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Merck

CAS9D10AGFPP

Sigma-Aldrich

CMV-CAS9D10A-2A-GFP 质粒

别名:

CAS9D10A 质粒

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About This Item

分類程式碼代碼:
12352200
NACRES:
NA.51

重組細胞

expressed in E. coli

形狀

liquid

包裝

vial of 50 μL

濃度

20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA)

啟動子

Promoter name: CMV

報告基因

GFP

選擇

kanamycin

運輸包裝

dry ice

儲存溫度

−20°C

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一般說明

共表达GFP的Cas9-D10A切口酶表粒使用CMV启动子,可获得较强的Cas9-D10A 瞬时表达。您可以使用MluI和NheI酶切将CMV替换为其它启动子。同时,使用XbaI酶切可使Cas9D10A表达质粒线性化,得到基于T7的mRNA产物。

應用

功能基因组
使用配对Cas9 切口酶+GFP 用于:

  • 在多种细胞系中进行基因敲除
  • 对不适合于RNAi的基因进行完全敲除
  • 建立基因敲入细胞系,将启动子、融合标签或报告基因整合到内源性基因中
CMV-CAS9D10A-2A-GFP Plasmid has been used in CRISPR-Cas9 mutagenesis to truncate the forkhead box O3 (FOXO3) gene in the mammalian cell.

成分

每管包含1μg的 Cas9-D10A 切口酶-GFP质粒。

请注意,该产品不含向导RNA序列。向导RNA必须通过定制CRISPR配对切口酶产品选项卡单独购买。

外觀

1μg Sigma Cas9-D10A 切口酶-GFP 质粒

其他說明

来自酿脓链球菌的II型CRISPR/Cas系统经过包含两种分子元件,即一个Cas9蛋白和一个非编码向导RNA(gRNA),该系统经过基因改造而被用于真核系统中。Cas9核酸内切酶可在单个gRNA的引导下,在指定基因组位置上引入DNA双链断裂(DSB)。与锌指核酸酶(ZFN)诱导的DSB相似,细胞随后会激活内源性DNA修复程序,即非同源性末端接合(NHEJ)或同源重组修复机制(HDR),对目标DSB进行修复。GFP通过2A肽段连接,与Cas9切口酶蛋白的相同mRNA共表达,实现了对转染效率的追踪,也能通过荧光激活细胞分选术(FACS)对基因组编辑活性进行富集。

法律資訊

CRISPR专利正在申请中

儲存類別代碼

10 - Combustible liquids

水污染物質分類(WGK)

nwg

閃點(°F)

Not applicable

閃點(°C)

Not applicable


分析证书(COA)

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A protocol for custom CRISPR Cas9 donor vector construction to truncate genes in mammalian cells using pcDNA3 backbone
Vazquez N, et al.
BMC Molecular Biology, 19(1), 3-3 (2018)

实验方案

Learn about CRISPR Cas9, what it is and how it works. CRISPR is a new, affordable genome editing tool enabling access to genome editing for all.

了解CRISPR Cas9、定义和工作原理。CRISPR是一种全新、实惠的基因组编辑工具,可让所有人掌握基因组编辑。

我们的科学家团队拥有各种研究领域经验,包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.

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