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一般說明
胶原酶是一种蛋白酶,可切割三螺旋结构的蛋白,即胶原蛋白。组织胶原酶有三种类型,它们属于基质金属蛋白酶(MMP)家族。来自溶组织梭菌( Clostridium histolyticum )的胶原酶具有非常强的活性,它在低至4-10℃的温度下可从两端消化胶原蛋白。 粗制胶原酶混合物含有两种主要类型的酶,即胶原酶和梭菌蛋白酶。
應用
来自溶组织梭菌( Clostridium histolyticum )的胶原酶被用于以下应用:
本品适用于人类肿瘤、小鼠肾脏、人类成人和胎儿的脑、肺和许多其他上皮组织的解离。 它还被证明适用于肝脏和肾脏灌注研究、胰腺消化、非实质性大鼠肝细胞的分离、以及肝细胞制备。 胶原酶也已用于制备动脉组织,以对晚期糖基化终产物进行研究。 该酶用于(浓度约为1mg/ml)对肝细胞的释放进行检测。消化浓度范围为0.1至5mg/mL。
适用于制备用于测序的单细胞悬液。
- 足细胞分离
- 用于酶催化法的对比
- 用于免疫细胞化学的组织制备
- 睾丸精子提取
- 制备单细胞悬浮液
- 免疫荧光法
本品适用于人类肿瘤、小鼠肾脏、人类成人和胎儿的脑、肺和许多其他上皮组织的解离。 它还被证明适用于肝脏和肾脏灌注研究、胰腺消化、非实质性大鼠肝细胞的分离、以及肝细胞制备。 胶原酶也已用于制备动脉组织,以对晚期糖基化终产物进行研究。 该酶用于(浓度约为1mg/ml)对肝细胞的释放进行检测。消化浓度范围为0.1至5mg/mL。
适用于制备用于测序的单细胞悬液。
生化/生理作用
每摩尔胶原蛋白酶被4g原子钙活化。 它被乙二醇-双(β-氨基乙基醚)-N,NN′,N′-四乙酸,β-巯基乙醇、谷胱甘肽、巯基乙酸和8-羟基喹啉抑制。
胶原酶产品是一种由溶组织梭菌( C.histolyticum)分泌的酶的混合物,分泌酶中10-18种化合物成分的相对比例在不同产品中有所差异。 主要成分是两种胶原酶、梭菌蛋白酶和中性蛋白酶。 这些酶的协同作用可降解胶原蛋白和其他细胞内物质。胶原酶和中性蛋白酶的作用是细胞从组织有效释放所必需的。 各种类型的胶原蛋白是胶原酶的天然底物。
注意
本品在-20°C下可稳定保存一年。在37℃、50℃和-20℃下保存30天,其FALGPA或蛋白酶活性没有损失。粗制胶原酶溶液分装品( 10 mg/mL)经快速冷冻可保持稳定,并且可在-20℃下冷冻保存。进一步冻融循环会损坏溶液。 本品在冰上放置7小时,可保留100%活性。
單位定義
一个胶原蛋白消化单元(CDU)从牛跟腱胶原蛋白中释放的肽链量和1.0 μ亮氨酸,5小时,pH7.4,37℃,在钙离子存在下的茚三酮颜色相同。一个 FALGPA水解单元每分钟,25℃,水解1.0 μmole 呋喃基丙烯酰-Leu-Gly-Pro-Ala。一个中性蛋白酶单元水解酪蛋白,产生颜色和1.0 μmole 酪氨酸每5小时,pH7.5,37℃下产生的相同。一个梭菌蛋白酶单元在DTT存在下,pH7.6,25℃,每分钟水解1.0 μmole BAEE。
準備報告
该胶原酶来自溶组织梭菌(Clostridium histolyticum)的培养滤液。培养滤液被认为含有至少7种不同蛋白酶,分子量范围为68-130 kDa。本品为I-A型。其溶液通常使用TESCA缓冲液(含有50 mM TES,0.36 mM氯化钙,在37℃时pH 7.4)制备,浓度为1-2 mg/mL。
基底
訊號詞
Danger
危險分類
Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
標靶器官
Respiratory system
儲存類別代碼
11 - Combustible Solids
水污染物質分類(WGK)
WGK 1
閃點(°F)
Not applicable
閃點(°C)
Not applicable
個人防護裝備
dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves
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商品
Discover pre-mixed collagenase enzyme blends with DNase I, Dispase II, Elastase, and Hyaluronidase and gently dissociate animal tissues in vitro.
Quantitative and qualitative western blotting to validate knockdown by esiRNA.
实验方案
To measure collagenase activity, N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala is used in a continuous spectrophotometric rate determination at 345 nm. Collagenase hydrolyzes collagen peptide bonds.
在测定胶原酶活性时,使用N-(3-[2-呋喃基]丙烯酰基)-Leu-Gly-Pro-Ala在345nm处进行连续分光光度法测定。胶原酶水解胶原肽键。
我们的科学家团队拥有各种研究领域经验,包括生命科学、材料科学、化学合成、色谱、分析及许多其他领域.
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