below)

Skeletal Muscle Cell Growth Medium（骨骼肌細胞生長培養基）是專為擴大人體骨骼肌細胞培養而開發的低血清培養基。骨骼肌細胞分化培養基是一種無血清培養基，用於誘導骨骼肌細胞融合成具有典型多核合胞體的肌管。這些培養基最適合用於人類原代細胞的生長，但也可用於鼠、大鼠、犬和兔的骨骼肌細胞：骨骼肌細胞生長培養基有兩種形式：「即用型」或「試劑包」。即用型 "選項包括一瓶 500 mL 的基礎培養基和一小瓶的 SupplementMix。骨骼肌細胞生長培養基套件包括一瓶 500 mL 的基礎培養基和 SupplementPack（一套含有預先測量好的補充劑的獨立小瓶），讓使用者完全控制培養基配方。將 SupplementMix 或 SupplementPack 加入基礎培養基，即可製備完整的骨骼肌細胞培養基。基礎培養基（含或不含酚紅）、SupplementMix 和 SupplementPack 也可單獨購買。

骨骼肌細胞培養基的補充劑詳情

骨骼肌細胞生長培養基含有人體骨骼肌細胞最佳生長所需的所有生長因子和補充劑，包括表皮生長因子、基礎纖維母細胞生長因子和胰島素（表 1）。骨骼肌細胞分化培養基（Skeletal Muscle Cell Differentiation Medium）是含有胰島素的無血清培養基。這些培養基不含抗生素或抗霉菌劑，其配方適用於 5%CO₂

最終骨骼肌細胞培養基的補充劑濃度（加入培養基後）

。

元件	骨骼肌細胞 生長培養基
0.05 mL / mL	-
Fetuin (bovine)	50 μg / mL	-
-td valign="top">10 ng / mL	-
1 ng / mL	-
胰島素 (重組人)	10 μg / mL	10 μg / mL
0.4 μg / mL	-
0.

準備骨骼肌細胞培養的補充劑培養基

• 將骨骼肌細胞培養基SupplementMix或SupplementPack在15 - 25 °C解凍。
• 用移液管小心地上下混合補充劑溶液。
• 將每種補充劑的全部內容物轉移到骨骼肌細胞基礎培養基。
• 關閉瓶口並輕輕攪拌，直到混合物均勻為止。

骨骼肌細胞分化培養基的使用說明

• 分化人骨骼肌細胞（SkMC）時，細胞應在骨骼肌細胞生長培養基（Skeletal Muscle Cell Growth Medium）中培養，直到細胞達到約 60 - 80% 的融合度。
• 用骨骼肌細胞分化培養基取代生長培養基。
• 2 - 8 天後可觀察到多核合胞體的廣泛形成。
• 若要穩定分化骨骼肌細胞，在骨骼肌細胞分化培養基中培養 5 天後用骨骼肌細胞生長培養基取代。

骨骼肌細胞產品的儲存與穩定性

• 骨骼肌細胞基礎培養基抵達後，立即儲存於 4 - 8 °C 黑暗處；請勿冷凍。將骨骼肌細胞補充劑混合物（Skeletal Muscle Cell SupplementMix）或補充劑包（SupplementPack）儲存於 -20 °C。
• 如果按照指示儲存，產品在所述有效期限前是穩定的。
• 使用時，只需預熱一次所需的等分的完整骨骼肌細胞培養基，並將剩餘的培養基冷藏於 4 - 8 °C。
• 交付後，冷凍保存的細胞應保存在液氮中或 立即處理 。

原代人骨骼肌細胞培養系統質量控制

人骨骼肌細胞

每批人骨骼肌細胞都經過嚴格的品質控制 (QC) 測試。

• 細胞形態、黏附性和細胞存活率分析。
• 細胞類型特異性標記的免疫組織化學測試。
• 生長性能，在不使用抗生素和抗真菌劑的培養條件下，透過多次傳代進行測試，最高可達 15 個細胞倍數 (PD)。
• 分化潛力，以分化成多核合胞體的能力來衡量。
• 測試是否含有病毒（HIV-1、HIV-2、HBV、HCV、HTLV-1、HTLV-2）和微生物（真菌、細菌和支原體）污染物。有關安全預防措施，請參閱適當的安全資料表 (SDS)。
• 每個批次的詳細分析證書 (CoA) 可供下載。

骨骼肌細胞 (SkMC) 規格

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Product	Plating密度	Passage after thawing	標記	繁殖倍數
人骨骼肌細胞 (SkMC)<	3,500 - 7,000 cells per cm²	P2	Sarcomeric myosin+ 分化測試	> 15

肌肉細胞生長與分化培養基品質控制

所有批次的骨骼肌細胞生長培養基均使用原代人體骨骼肌細胞進行嚴格而全面的品質控制測試。每個批次的測試都會檢查促生活性、附著率和測試所用 SkMC 的典型形態。此外，骨骼肌細胞分化培養基也通過了完全誘導骨骼肌細胞分化的能力驗證。

所有批次的培養基都已通過無微生物污染物（真菌、細菌、支原體）測試。

注意：由於血清含量低或不含血清，PromoCell^®培養基不適用於以血清為基礎的胰蛋白酶中和（如在細胞亞培養時）。 我們建議使用我們的 DetachKit (C-41200, C-41210, C-41220），其中包含 HEPES BSS、Trypsin/EDTA 和 Trypsin Neutralizing Solution。

原代人骨骼肌細胞和角質形成細胞生長培養基的預期用途

原代人骨骼肌細胞和骨骼肌細胞生長培養基只能用於 體外試驗 ，不能用於診斷或治療程序。有關安全資訊，請參閱適當的 SDS。