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重組細胞
expressed in E. coli
品質等級
包裝
vial of 50 μL
濃度
20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA)
啟動子
Promoter name: CMV
選擇
kanamycin
運輸包裝
dry ice
儲存溫度
−20°C
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相關類別
一般說明
Cas9表达质粒使用CMV启动子实现Cas9强瞬时表达。您可以使用MluI和NheI酶切将CMV替换为其它启动子。而且还可使用XbaI酶切将Cas9表达质粒线性化，以实现基于T7的mRNA表达。
應用
功能性基因组学/靶点验证
- 在多种细胞系中进行基因敲除
- 对不适合于RNAi的基因进行完全敲除
- 建立基因敲入细胞系，将启动子、融合标签或报告基因整合到内源性基因中
成分
1管含1µg 的Cas9质粒。
请注意，该产品不含向导RNA序列。向导RNA必须通过定制CRISPR产品选项卡单独购买。
请注意，该产品不含向导RNA序列。向导RNA必须通过定制CRISPR产品选项卡单独购买。
原則
CRISPR/Cas是细菌和古细菌的一种防御系统，可用来对抗入侵的病毒和质粒。来自酿脓链球菌的II型CRISPR/Cas系统包含两种分子元件，即一个Cas9蛋白和一个非编码向导RNA（gRNA），该系统经过基因改造而被用于真核系统中。Cas9核酸内切酶可在单个gRNA的引导下，在指定基因组位置上引入DNA双链断裂（DSB）。与锌指核酸酶（ZFN）诱导的DSB相似，细胞随后会激活内源性DNA修复程序，即非同源性末端接合（NHEJ）或同源重组修复机制（HDR），对目标DSB进行修复。
外觀
Sigma Cas9 质粒DNA的产品形式是浓度为20ng/μl的50μl溶液。
準備報告
Sigma CRISPR质粒产品为小量提取包装，可能不适用于转染到特殊类型的细胞中。为得到最佳结果，我们建议在转染前使用无内毒素的DNA纯化试剂盒大量提取质粒。
其他說明
为了介导DNA双链断裂，必须与U6-gRNA质粒一起使用。
文献中使用的标准转染浓度范围为≥1.0 ug/μl且≤5 uL的Cas9质粒结合≥1.0 ug/μl且≤5 ul的U6-gRNA质粒。（上述所有浓度均假设是对0.5~1百万个细胞进行核转染）
文献中使用的标准转染浓度范围为≥1.0 ug/μl且≤5 uL的Cas9质粒结合≥1.0 ug/μl且≤5 ul的U6-gRNA质粒。（上述所有浓度均假设是对0.5~1百万个细胞进行核转染）
法律資訊
儲存類別代碼
10 - Combustible liquids
閃點（°F）
Not applicable
閃點（°C）
Not applicable
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Yan Wang et al.
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條款
Learn about CRISPR Cas9, what it is and how it works. CRISPR is a new, affordable genome editing tool enabling access to genome editing for all.
瞭解 CRISPR Cas9、它是什麼以及如何運作。CRISPR 是一種嶄新、價格合理的基因組編輯工具，可讓所有人都能進行基因組編輯。
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Sigma-Aldrich® Advanced Genomics 是基因編輯和沉默技術的領先供應商，包括 CRISPR、Cas9、合成導向 RNA (sgRNA) 和鋅指核酸酶 (ZFN)。
Sigma-Aldrich® Advanced Genomics is the leading provider of gene editing and silencing technologies including CRISPR, Cas9, synthetic guide RNA (sgRNA), and Zinc Finger Nuclease (ZFN).
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