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Merck
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文件

ABE290

Sigma-Aldrich

抗-TET3

from rabbit, purified by affinity chromatography

同義詞:

Methylcytosine dioxygenase TET3

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About This Item

分類程式碼代碼:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41

生物源

rabbit

品質等級

抗體表格

affinity isolated antibody

抗體產品種類

primary antibodies

無性繁殖

polyclonal

純化經由

affinity chromatography

物種活性

mouse

物種活性(以同源性預測)

human (based on 100% sequence homology), rat (based on 100% sequence homology), nonhuman primates (based on 100% sequence homology)

技術

ChIP: suitable (ChIP-seq)
immunocytochemistry: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable

NCBI登錄號

UniProt登錄號

運輸包裝

ambient

目標翻譯後修改

unmodified

基因資訊

human ... TET3(200424)

一般說明

MABE1144/1132/1133甲基胞嘧啶双加氧酶TET3(C 1.14.11.n2; UniProt O43151)由人TET3(也称为 KIAA0401)基因(基因 ID 200424)编码。TET(10-11易位)蛋白(TET1、TET2和TET3)将5-甲基胞嘧啶(5mC)氧化为5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)、5-甲酰基胞嘧啶(5fC)和5-羧基胞嘧啶(5caC),为哺乳动物中主动表观遗传DNA脱甲基提供了一种手段。TET蛋白还将基因组胸腺嘧啶残基修饰为5-羟基尿嘧啶。TET蛋白依赖于Fe(II)和2-氧代戊二酸作为活性的辅因子,已知2-氧代戊二酸抑制其活性,而抗坏血酸则显示刺激TET介导的胞嘧啶氧化。此外,翻译后修饰(PTM),例如磷酸化和O-GlcNAc糖基化,也在调节TET蛋白的活性中起作用。发现TET1和TET2在小鼠胚胎干细胞(mESC)中高度表达,并且已知TET3在卵母细胞中上调并氧化沉默的父本原核DNA。还报道了神经元组织中高水平的TET蛋白和基因组5-羟甲基胞嘧啶。研究人员已经报道过三种TET3剪接亚型/变体,长的全长亚型Tet3FL和短的亚型 Tet3s在胚胎干细胞(ESC)向神经元谱系(neuronal lineage)的分化过程中上调,而 Tet3o对卵母细胞有特异性,在ESC或检测的成年小鼠组织的任何其它类型细胞中都没有检测到,表明Tet3o在小鼠受精卵中父系基因组(paternal genome)氧化中的作用。Tet3FL 和Tet3o 含有完整的 Tet3s序列和额外(但不同的)N末端序列。只有Tet3FL含有N末端CXXC结构域,该结构域结合未甲基化CpG并具有最高的5caC亲和力。Tet3FL的活性远远低于Tet3o和Tet3s,说明CXXC结构域限制了Tet3FL 5mC 的氧化能力。

特異性

免疫原序列存在于Jin, S.G.等人报道的TET3亚型Tet3FL、Tet3s和Tet3o 剪接亚型(Jin, S.G., et al. (2016).Cell Rep.14(3):493-505),以及UniProt 报道的(O43151, Q8BG87)所有额外的人和小鼠TET3剪接亚型。注意,UniProt亚型1(O43151-1/人和Q8BG87-1/小鼠)对应于亚型 Tet3s,而不是Tet3FL(NM_001287491.1/人和JX946278.1/小鼠)。

免疫原

对应于人TET3 N 末端一半的内部序列的 KLH 偶联线性肽。

應用

免疫沉淀分析:10 µg 代表性批次从 500 µg 转染小鼠胚胎干细胞(mESC)裂解液中免疫沉淀了外源表达的小鼠TET3-GFP融合蛋白。

染色质免疫沉淀测序(ChIP-seq)分析通过ChIP-seq 分析 (每次ChIP10 µg ),采用转染至过度表达小鼠TET3的小鼠胚胎干细胞(mESC)制备的染色质制剂,一个代表性批次检测到 TET3 染色体染色体富集位点(由Reik lab, Epigenetics ISP, Babraham Institute, UK提供)

免疫细胞化学分析:一个代表性批次的1:250稀释液对转染至过度表达小鼠TET3 卵母细胞亚型Tet3o的4%多聚甲醛固定、0.5% Triton X-100-透化的小鼠胚胎干细胞(mESC)进行了免疫染色(由Reik lab, Epigenetics ISP, Babraham Institute, UK提供)

免疫细胞化学分析:一个代表性批次的1:250稀释液在4%多聚甲醛固定、0.5% Triton X-100-透化的小鼠受精卵中检测到TET3 卵母细胞亚型Tet3o的免疫反应性(由Reik lab, Epigenetics ISP, Babraham Institute, UK提供)

免疫沉淀分析:通过RIME(内源蛋白的快速免疫沉淀质谱联用技术),10 µg 代表性批次对内源性 OGT与来自转染小鼠胚胎干细胞(mESC)的外源过表达的鼠TET3进行了免疫共沉淀(由Reik lab, Epigenetics ISP, Babraham Institute, UK提供)。
抗-TET3(货号ABE290)是一种高度特异性的兔多克隆抗体,靶向甲基胞嘧啶双加氧酶TET3 ,并已在染色质免疫沉淀(ChIP)、ChIP-seq、免疫细胞化学、免疫沉淀和蛋白质印迹中进行了测试。

品質

通过蛋白质印迹在小鼠TET3 GFP 融合蛋白中进行了评估。

蛋白质印迹分析:2 µg/mL该抗体在10 µg转染小鼠胚胎干细胞(mESC)裂解物中检测到外源表达的小鼠TET3 GFP融合蛋白。

標靶描述

计算分子量:193.7/179.4 kDa (人亚型 Tet3FL/Tet3s)、194.8/180.4/185.1 kDa(小鼠亚型 Tet3FL/Tet3s/Tet3o)、166.7/77.47 kDa (UniProt 人亚型2/3)、 76.26 kDa (UniProt 小鼠亚型2)注意,UniProt亚型1(O43151-1/人和Q8BG87-1/小鼠)对应于亚型 Tet3s,而不是Tet3FL(NM_001287491.1/人和JX946278.1/小鼠)。

儲存和穩定性

自收到之日起,在2-8°C条件下可稳定保存1年。

其他說明

浓度:请参考特定批次的数据表。

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儲存類別代碼

12 - Non Combustible Liquids

水污染物質分類(WGK)

WGK 1

閃點(°F)

Not applicable

閃點(°C)

Not applicable


分析證明 (COA)

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