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重组
expressed in E. coli
质量水平
包装
vial of 50 μL
浓度
20 ng/μL in TE buffer; DNA (1μg of plasmid DNA)
启动子
Promoter name: CMV
报告基因
RFP
筛选方法
kanamycin
运输
dry ice
储存温度
−20°C
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一般描述
Cas9-D10A切口酶共表达质粒RFP使用CMV启动子，可获得较强的Cas9-D10A瞬时表达。您可以使用MluI和NheI酶切将CMV替换为其它启动子。同时，使用XbaI酶切可使Cas9D10A表达质粒线性化，得到基于T7的mRNA产物。
应用
功能基因组
配对 Cas9 Nickase + RFP 用于：
配对 Cas9 Nickase + RFP 用于：
- 在多种细胞系中进行基因敲除
- 对不适合于RNAi的基因进行完全敲除
- 建立基因敲入细胞系，将启动子、融合标签或报告基因整合到内源性基因中
组分
1管含1μg Cas9-D10A Nickase-RFP质粒
请注意，该产品不含向导RNA序列。向导RNA必须通过定制CRISPR配对切口酶产品选项卡单独购买。
请注意，该产品不含向导RNA序列。向导RNA必须通过定制CRISPR配对切口酶产品选项卡单独购买。
外形
2 μg Sigma Cas9-D10A 切口酶-RFP 质粒
其他说明
来自酿脓链球菌的II型CRISPR/Cas系统经过包含两种分子元件，即一个Cas9蛋白和一个非编码向导RNA（gRNA），该系统经过基因改造而被用于真核系统中。Cas9核酸内切酶可在单个gRNA的引导下，在指定基因组位置上引入DNA双链断裂（DSB）。与锌指核酸酶（ZFN）诱导的DSB相似，细胞随后会激活内源性DNA修复程序，即非同源性末端接合（NHEJ）或同源重组修复机制（HDR），对目标DSB进行修复。RFP通过2A肽段连接，与Cas9切口酶蛋白的相同mRNA共表达，实现了对转染效率的追踪，也能通过荧光激活细胞分选术（FACS）对基因组编辑活性进行富集。
法律信息
CRISPR专利正在申请中
储存分类代码
10 - Combustible liquids
WGK
nwg
闪点(°F)
Not applicable
闪点(°C)
Not applicable
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实验方案
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