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Tripsina from porcine pancreas

~1500 U/mg

• Número de CAS: 9002-07-7
• Comisión internacional de enzimas: 3.4.21.4 (BRENDA, IUBMB)
• EC Number: 232-650-8
• MDL number: MFCD00082094
• UNSPSC Code: 12352204
• NACRES: NA.54

Propiedades

• form: powder
• specific activity: ~1500 U/mg
• mol wt: 23.8 kDa
• foreign activity: chymotrypsin ≤0.1%
• storage temp.: 2-8°C

Descripción

Application

Para la digestión de los péptidos con tripsina, utilice una proporción de aproximadamente 1:100 a 1:20 de tripsina:péptido. La utilización habitual de este producto es la separación de las células adherentes de una superficie de cultivo. La concentración necesaria de tripsina para separar las células de su sustrato depende fundamentalmente del tipo de célula y de la edad del cultivo. También se han utilizado tripsinas para la re-suspensión de células durante el cultivo celular, en investigación en proteómica para la digestión de proteínas y en varias digestiones en gel†. Otras aplicaciones son la evaluación de la cristalización mediante técnicas de membrana y en un estudio para determinar que las tasas de plegado y los rendimientos de las proteínas pueden limitarse por la presencia de trampas cinéticas.

Biochem/physiol Actions

La tripsina rompe los péptidos por el lado C-terminal de los restos de lisina y de arginina. La velocidad de hidrólisis de esta reacción se reduce si a cada lado del punto de rotura hay un residuo ácido, y la hidrólisis se interrumpe si en el lado carboxilo del sitio de ruptura hay un resto de prolina. El pH óptimo de actividad de la tripsina es 7-9. La tripsina también puede actuar rompiendo las uniones éster y amida de los derivados sintéticos de aminoácidos. Se añade EDTA a las disoluciones de tripsina como agente quelante que neutraliza los iones de calcio y de magnesio, los cuales ocultan los enlaces peptídicos sobre los que actúa la tripsina. La eliminación de esos iones aumenta la actividad enzimática.

Los inhibidores de las proteasas de serina, como DFP, TLCK, APMSF, AEBSEF y la aprotinina, entre otros, inhibirán la tripsina.

Unit Definition

Una unidad BAEE producirá una ΔA₂₅₃ de 0,001 por min a pH 7,6 y 25°C utilizando BAEE como sustrato. Una unidad BTEE = 320 unidades ATEE. Volumen de reacción = 3,2 ml (trayectoria de la luz 1 cm).

1 U corresponds to the amount of enzyme which increases the absorbance at 253 nm by 0.001 per minute at pH 7.6 and 25°C (N-benzoyl-L-arginine ethyl ester, Cat. No. 12880, as substrate)

Other Notes

Sales restrictions may apply

Información de seguridad

• pictograms: GHS08,GHS07
• signalword: Danger
• hcodes: H315,H319,H334,H335
• pcodes: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Hazard Classifications: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• target_organs: Respiratory system
• Storage Class: 11 - Combustible Solids
• wgk_germany: WGK 1
• ppe: dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves