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首頁哺乳動物細胞培養粉末培養基製備說明

粉末培養基製備說明

過濾用培養基的準備

粉狀培養基和鹽混合物具有極強的吸濕性,應防止大氣中的濕氣進入。開封後應立即使用每個包裝中的全部內容物。不建議製備濃縮形式的培養基,因為可能會形成沉澱物。補充劑可在過濾前加入,或以無菌方式導入無菌培養基。

程序

  • 量出組織培養級水最終體積的 90%。
  • 輕輕攪拌時,加入粉狀培養基或鹽混合物。攪拌至溶解。請勿加熱水。
  • 用少量水沖洗原包裝,以去除所有粉末痕跡。
  • 在溶液中,根據製備的培養基的最終容量,每升加入下表中所需的碳酸氫鈉。攪拌至溶解。
  • 攪拌時,將 pH 調至低於所需 pH 值 0.1-0.3 個 pH 單位,因為在真空過濾過程中 pH 值可能會上升。建議使用 1 N HCl 或 1 N NaOH。
  • 用組織培養級水將培養基添加到最終容量。
  • 立即使用孔隙度為 0.2 微米或更小的膜過濾消毒。
  • 無菌分裝到無菌容器中。液體培養基冷藏保存於 2-8 °C 及避光處。
  • 滲透壓會隨氯化鈉或氯化鉀的加入而改變,300 mg/L NaCl 或 400 mg/L KCl 約為 10 mOsm
碳酸氫鈉用量
材料
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