Przejdź do zawartości
Merck
Strona głównaTechnologia zliczania pojedynczych cząsteczek (SMC®)Przegląd technologii ultraczułych testów immunologicznych

Przegląd technologii ultraczułych testów immunologicznych

Ciekawi Cię, w jaki sposób technologia ultraczułych testów immunologicznych może usprawnić Twoje badania? Dowiedz się, w jaki sposób technologia liczenia pojedynczych cząsteczek (SMC®) rozwija badania w dziedzinie immunologii, kardiotoksyczności, neuronauki i nie tylko. Zapoznaj się również z zaletami technologii SMC® i zobacz, w jaki sposób naukowcy wykorzystują te testy o wysokiej czułości, aby przyspieszyć swoje odkrycia.

Czytaj więcej

Co to jest technologia SMC®?

Technologia Single Molecule Counting (SMC®) to zaawansowana technologia ultraczułych testów immunologicznych, która daje naukowcom możliwość wykrywania biomarkerów, które wcześniej były niewykrywalne do femtograma/ml. Stanowi ona niezastąpione narzędzie w arsenale naukowców, które pomaga im rozwijać nową biologię, napędzając odkrywanie i opracowywanie nowych środków terapeutycznych. Technologia SMC®, pierwotnie opracowana przez Singulex®, Inc. w 2004 roku, opiera się na podstawowym formacie testu immunologicznego typu sandwich, wykorzystującym dwa przeciwciała specyficzne dla interesującego analitu: przeciwciało wychwytujące pokryte na płytce lub kulce magnetycznej oraz przeciwciało wykrywające sprzężone z białkiem fluorescencyjnym. Tylko technologia testów immunologicznych SMC® pozwala badaczom na stosowanie zarówno testów opartych na płytkach, jak i kuleczkach, oferując w ten sposób niezrównaną elastyczność w projektowaniu testów.

Technologia SMC® Workflow

Naukowcy zaznajomieni z tradycyjnymi testami immunologicznymi, takimi jak ELISA, wiedzą, że czułość, efekty matrycy i zakres dynamiczny wpływają na sposób wykonywania pomiarów - lub na to, czy w ogóle mogą je wykonać. Połączenie tradycyjnych testów immunologicznych z opatentowaną technologią SMC® umożliwia wykrywanie biomarkerów o niskiej liczebności, takich jak białka i kwasy nukleinowe, z niezrównaną czułością i dokładnością, rejestrując stężenia do poziomu femtograma/ml. Naukowcy mogą wykrywać i monitorować zmiany bardzo niskich poziomów uznanych biomarkerów chorób, takich jak troponina I i cytokiny.

Przebieg pracy z technologią SMC® składa się z 5 kroków opisanych poniżej. Odróżniając testy SMC® od tradycyjnych testów immunologicznych, bufor elucyjny jest używany do rozbicia kompleksu testu immunologicznego po jego skonstruowaniu. Eluat zawierający fluorescencyjną cząsteczkę reporterową jest przenoszony na płytkę 384-dołkową, usuwając w ten sposób inne składniki testu, które przyczyniają się do wysokiego sygnału fluorescencyjnego tła, takie jak kulki magnetyczne i przeciwciała stosowane do wychwytywania analitu. Płytka jest ładowana do urządzenia SMCxPRO®, urządzenia SMC® drugiej generacji, gdzie laser wzbudza znakowane fluorescencyjnie przeciwciało wykrywające, gdy przechodzi ono przez wąskie okno przesłuchania. Poszczególne fotony są wychwytywane przez fotodiodę lawinową, a sygnał jest rejestrowany. Pozwala to na cyfrową kwantyfikację poszczególnych cząsteczek. Stężenia analitu w nieznanych próbkach są obliczane przy użyciu odpowiedniej krzywej standardowej.

Etapy procesu SMC® Technology Workflow obejmują:

Analit będący przedmiotem zainteresowania w roztworze

Przygotowanie próbki

Analit będący przedmiotem zainteresowania w roztworze

    Przechwytywanie na płytce lub kulce

    Przechwytywanie na płytce lub koraliku

      Przeciwciała przekształcają każdy biomarker w sygnał

      Przeciwciała przekształcają każdy biomarker w sygnał

        Elute

        Kompleks jest chemicznie rozbijany

          Kwantyfikacja

          Próbka jest wykrywana przez laser, a znaczniki detekcji są zliczane 

            Po wykonaniu tradycyjnego testu kanapkowego ELISA, opatentowane etapy protokołu SMC® koncentrują sygnał poprzez odłączenie znakowanego fluorescencyjnie przeciwciała wykrywającego od kompleksu kanapkowego. Znakowane fluorescencyjnie przeciwciało wykrywające jest sygnałem uzyskanym w urządzeniu SMCxPRO®. Skutkuje to powtarzalnym sygnałem i lepszą kwantyfikacją białek, szczególnie tych o bardzo niskiej liczebności. Dzięki lepszej precyzji i czułości naukowcy mogą:

            • Kwantyfikować wcześniej niewykrywalne anality
            • Lepiej stratyfikować populacje próbek
            • Uzyskać wgląd w nowe mechanizmy biologiczne
            • Wymaganie mniejszej liczby punktów danych do podejmowania krytycznych decyzji
            • Przyspieszenie procesu odkrywania i opracowywania leków
            • Obniżenie kosztów programu i poprawa wydajności

            Ultrasensitive Biomarker Detection Platform

            Technologia SMC® oferuje ultraczułą platformę wykrywania biomarkerów z elastyczna platforma SMCxPRO®. Tabela 1 porównuje wykonywanie testów na tej platformie do wykonywania tradycyjnych testów ELISA.

            Tabela 1.Porównanie testów SMC® na platformie SMCxPRO® z tradycyjnymi testami ELISA.

            Urządzenia pomocnicze i zestawy usprawniające przepływ pracy SMC®

            Aby usprawnić platformę SMCxPRO®, oferujemy również urządzenia pomocnicze i zestawy specjalnie dla technologii SMC®, takie jak:

            Zastosowania badawcze

            Ultrasensybilizowane testy immunologiczne mogą usprawnić badania w różnych dziedzinach, ponieważ zwiększona czułość pozwala naukowcom zagłębić się w ich badania. Zastosowania badawcze technologii SMC® obejmują obszary:

            Frequently Cited Advantages of SMC® Technology

            Technologia Single Molecule Counting (SMC®) zapewnia maksymalną wydajność testu immunologicznego przy zachowaniu przepływu pracy bardzo podobnego do tradycyjnej technologii ELISA.

            Tradycyjne metody ELISA wykazują ograniczenia czułości i zakresu dynamicznego, zazwyczaj wymagają dużych objętości próbek i są podatne na efekty matrycy. W połączeniu czynniki te zmniejszają użyteczność tradycyjnych testów ELISA do wykrywania białek o niskiej zawartości i endogennych poziomów biomarkerów u zdrowych osób, utrudniając w ten sposób analizę statystyczną między grupami badawczymi. Dostosowując przepływ pracy ELISA, technologia SMC® osiąga lepszy stosunek sygnału do szumu w porównaniu z tradycyjnymi technologiami testów immunologicznych, zapewniając w ten sposób kwantyfikację zarówno na niskich, jak i wysokich poziomach ekspresji w jednym kompletnym systemie. Cyfrowe zliczanie zdarzeń fluorescencyjnych poprawia czułość testu i rozszerza zakres dynamiczny testu poza to, co można osiągnąć za pomocą tradycyjnych testów immunologicznych.

            Ponieważ technologia SMC® immunoassay może osiągnąć zakres czułości fg/mL, platforma ta oferuje możliwość rozcieńczania próbek przedklinicznych, gdy dostępne są tylko małe objętości próbek.

            Użytkownicy są w pełni wspierani przez naukowców i specjalistów ds. zastosowań w terenie, a także dedykowane zespoły wsparcia technicznego.

            Zrozumieliśmy, że platforma SMC® jest ważną inwestycją dla laboratoriów badawczych i dokładamy wszelkich starań, aby zapewnić sukces jej użytkownikom. Niezależnie od rodzaju stosowanych testów, wszyscy użytkownicy SMC® są w pełni wspierani przez naukowców i specjalistów ds. zastosowań w terenie, którzy mają doświadczenie w pracy z naukowcami z szerokiego zakresu typów laboratoriów, w tym akademickich, rządowych, biotechnologicznych, farmaceutycznych, CRO i laboratoriów regulowanych.

            Platforma SMC® to wszechstronny system, który może być wykorzystywany w wielu rodzajach badań, w tym w ocenie biomarkerów, pracach bioanalitycznych, takich jak badania farmakokinetyczne i farmakodynamiczne oraz testy immunogenności.

            W uzupełnieniu do menu gotowych, zweryfikowanych zestawów testowych, nasz zespół ds. rozwoju niestandardowych testów i innowacji (CADI) może zostać zakontraktowany do wykonania niestandardowych usług opracowywania testów i testowania próbek w ich zakładzie w St. Louis, MO, USA. Poproś o więcej informacji na temat naszych niestandardowych usług na naszej stronie CADI.

            Testy SMC® są dostępne w formatach opartych na kulkach i mogą być opracowywane zarówno w formatach opartych na płytkach, jak i na kulkach przez nasz zespół CADI.

            Zastrzeżona technologia SMC® pozwala naukowcom mierzyć białka ze zwiększoną precyzją, umożliwiając niezrównaną kwantyfikację na niskich i wysokich poziomach ekspresji. Elastyczny system SMC® immunoassay pozyskuje dane zarówno z testów płytkowych, jak i perełkowych, zapewniając wybór formatu w zależności od budżetu i wymagań ilościowych.Dowiedz się więcej o tym, jak opracowujemy niestandardowe testy SMC® w naszym artykule na temat usług CADI.

            Płytka do odczytu testów SMC® jest płytką 384-dołkową, a całą płytkę można odczytać w mniej niż trzy godziny. Ta wysokowydajna platforma umożliwia badaczom przeprowadzenie całego testu SMC® od przygotowania próbki do analizy danych w ciągu jednego dnia.

            System SMCxPRO® można zintegrować z systemem podawania cieczy Hamilton Microlab® STARlet, zwiększając wydajność testu.

            W niektórych środowiskach, automatyzacja testów immunologicznych SMC® jest pożądana, aby naukowcy mogli skupić się na innych wartościowych działaniach w celu zwiększenia ogólnej wydajności. Stacja robocza do obsługi cieczy Hamilton Microlab® STARlet oferuje opcję bez użycia rąk, zapewniając solidny, powtarzalny przepływ pracy SMC®, eliminując źródła błędów i zmienności.  Nasz zespół ds. rozwoju i innowacji testów niestandardowych (CADI) wykorzystuje tę technologię w stosownych przypadkach, aby skrócić czas realizacji projektów testowania próbek.

            Zarówno akwizycja, jak i analiza danych odbywa się w ramach jednego pakietu oprogramowania.

            Pakiet oprogramowania SMCxPRO® został opracowany we własnym zakresie, co zapewnia pełną przejrzystość algorytmów przetwarzania danych. Oprogramowanie jest przyjazne dla użytkownika i pozwala użytkownikom końcowym szybko i łatwo skonfigurować urządzenie, odczytać płytkę i przeanalizować wyniki. Dla laboratoriów działających w środowisku regulowanym, urządzenie SMCxPRO® generuje jeden strumień danych sygnałowych, który można zaimportować do laboratoryjnych systemów zarządzania informacjami, takich jak WATSON lub inne oprogramowanie. Można również włączyć funkcje zgodności z 21 CFR część 11. 

            Porady i wskazówki dotyczące przeprowadzania testów SMC®

            Masz pytania dotyczące przeprowadzania testów SMC®?Sprawdź pomocne wskazówki i porady w naszym przewodnik po wysokoczułej analizie biomarkerów z technologią SMC®.

            Related Webinars

            Publikacje wykorzystujące technologię SMC®

            Zobacz, w jaki sposób naukowcy wykorzystują technologię SMC® na poniższej liście publikacji uporządkowanych według obszaru badań.

            Wyłącznie do użytku badawczego. Nie do użytku w procedurach diagnostycznych.

            Chcesz dowiedzieć się więcej? Dowiedz się więcej o możliwościach naszych multipleksowych testów immunologicznych na naszej stronie przeglądu testów multipleksowych MILLIPLEX®.

            Powiązane produkty
            Loading
            Zaloguj się, aby kontynuować

            Zaloguj się lub utwórz konto, aby kontynuować.

            Nie masz konta użytkownika?