用于细胞培养的明胶包被实验方案

明胶是胶原蛋白的一种分子衍生物，通过对来自牛皮的胶原蛋白进行碱性消化而合成。明胶是一种水状胶体，富含甘氨酸、脯氨酸和羟脯氨酸，具有结构稳定性。明胶可为细胞培养提供理想的细胞附着基质。最适浓度取决于细胞类型和研究对象。

明胶包被前重要注意事项

• 确保细胞健康且数量充裕。
• 明胶溶液需要在包被前在37°C下完全液化。
• 明胶溶液可4-8°C无限期保存；高温会导致水解和完整性损失。
• 常用表面覆盖浓度为100 – 200 µg/cm²。表面覆盖浓度可能因培养细胞而异。必须确定每种细胞系和应用的最佳附着条件。
• 包被之后切勿过度干燥，否则会破坏明胶结构并影响细胞附着。

用于细胞培养的明胶包被实验方案

1. 将明胶溶解在组织培养级水中，制备2％（w / v）溶液。
2. 在121°C、15 psi下高压灭菌30分钟。
3. 5-10 µL明胶溶液/cm²（即100-200 µg/cm²）包被培养表面。
4. 在加入细胞或培养基之前至少干燥2小时。
5. 或者，也可使用明胶溶液（货号G1393）直接包被培养皿。

表1. 细胞附着明胶

货号	描述	包被浓度	稀释液
G1393	明胶溶液	100-5 μg/cm2	无菌水
G9136	猪皮来源明胶	100-5 μg/cm2	温基础培养基（无血清）
G1890	猪皮来源明胶	100-5 μg/cm2	温水
G7041	冷水鱼来源明胶	100-5 μg/cm2
G9391	牛皮来源明胶	100-5 μg/cm2

明胶包被培养皿常见问题

• 明胶产品的纯度是多少？
  我们无法确定纤连蛋白溶液的纯度。我们所有的纤连蛋白粉末纯度均为70-90％。
  
  
• 稀释明胶粉的最佳溶剂是哪种？
  表1中提供了适于稀释明胶的溶剂。
  
  
• 明胶可以储存多长时间？
  明胶溶液可在2-8°C下无限期保存。如果将明胶包被板密封良好，可防止明胶污染和/或过度干燥，则最多可在2-8°C下保存4周。如果包被材料表面变色或出现裂纹，请勿使用产品。
  
  
• 明胶的 Bloom数有何意义？
  Bloom数由 Oscar T. Bloom 提出，代表明胶膜强度。首先使用强度测定计通过受控过程测量明胶膜强度。数字越高，产品强度越大。 Bloom 数/ Bloom 强度有助于选择适合您应用的明胶产品。