生物源
human
品質等級
重組細胞
expressed in Chem-1 cells
製造商/商標名
ChemiScreen
Chemicon®
技術
ligand binding assay: suitable (GTPγS)
radioligand binding assay (RLBA): suitable
NCBI登錄號
UniProt登錄號
運輸包裝
dry ice
一般說明
人CRTH2
在Th2细胞上表达的趋化因子受体同源分子(CRTH2)是与在Th2细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱性粒细胞和2型细胞毒性T细胞上高度表达的FPR样趋化因子受体相关的GPCR(Nagata et al., 1999)。 CRTH2最有效的配体是前列腺素PGD2,一种主要的肥大细胞源性过敏介质(Hirai et al.,2001)。 PGD2激活了另一个GPCR DP,并且阐明了DP和CRTH2对PGD2介导的过敏性疾病的相对贡献。 CRTH2的小分子拮抗剂雷马曲班可减弱PGD2-介导的支气管高反应性和抗原诱导的炎症(Sugimoto et al., 2003; Shichijo et al., 2003)。Chemicon ′CRTH2膜制剂是由我们专有的稳定重组细胞系制备的粗膜制剂,以确保高水平的GPCR表面表达;因此,它们是筛选PGD2/CRTH2相互作用拮抗剂的理想HTS工具。 膜制剂对[3H]-前列腺素D2的Kd为10 nM。 使用2.5 μg/孔的CRTH2膜制剂和10 nM[3H]-前列腺素D2,可获得大于5倍的信背比。
應用
放射性配体结合测定和GTPγS结合。
生化/生理作用
GPCR 类别:A
蛋白质靶标:CRTH2 / DP2 / GPR44
靶标亚家族:前列腺素类
包裝
1 mL
品質
信号:在使用未标记前列腺素D2的CRTH2膜制备物的竞争结合测定中获得的背景和特异性结合值。
10 g/孔
信号:背景12.2
特异性结合(cpm)4307
在使用CRTH2膜制备物的竞争结合测定中获得的配体的IC50值。
IC50(nM)前列腺素D2 4.5
13,14-二氢-15-酮前列腺素D2 14.7
BW A868C 7429
质量标准:1单位 = 10 g
Bmax:13.93 pmol/mg
Kd: 10 nM
10 g/孔
信号:背景12.2
特异性结合(cpm)4307
在使用CRTH2膜制备物的竞争结合测定中获得的配体的IC50值。
IC50(nM)前列腺素D2 4.5
13,14-二氢-15-酮前列腺素D2 14.7
BW A868C 7429
质量标准:1单位 = 10 g
Bmax:13.93 pmol/mg
Kd: 10 nM
規格
诱导条件
将膜与放射性配体和未标记竞争剂(检测浓度见图1和2)在非结合96孔板的结合缓冲液中混合,并培养1-2小时。过滤前,用0.33%聚乙烯亚胺包被FC 96孔收获板(Millipore 目录号MAHF C1H)30分钟,然后用50mM HEPES,pH值7.4,0.5%BSA洗涤。将结合反应物转移到滤板上,并用洗涤缓冲液洗涤3次(每次洗涤每孔1 mL)。将平板干燥并计数。
结合缓冲液:50mM HEPES,10mM MnCl2,1mM EDTA,0.2%BSA,pH值至7.0并过滤。
洗涤缓冲液:50mM HEPES,0.5 M NaCl,pH值至7.4并过滤。
放射性配体:[3H]前列腺素D2(Amersham#:TRK734)
将膜与放射性配体和未标记竞争剂(检测浓度见图1和2)在非结合96孔板的结合缓冲液中混合,并培养1-2小时。过滤前,用0.33%聚乙烯亚胺包被FC 96孔收获板(Millipore 目录号MAHF C1H)30分钟,然后用50mM HEPES,pH值7.4,0.5%BSA洗涤。将结合反应物转移到滤板上,并用洗涤缓冲液洗涤3次(每次洗涤每孔1 mL)。将平板干燥并计数。
结合缓冲液:50mM HEPES,10mM MnCl2,1mM EDTA,0.2%BSA,pH值至7.0并过滤。
洗涤缓冲液:50mM HEPES,0.5 M NaCl,pH值至7.4并过滤。
放射性配体:[3H]前列腺素D2(Amersham#:TRK734)
外觀
包装缓冲液中的液体:50 mM Tris pH值7.4、10%甘油和1%BSA,不含防腐剂。包装方法:将膜蛋白在1 ml包装缓冲液中调节至0.5 mg/ml,快速冷冻,并保存在-80°C下。
儲存和穩定性
在 -70°C 下可冷冻保存长达 2年。 请勿冷冻和解冻。
法律資訊
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
免責聲明
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儲存類別代碼
12 - Non Combustible Liquids
水污染物質分類(WGK)
WGK 2
閃點(°F)
Not applicable
閃點(°C)
Not applicable
分析證明 (COA)
輸入產品批次/批號來搜索 分析證明 (COA)。在產品’s標籤上找到批次和批號,寫有 ‘Lot’或‘Batch’.。
Journal of immunology (Baltimore, Md. : 1950), 162(3), 1278-1286 (1999-02-11)
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