推荐产品
重組細胞
expressed in E. coli
品質等級
包裝
vial of 50 μL
濃度
20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA)
啟動子
Promoter name: CMV
選擇
kanamycin
運輸包裝
dry ice
儲存溫度
−20°C
正在寻找类似产品? 访问 产品对比指南
一般說明
Cas9表达质粒使用CMV启动子实现Cas9强瞬时表达。您可以使用MluI和NheI酶切将CMV替换为其它启动子。而且还可使用XbaI酶切将Cas9表达质粒线性化，以实现基于T7的mRNA表达。
應用
功能性基因组学/靶点验证
- 在多种细胞系中进行基因敲除
- 对不适合于RNAi的基因进行完全敲除
- 建立基因敲入细胞系，将启动子、融合标签或报告基因整合到内源性基因中
成分
1管含1µg 的Cas9质粒。
请注意，该产品不含向导RNA序列。向导RNA必须通过定制CRISPR产品选项卡单独购买。
请注意，该产品不含向导RNA序列。向导RNA必须通过定制CRISPR产品选项卡单独购买。
原則
CRISPR/Cas是细菌和古细菌的一种防御系统，可用来对抗入侵的病毒和质粒。来自酿脓链球菌的II型CRISPR/Cas系统包含两种分子元件，即一个Cas9蛋白和一个非编码向导RNA（gRNA），该系统经过基因改造而被用于真核系统中。Cas9核酸内切酶可在单个gRNA的引导下，在指定基因组位置上引入DNA双链断裂（DSB）。与锌指核酸酶（ZFN）诱导的DSB相似，细胞随后会激活内源性DNA修复程序，即非同源性末端接合（NHEJ）或同源重组修复机制（HDR），对目标DSB进行修复。
外觀
Sigma Cas9 质粒DNA的产品形式是浓度为20ng/μl的50μl溶液。
準備報告
Sigma CRISPR质粒产品为小量提取包装，可能不适用于转染到特殊类型的细胞中。为得到最佳结果，我们建议在转染前使用无内毒素的DNA纯化试剂盒大量提取质粒。
其他說明
为了介导DNA双链断裂，必须与U6-gRNA质粒一起使用。
文献中使用的标准转染浓度范围为≥1.0 ug/μl且≤5 uL的Cas9质粒结合≥1.0 ug/μl且≤5 ul的U6-gRNA质粒。（上述所有浓度均假设是对0.5~1百万个细胞进行核转染）
文献中使用的标准转染浓度范围为≥1.0 ug/μl且≤5 uL的Cas9质粒结合≥1.0 ug/μl且≤5 ul的U6-gRNA质粒。（上述所有浓度均假设是对0.5~1百万个细胞进行核转染）
法律資訊
儲存類別代碼
10 - Combustible liquids
閃點（°F）
Not applicable
閃點（°C）
Not applicable
其他客户在看
Yan Wang et al.
Reproduction (Cambridge, England), 160(3), 353-365 (2020-06-11)
In this study, we investigated a gene-edited (Zp2MT/MT) rat model of infertility caused by the failure to express the zona pellucida glycoprotein 2 (ZP2) due to the significant reduction of mRNA amount. We examined the defects in the zona pellucida
实验方案
了解CRISPR Cas9、定义和工作原理。CRISPR是一种全新、实惠的基因组编辑工具，可让所有人掌握基因组编辑。
Learn about CRISPR Cas9, what it is and how it works. CRISPR is a new, affordable genome editing tool enabling access to genome editing for all.
相关内容
Sigma-Aldrich® Advanced Genomics是CRISPR、Cas9、合成向导RNA(sgRNA)和锌指核酸酶(ZFN)等基因编辑和沉默技术的领先提供者。
Sigma-Aldrich® Advanced Genomics is the leading provider of gene editing and silencing technologies including CRISPR, Cas9, synthetic guide RNA (sgRNA), and Zinc Finger Nuclease (ZFN).
我们的科学家团队拥有各种研究领域经验，包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.
联系技术服务部门