细胞培养实验方案1：恰当的无菌技术和细胞无菌处理

ECACC Laboratory Handbook 4th Edition

产品列表

• 70％ (v/v) 乙醇无菌水溶液(793213)
• 次氯酸钠（425044）

目标

确保所有细胞培养程序都达到一个标准，防止细菌、真菌和支原体污染，以及与其他细胞系的交叉污染。

设备

• 个人防护装备（无菌手套、实验室外套、护目镜、鞋套、发套）
• 适当防护水平的生物安全柜

操作流程

1. 在开始工作前，用70％乙醇消毒安全柜。
2. 在开始工作前，用70％乙醇喷洒手套并使其风干30秒以消毒。
3. 在开始工作之前，将所有材料和设备放入安全柜中。安全柜中的设备以及将要在细胞培养操作中放入安全柜的设备（培养基瓶子、移液器吸头盒、移液器辅助设备）在使用前，均应使用浸有70％乙醇的纸巾擦拭。
4. 工作过程中，请勿触摸安全柜外面的任何东西（特别是脸部和头发），以免污染手套。如果手套受到污染，请按照上述方法重新喷洒70％乙醇，然后再继续操作。
5. 在处理完受到污染的培养物后以及在完成细胞培养的所有操作之后，丢掉手套。
6. 在安全柜内部和靠近安全柜的外部的任何移动都不得快速进行。缓慢移动不会打乱安全柜内空气的正常循环。
7. 说话、打喷嚏和咳嗽时均必须远离安全柜，以免扰乱气流。
8. 完成工作后，在从安全柜中取出所有设备和材料之前必须先对它们进行消毒。用70％乙醇喷洒安全柜内的工作表面，然后用纸巾擦干。
9. 液体细胞培养废物应丢弃在次氯酸钠（10,000 ppm）中，并且必须在安全柜中保存至少两小时（最好是过夜）后，才能用大量的水冲入下水道。
10. 根据制造商的说明，定期用消毒剂清洁安全柜表面或熏蒸安全柜。但是必须确保熏蒸实验室是安全的，因为熏蒸时会产生甲醛气体，请咨询您的现场健康与安全顾问。