FNCAS9P

Plazmid FnCas9

• NACRES: NA.51
• UNSPSC Code: 41106609
• Promoter: Promoter name: CMV

Właściwości

• recombinant: expressed in E. coli
• packaging: vial of 50 μL
• concentration: 20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA)
• application(s): CRISPR
• promoter: Promoter name: CMV
• selection: kanamycin
• shipped in: dry ice
• storage temp.: −20°C

Opis

General description

Ten produkt jest plazmidem ekspresyjnym, który wykorzystuje promotor CMV do silnej przejściowej ekspresji Francisella novicida Cas9 (CMV-FnCas9). Plazmid ekspresyjny FnCas9 jest częścią dwuczęściowego systemu CRISPR z indywidualnymi wektorami ekspresyjnymi FnCas9 i gRNA.

Aby zamówić gRNA w dowolnym formacie kliknij tutaj.

Application

Genomika funkcjonalna/walidacja celu

• Proxy CRISPR
• Tworzenie nokautów genów w wielu liniach komórkowych

Biochem/physiol Actions

Systemy CRISPR/Cas są wykorzystywane przez bakterie i archeony do obrony przed inwazją wirusów i plazmidów. Niedawno system CRISPR/Cas typu II-B z bakterii Francisella novicida został zaprojektowany tak, aby działał w systemach eukariotycznych przy użyciu dwóch składników molekularnych: pojedynczej nukleazy FnCas9 i niekodującego RNA prowadzącego (gRNA). Endonukleaza FnCas9 jest zoptymalizowana pod kątem ludzkich kodonów i zaprogramowana za pomocą gRNA, kierując dwuniciowe pęknięcie DNA (DSB) na pożądaną sekwencję DNA. Podobnie jak w przypadku DSB indukowanych przez nukleazy z palcem cynkowym (ZFN), komórka aktywuje następnie endogenne procesy naprawy DNA, albo niehomologiczne łączenie końców (NHEJ), albo naprawę ukierunkowaną homologicznie (HDR), aby wyleczyć docelowe DSB. FnCas9 jest pod wieloma względami podobna do zwykłych nukleaz, ale posiada również inne odrębne cechy. Stwierdzono, że posiada wyższą wewnętrzną specyficzność poprzez zmniejszoną tolerancję na niedopasowania gRNA:DNA, a także indukuje rozłożony w czasie wzór rozszczepienia, pozostawiając 4bp 5′ nawisy poprzez rozszczepienie nici niebędącej celem w odległości 7 bp od PAM. W przeciwieństwie do SpCas9, aktywność FnCas9 waha się w różnych regionach genomu. Cotargetowanie martwego Cas9 w bliższych lokalizacjach może zmienić lokalne struktury chromatyny i sprawić, że niedostępne miejsca docelowe będą dostępne i możliwe do rozszczepienia przez FnCas9.

Features and Benefits

• Wysoka specyficzność i aktywność
• Zweryfikowana sekwencja
• Gotowy do użycia oczyszczony plazmid DNA

Legal Information

LicencjaCRISPR.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 2
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable