MABS1249

Przeciwciało anty-SCAP, klon 9D5

clone 9D5, from mouse

• Synonim(y): Sterol regulatory element-binding protein cleavage-activating protein, SCAP, SREBP cleavage-activating protein
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Conjugate: unconjugated
• Clone: 9D5, monoclonal
• Application: ICC, WB
• Citations: -

Właściwości

• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• conjugate: unconjugated
• antibody form: purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: 9D5, monoclonal
• species reactivity: hamster
• technique(s): immunocytochemistry: suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG2bκ
• NCBI accession no.: NP_001230965
• UniProt accession no.: P97260
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: hamster ... Scap(100689048)

Opis

General description

Sterol regulatory element-binding protein cleavage-activating protein (UniProt P97260; znane również jako SCAP, SREBP cleavage-activating protein) jest kodowane przez gen SCAP (Gene ID 100689048) u chomików. SCAP pośredniczy w aktywacji związanych z błoną czynników transkrypcyjnych SREBP (białka wiążące element regulujący sterol) w celu transkrypcji genów kodujących enzymy biosyntezy cholesterolu. W komórkach pozbawionych steroli SCAP eskortuje SREBP z ER do Golgiego, gdzie aktywne fragmenty SREBP są uwalniane z błony przez proteolizę. Nagromadzenie steroli wywołuje negatywny mechanizm regulacyjny, w którym SCAP zostaje związany przez Insigs i uwięziony w ER, zapobiegając dalszemu dostarczaniu SREBP do Golgiego w celu uwolnienia proteolitycznego. SCAP przenika przez błonę ER osiem razy (m.in. 19-39, 280-300, 313-333, 345-365, 402-422, 424-444, 519-539, 709-729) z
4 regionami lumenalnymi i 5 cytoplazmatycznymi, mając zarówno N-, jak i C-końcowe końce po stronie cytoplazmatycznej (a.a. 1-18 i 730-1276). C-końcowa domena SCAP pośredniczy w wiązaniu z SREBP, podczas gdy transbłonowe helisy 2-6 obejmują domenę wyczuwającą sterol, która pośredniczy w indukowanym sterolem wiązaniu SCAP z Insigs. Mutacje w regionie wyczuwającym sterol zakłócają wiązanie Insig i zapobiegają retencji SCAP-SREBP w ER za pośrednictwem sterolu.

Zaobserwowano ~150 kDa. Docelowy rozmiar pasma wydaje się większy niż obliczona masa cząsteczkowa 139,5 kDa z powodu glikozylacji. W niektórych lizatach mogą pojawić się niescharakteryzowane pasma.

Immunogen

Epitop: Czwarta domena lumenalna.

Rekombinowany fragment znakowany His odpowiadający czwartej domenie lumenalnej SCAP chomika.

Application

Analiza Western Blotting: 5 µg/ml z reprezentatywnej partii wykryło SCAP w 25 µg lizatu całych komórek i 50 µg ekstraktu błonowego z komórek CHO-K1, ale nie z komórek CHO SRD-13A z niedoborem SCAP (dzięki uprzejmości Lindy Donnelly, Department of Molecular Genetics, UT Southwestern Medical Center, Dallas, TX, USA).
Analiza Western Blotting: Reprezentatywna partia wykryła egzogennie wyrażony SCAP koimmunoprecypitowany z egzogennie wyrażonym Insig-1 i Insig-2 po traktowaniu 25-hydroksycholesterolem (25-HC) linii komórkowej CHO z niedoborem SCAP SRD-13A, która została transfekowana w celu koekspresji SCAP z Insig-1 lub Insig-2 znakowanym myc (Lee, P.C. i DeBose-Boyd, R.A. (2010). J. Lipid Res. 51(1):192-201).
Analiza Western Blotting: Reprezentatywne partie wykryły podobny poziom SCAP w ekstraktach błonowych z komórek CHO z lub bez leczenia inhibitorem przetwarzania SREBP 25-hydroksycholesterolem (25-HC), niezależnie od tego, czy komórki są odporne na 25-HC (Lee, P.C. i DeBose-Boyd, R.A. (2010). J. Lipid Res. 51(1):192-201; Lee, P.C., et al. (2007). J. Lipid Res. 48(9):1944-1954).
Analiza Western Blotting: Reprezentatywna partia wykryła endogenny SCAP immunoprecypitowany z lizatu komórek CHO przez poliklonalne przeciwciało SCAP (Sakai, J., et al. (1997). J. Biol. Chem. 272(32):20213-20221).
Analiza immunocytochemiczna: Reprezentatywna partia zlokalizowała nadeksprymowany SCAP chomika w ER i otoczce jądrowej przez fluorescencyjne barwienie immunocytochemiczne 3% utrwalonych paraformaldehydem, 0.01% przepuszczalnych dla saponiny stabilnych transfekantów CHO (Sakai, J., et al. (1997). J. Biol. Chem. 272(32):20213-20221).

Przeciwciało anty-SCAP, klon 9D5 jest przeciwciałem przeciwko SCAP do stosowania w Western Blotting, Immunocytochemii.

Biochem/physiol Actions

Klon 9D5 wykrył docelowe pasmo w lizacie i ekstrakcie błonowym z komórek CHO-K1, ale nie z linii komórkowej CHO SRD-13A z niedoborem SCAP.

Physical form

Format: Oczyszczony

Analysis Note

Identity Confirmation by Isotyping Test.

Isotyping Analysis: The identity of this monoclonal antibody is confirmed by isotyping test to be IgG2bκ.

Other Notes

Stężenie: Należy zapoznać się z arkuszem danych dla konkretnej partii.

Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.

Informacja o środkach bezpieczeństwa

• Klasa składowania: 12 - Non Combustible Liquids
• Co się dzieje?: WGK 1